AADCd Family Workshop 4; Understanding Phenotype Vs Genotype in AADCd (MANDARIN)

AADCd

家庭研讨会 4

了解 AADCd 的表型与基因型

教授 （意⼤利）

Mita Bertoldi

⽂本转录 ...

Lisa

⼤家好！我在过去⼏天已经和⼤部分⼈⻅过⾯了，但是我还是想再次讲⼀讲开场⽩，并欢 迎 Bertoldi 教授加⼊我们。 感谢⼤家的参与，感谢 Bertoldi 教授今天加⼊我们。我是 Lisa Flint，AADC Research Trust（AADC 缺乏症研究信托基⾦会）的创始⼈，我也是⼀位⺟亲。我的⼉⼦ Jake 今年 23 岁，患有芳⾹族L-氨基酸脱羧酶 (AADC) 缺乏症。今天加⼊我的还有我的同事 Julie 和 在座的各位，庆祝 15 年的患者宣传活动，提升全球意识，并资助危重病研究。提前向⼤家 致歉，因为时间关系，我们没有时间逐⼀介绍各位。 AADCd 的表型与基因型是⼈们极为关注的话题，我们希望本次研讨会对各位有所帮助。 让我们⾸先欢迎我们的主讲⼈ Mita Bertoldi 教授，她是⼀位⽣物化学教授，专注了解蛋 ⽩质如何发挥作⽤以及其结构和功能之间的关系。Bertoldi 教授是本基⾦会⼗余年的好友 与合作伙伴，在意⼤利维罗纳⼤学的蛋⽩质化学实验室⼯作。现在，请 Mita 与⼤家进⾏ 分享。

Mita Bertoldi

医⽣

感谢 Lisa 邀请我进⾏今天下午的演讲，感谢⼤家来参加这个可能有点技术性的讲座，但我 会试试回答 Lisa 在过去⼏天提出的⼀些问题，并试试通过我的讲座与⼤家分享我的⻅解。 我在讲的时候会尽量慢⼀点，如果有什么不懂，请告诉我，我可以重复⼀下。这是 Lisa 给 我的题⽬；表型与基因型。我真的很⾼兴能在这⾥庆祝 AADC 缺乏症的 15 年患者宣传活 动。 幻灯⽚ 1 Lisa提出的第⼀个问题是 “AADCd 是⼀种单基因缺陷意味着什么？”。这个概念将引导我 们了解基因型的概念以及什么是基因型。 如你所知，基因是⼀段编码蛋⽩质的 DNA，例如眼睛的颜⾊由⼀个基因控制，头发的颜⾊ 由⼀个基因控制。众所周知，基因被组织在每个细胞核内的染⾊体上。染⾊体是由⾮常浓 缩的 DNA 组成的区域。⼈类在所有细胞类型的细胞核内有 23 条染⾊体。这些染⾊体分为 22 个同源染⾊体和 1 个性染⾊体，决定了性别，即⼥性或男性。 这意味着在我们的细胞核中，每条染⾊体有两个相同的“复制本”。因此，基因被组织在染 ⾊体 上，在我们的细胞中，每条染⾊体有两个“复制本”。1 号染⾊体有两份，2 号染⾊体 Page 1

有两份，以此类推。 这是因为⼀条染⾊体是⽗源的，⼀条染⾊体是⺟源的。所以每个基因都存在于⺟体和⽗体 染⾊体上。 我们的 DNA 被组织在染⾊体中。DNA 是细胞所有信息的储存器，我们有染⾊体组织的“复 制本”。因此，我们有 1 号染⾊体的两个“复制本”和 2 号染⾊体的两个“复制本”，所以我们 有⼀个基因的双份“复制本”。就是这个意思。 每个染⾊体，在细胞周期的⼀个特定阶段，都在组织两个姊妹染⾊体，因为它们在分裂。 这并不重要。 幻灯⽚ 2 基因型是指个体中的所有基因，即⼀个细胞中存在的所有基因。AADC 的基因属于，它存 在于 7 号染⾊体的短臂部分，这是⼀个⼈的全部基因型。这是⼀个男性，因为它有 XY 染 ⾊体，⼀个⼥性则有 XX 染⾊体。 AADC 基因就存在于此。你可以看到每条染⾊体有两个染⾊单体，两条臂，因为这是⼀个 分裂的细胞。 幻灯⽚ 3 但在其他没有分裂的细胞类型中，我们有两个单臂染⾊体的“复制本”。⽆论看到的是双倍 的或单倍的，都不重要。事实是，这两个“复制本”中，⼀个是⺟源的，⼀个是⽗源的，都 有⼀个⼩⼩的延伸。这是这个染⾊体的放⼤图，这些带是染⾊体带，它告诉我们基因的确 切位置，如厘⽶或⽶。AADC 的基因⼤约在这个区域。 每个⼈都有7号染⾊体的两个“复制本”，⼀个来⾃⺟亲，⼀个来⾃⽗亲，我们每个⼈都有位 于这个染⾊体上部的基因的两个“复制本”。 幻灯⽚ 4 在⽣物学中，从基因，从 DNA 有传递。通过被称为转录和翻译的两个途径，DNA 的信息 被转化为蛋⽩质。因此，存在于 DNA 上的信息被翻译成蛋⽩质。DNA，即基因，是由核 苷酸组成的，它是构成 DNA 的单⼀部分，即⽣物⼤分⼦，这个信息被转化为由氨基酸组 成的蛋⽩质。因此，AADC 的基因编码，通过正常的⽣物过程，将决定 AADC 蛋⽩的形 成。就 AADC ⽽⾔，它是发挥多巴胺和⾎清素的功能的蛋⽩质。 表型是指基因的表现⽅式。从技术上讲，眼睛颜⾊的基因可以拥有多个等位基因，因为眼 睛可以是棕⾊、绿⾊或蓝⾊。关于显性的问题，我试着做⼀个体系。 等位基因，或特征，是基因信息的表现形式。它是使我们的头发或眼睛呈现蓝⾊、棕⾊或 绿⾊的蛋⽩质。 Page 2

我展⽰⼀个例⼦。染⾊体上的基因型告诉我们这就是头发颜⾊的基因位置，但是每个⼈都 有两条染⾊体，⼀条来⾃⺟亲，⼀条来⾃⽗亲。在这个例⼦中，这个⼈有两条染⾊体，它 们有相同的颜⾊类型，即表型。基因就是头发的颜⾊。表型是棕⾊，这⾥是棕⾊，这⾥是 棕⾊。这使这个⼈有棕⾊头发的表型。 因为两个等位基因是基因的表现形式，这个姜⻩⾊的基因型使这个⼈的头发颜⾊为姜⻩ ⾊。 这是个更技术性的观点。⼤写字⺟意味着显性特征，⼩写字⺟意味着隐性特征。这个⼈有 两个⽗⺟，都有相同的显性棕发基因型。每⼀个⼈都给出了它的⼀个相等的基因，使⼉⼦ 与⽗⺟完全相同。 另外这个⼈也是如此。这种姜⻩⾊头发的表型的两个⽗⺟的头发颜⾊相同。每个⼈都给出 了相同的等位基因，因为没有其他可能的组合，所以⼉⼦的这个特征是同质的。 同质性意味着我们有相同的等位基因，即相同的基因。 幻灯⽚ 5 经典的孟德尔定律已经对显性进⾏了研究。 例如，当⼀个棕⾊眼睛的⼈与⼀个蓝⾊眼睛的⼈交配时会发⽣什么？我们知道，棕⾊眼睛 对蓝⾊眼睛⽽⾔是显性的。有这样⼀个⼈，这位⺟亲只能给出⼤写的 B，⽽⽗亲只能给出 ⼩写的 b。所以⼉⼦是杂合⼦，因为这两个特征，两个等位基因是不同的。但因为这个相 对这个是显性的，所以表型是棕⾊。所以我们看到有棕⾊眼睛的⼈，但我们不知道这些⼈ 是显性同型合⼦，还是杂合⼦。 如果两个杂合⼦相互杂合，就有可能会出现，例如⺟亲有这两种类型的遗传配⼦，或者⽗ 亲有这另外两种类型的遗传配⼦，于是就有了这样的组合；棕⾊眼睛的同型合⼦、棕⾊眼 睛的杂合⼦，以及蓝⾊眼睛的同型合⼦。 可以看到，基因型可能与表型不同，因为基因型是看⽗⺟的两个等位基因的组合。事实 上，你的孩⼦的基因型有两个部分，⼀个来⾃⽗亲，⼀个来⾃⺟亲。 显性会导致表型的不同。对于 AADC 缺陷，对于每个突变，我们不知道 AADC 的显性效 应，所以我们不能准确预测表型。这是我们可以预测的，但不确切。 这是显性的影响。如果⺟亲是蓝眼睛，她只能给出相同类型的配⼦。如果⽗亲的眼睛是棕 ⾊的，⽽且是杂合⼦，他可以提供两种类型的配⼦。有⼀些是 50% 棕⾊杂合⼦，50% 蓝 ⾊杂合⼦。 我告诉你们这些是为了理解基因型和表型。对于基因型来说，这很容易，因为只要进⾏基 因组分析，就可以看出是哪种突变。如果⼀个⼉⼦是复合杂合⼦，我将在后⾯的演讲中向 Page 3

你们展⽰，他有⼀个突变，⼀个来⾃⺟亲，⼀个来⾃⽗亲。 表型是突变的影响如何出现，是由⽬前不容易理解的 AADC 缺乏症的优势效应所决定的。 对于眼睛的颜⾊来说，这是不同的，这很容易。但是，如果我们有⼀个⾮常⼤的蛋⽩质， 它可能经历很多突变，那么关于表型的信息就更获得了。 幻灯⽚ 6 让我们看⼀下导致 AADC 蛋⽩的 DNA ⽚段。就是这⼀⼩段，我想回到之前的幻灯⽚—— 我们看到的是在编码 AADC 的基因⾥⾯，我们可以知道它的组织。 我们每个⼈，我们的孩⼦，都有两条 7 号染⾊体，⼀条来⾃⺟源，⼀条来⾃⽗源。AADC 基因是由这些⽅块组成的，即外显⼦，这是着编码区。这⾥⾯的 DNA 序列和在⼀起，构 成了蛋⽩质。 连接区不叫区域，它们是所谓的内含⼦。在这些区域也可能发⽣⼀些突变，例如台湾⼈的 突变是⼀种涉及剪接区的突变，它是内含⼦和外显⼦之间的边界区域。我稍后会再谈这个 问题。 7 号染⾊体上导致 AADC 蛋⽩的这段 DNA 是由编码区组成的，在翻译后会产⽣ AADC 蛋 ⽩。 因此，在 AADC 缺乏症中，同⼀基因有两个等位基因，⼀个是⺟源的，另⼀个是⽗源的。 幻灯⽚ 7 这是 AADC 基因的代表之⼀。这些参考资料告诉我们，也许受影响的⼈数⽐我们想象的要 多。AADC 可能并不像我们想象的那么极端罕⻅。这些是突变的类型。这些框是突变的分 组。⼀个星号代表⼀个缺失。整个蛋⽩质有 480 个氨基酸。这就是基因，但它编码的蛋⽩ 质有 480 个氨基酸。 当翻译停⽌在第 7 个氨基酸时，这表⽰蛋⽩质真的很短，被细胞系统降解了，并且没有⼯ 作。可以看到在右边的 DNA 上的突变，正是这种基因型，即精氨酸 7 号缺失，导致了蛋 ⽩质修改。这种缺失如果发⽣过早，会产⽣⼀种⽆法结合辅助因⼦、维⽣素 B6 或磷酸吡 哆醇辅助因⼦的蛋⽩质，并被细胞降解。 在这⾥，我⽤⻩⾊表⽰位于氨基酸中、与 PLP 结合的残基。因此，在这之前的每⼀个缺失 都会导致⼀个被降解的蛋⽩质，因此患者没有蛋⽩质。该等位基因不⽣成蛋⽩质。 相反，你看到的是⼀种替代，⾕氨酰胺替代赖氨酸，缬氨酸替代亮氨酸，或精氨酸替代组 氨酸。这是⼀个氨基酸的替换。氨基酸的替换会导致错义。错义是指在健康的蛋⽩质中， ⼀个在野⽣型中有特定功能的氨基酸被另⼀个可能造成损害的氨基酸所取代。 Page 4

因此，点突变，即⼀个氨基酸转换为另⼀个氨基酸，会产⽣错义突变，因为蛋⽩质它交换 了它的意义，在意义上它⽆法形成多巴胺和⾎清素。另外，⼀个氨基酸可能对蛋⽩质的功 能很重要。 这⾥有⼀个移码，已经添加了这两个字⺟“fs”，这是⼀个已发⽣的突变。酪氨酸 37 被交换 为苏氨酸，然后有⼀个改变，决定了蛋⽩质的不同含义，所以⼀下氨基酸被交换。如果看 到星号，则表⽰蛋⽩质已经到达第 37 个氨基酸，并在另外 5 个氨基酸上失去意义，不呈 现为正常蛋⽩质。蛋⽩质有缺失，然后蛋⽩质停⽌。 所以这个蛋⽩质更⻓了，37 + 5 即 42 个氨基酸，并且被降解了。患者没有 AADC 蛋⽩ 质。 这⾥的情况也是如此。脯氨酸 43 成为亮氨酸，成为⼀个移码。被称为移码的原因是有⼀ 个插⼊或缺失的单⼀ DNA 碱基，决定了核苷酸的读取转换，不为适当的氨基酸编码。这 是在翻译过程中，因为 DNA 是以密码⼦组织的。也就是说三个核苷酸，每三个核苷酸都 有相应的⼀个特定氨基酸。这就是所谓的遗传密码。 遗传密码的翻译将显⽰⼀个核苷酸三联体变成氨基酸。如果核苷酸三联体通过删除或插⼊ ⽽改变，就会出现读框移动，因此氨基酸都与原来的功能不同。 当⼀个氨基酸被换成另⼀个氨基酸时，就会出现错义突变。我们有移码的突变，当有⼀个 错义，然后有⼀个移码，⼀些不同的其他氨基酸如 21，然后它停⽌，因为当蛋⽩质翻译装 置遇到⼀个密码⼦，这就是所谓的停⽌密码⼦，这个装置会被分解，蛋⽩质的翻译就不会 继续下去。 我们可以有其他的移码，例如，异亮氨酸 33 与天冬酰胺交换，这是氨基酸的三字⺟代 码，然后我们有 60 个氨基酸的移码，到达⽐原始蛋⽩质⼤ 493，然后这个跳跃，翻译就 结束。当你找到移码时，它便会重复。 另⼀种类型的突变是剪接。剪接最好的是台湾的，我们在⾮编码区有⼀个突变，由于这个 原因，没有氨基酸参考。这种突变意味着当我们在 571 核苷酸时，3 个胞嘧啶被⻦苷交换 了，这是⼀种核苷酸的语⾔，有⼀个 DNA 的突变。但这确实是有害的，因为它产⽣了⼀ 个 238 蛋⽩质，⼤约在这⾥，氨基酸不能与 PLP 结合。因此，台湾的基因型确实是有害 的。它真的很严重，因为这些患者没有 AADC 蛋⽩质的功能。 ⼤约有 84/85 个，现在在新报道的数据和⽂献中，我看到这个数字可能增加到⼤约90个 突变，这⼤约导致了 120 个患者。我认为患者可能更多，根据过去⼏年记录的新变体，可 能是 140 个。我们认为这个数字可能会越来越⾼。 在 AADC 基因中，可能有⼀些偶然和随机的突变，可能会导致错义、移码、剪接和⾮义。 ⾮义是指缺失。蛋⽩质被截断得太厉害了。它不能继续与 PLP 结合。因此，在 PLP 能够结 合之前的每⼀个缺失都会产⽣⼀个物种，这个物种可能会被降解，因为它⽆法与 PLP 结 Page 5

合。 患者可能是同型合⼦或杂合⼦，因为我们可以说这是⼀个基因的“复制本”，例如⺟源性， 但我们每个⼈都有两个基因的“复制本”。如果我们携带相同的突变，就是同型合⼦，如果 我们携带不同的突变，就是杂合⼦。我将在⼏张幻灯⽚中再谈这个问题，向你们展⽰ AADCd 中同型合⼦或杂合⼦基因型和表型的这种情况。 幻灯⽚ 8 这是来⾃显⽰基因型的报告。⽂献中的基因型频率指的是突变的组合。可以看到这⾥有两 个。基因型是这⼀部分，有⼀个分号（；），表⽰⺟系；⽗系，⺟系；⽗系。⽽且你看这 是台湾的突变，不会产⽣蛋⽩质。 这是⼀个正常的⼦代蛋⽩变体，是由于两个等位基因，即两个基因上的相同突变造成的， ⼀个是⽗系，⼀个是⺟系。这就给出了频率。在所有被确认的 AADC 缺乏症患者中，台湾 ⼈约占四分之⼀。 然后我们有另⼀个表型和基因型，由这位作者两年前报告。你可以看到我们可以有同型合 ⼦或复合杂合型的情况。这表⽰我们有⼀个等位基因的突变和另⼀个等位基因的突变。 这就是没有蛋⽩质和单点突变。这被称为半合⼦，因为我们的基因型中有两个不同的基 因，但其中⼀个不产⽣蛋⽩质，所以唯⼀存在的蛋⽩质是另⼀个蛋⽩质。 因此，我们有同型合⼦杂合、半合⼦杂合和复合型杂合。这是⼀个例⼦，是同型合⼦杂 合，这是复合型杂合。 等位基因频率指的是单个等位基因的频率。如果我们看到基因型，这就是⼀个基因型，由 ⺟系和⽗系组成。如果我们看到等位基因频率，我们必须加倍。这两个等位基因⼀个来⾃ ⺟系，⼀个来⾃⽗系。 基因是指染⾊体上的物理位置。等位基因指的是单个的。要看它的等位基因频率，我必须 把这个算作⼀个，这个算作两个，然后再去看其他的有没有，⽐如这个是三个，⽽这个是 四个。 这就是⼀个基因型。两个相同的组合。这另⼀个基因型是两个不同的组合。这是另⼀个不 同的，两个不同的组合，但如果去数等位基因，得数⼀、⼆、三、四、五，所以台湾突变 的等位基因频率越来越多。我们必须在单⼀基因中增加⼀倍。 所以同型合⼦是指拥有两个相同的等位基因的⼈。 幻灯⽚ 9 在了解遗传基础即基因型后，基因型还不⾜以使我们理解疾病结果。在这⾥，我⽤了两个 Page 6

表格，来⾃ Tessa Wassenberg 在 2017 年的⼀篇论⽂，显⽰了 AADC 缺乏症的指南， 以及⼀些症状。⽽另⼀个表格则将症状分为常⻅的、不太常⻅的或⾮神经性的。 我想强调，我们关注建议。AADCd 的表型是⼴泛的。它⼴泛的原因是症状多种多样。⽽ 且经常出现不同的症状。其程度包含从⾮常严重到轻微。 当我们的患者有⾃主神经症状⽽⽆运动障碍时，应考虑 AADCd。基因型、有两个突变、 ⽣化和临床表型的相关性之间并⽆明确的关系。除了台湾⼈，因为这很容易。他们不⽣成 蛋⽩质。虽然，有⼀些表型在左旋多巴结合位点上有改变，⽽且我们将这些少数患者与左 旋多巴的反应性联系起来。我们现在必须⼩⼼，因为这是四年前的情况。 因此，我们得到的信息是，遗传学⾮常重要，因为它帮助我们识别基因和蛋⽩质的问题， 但仅有它也是不够的，因为我们必须了解蛋⽩质发⽣了什么。突变的结果是什么，因为这 能告诉我们蛋⽩质层⾯的问题是什么，以及这个问题是否与症状有关，这就是我的⼯作。 我尝试了解蛋⽩质的功能，并试图将这种功能失调与症状的严重程度联系起来。 幻灯⽚ 10 在这⾥，我想向你们展⽰台湾突变的经典案例。我之前提到，台湾突变通过⼀条 238 氨基 酸的单链，⽽不是 480。我已经代表了单体蛋⽩，向你们展⽰紫红⾊的连接部分，⼤约是 蛋⽩质的⼀半。这种绿⾊的蛋⽩质，就是这些患者所做的，永远不会折叠或获得这种形 式，因为它缺少完成结构的另⼀部分。 对于这个区域，我们发现这个⿊点是蛋⽩质，这是起效的蛋⽩质。这是台湾的蛋⽩质。它 在细胞组分中被恢复为不可溶，因为它不会⽣化折叠，所以它没有得到负责功能的结构。 这就像拥有⼀个没有结构的东西。你可以有⼀些东西，但如果它没有结构，就不可能有功 能。 幻灯⽚ 11 我想说明⼀下，对于健康⼈、健康的携带者、我们孩⼦的⽗⺟和受影响的患者的情况。 健康⼈有两条染⾊体，⼀条来⾃⺟亲，⼀条来⾃⽗亲，两个 AADC 基因，也就是两个等位 基因都能产⽣多肽链，即 AADC 蛋⽩质。这些基因被称为本地基因，这表⽰健康。它们产 ⽣野⽣型多肽。野⽣型即健康的多肽，我们有 100% 的健康蛋⽩质。 功能性 AADC 是⼀个同型合⼦⼆聚体。也就是说，⼀条多肽链与另⼀条多肽链相互作⽤， ⽽且相互作⽤是随机的。即两个可能都是⺟源的、都是⽗源的，或者可能是⼀个⽗源⼀个 ⺟源，但都没有差别，因为所有多肽都是健康的。它们没有被突变所改变，所以所谓的单 体，也就是单条多肽链的相互作⽤确实是随机的，当所有的多肽链都是健康的并且彼此相 同时，关联就会产⽣ AADC 蛋⽩的同质体。我们说同型合⼦⼆聚体是因为蛋⽩质的功能需 要是⼀个同型合⼦⼆聚体。 j

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这是⼀个功能完好的 PLP 结合，你可以看到⻩⾊的维⽣素 B6。当 PLP 结合时，蛋⽩质就 会发挥作⽤。这就是健康⼈的情况。 幻灯⽚ 12 健康的携带者，在这⾥我将缺失标记为⼀个红⾊的⼗字，⼀个点突变，或第⼆个点突变。 当携带者呈现健康的只⽣成健康的 AADC 蛋⽩质的染⾊体时，在缺失的情况下，这不产⽣ 蛋⽩质，因为⼤部分的缺失发⽣在 PLP 结合点之前。所以这并不⽣成蛋⽩质。 半合⼦中有⼀个健康的载体，它只有同型合⼦⼆聚体功能的蛋⽩质、同型合⼦⼆聚体功能 的野⽣型蛋⽩质，但数量是原始数量的⼀半。所以我们只有形成同型合⼦⼆聚体的功能多 肽链，⽽且数量是⼀半。 这是半合⼦的健康载体，之所以称为半合⼦，是因为只有⼀条染⾊体在发挥作⽤。这处于 杂合状态的健康携带者情况不同，因为⼀条染⾊体有功能，形成野⽣型健康蛋⽩，另⼀条 染⾊体有突变。所以我们有两种类型的多肽链。 本地的、野⽣型的、健康类型的蛋⽩质，和携带突变的多肽链。每条链都会随机地相互结 合形成⼆聚体，所以健康的载体中有复杂的群体。 野⽣型的同型合⼦⼆聚体，功能正常的蛋⽩质，两个链上只携带⼀个突变的同型合⼦⼆聚 体，以及⼀个链上携带⼀个突变⽽另⼀个链上没有突变的异源⼆聚体。 ⼀个很⼤的问题是在杂合上。这是⼀种杂合的情况，因为我们没有突变和有⼀个突变。这 不是问题，因为在这种情况，个体不制造这种蛋⽩质，所以这更容易理解和治疗。只有蛋 ⽩质的减少，所以⽗⺟可能出现的症状与充分发挥功能的 AADC 蛋⽩质数量的减少有关。 在这⾥，我们反⽽有不同的蛋⽩质群体，因为这条链会产⽣健康的链。这条链会产⽣变异 的链，它们可以随机地结合起来，形成这种组合，以及数量的问题。我可以说数量是 20%、25%、50% 吗？不能，因为这个问题是杂合性中的显性。在显性⽅⾯，我们正在深 ⼊研究显性的影响，⽬前还不能说数量。我们推测，由于健康的携带者不会出现 AADCd，可能是有野⽣类型的蛋⽩质，这是显性突变，但我们没有结果，因为直到现在， 我们还没有对健康携带者的杂合⼦进⾏深⼊研究。 幻灯⽚ 13 让我们来看看患者。有两种情况。我们有⼀种情况是缺失，或剪接，没有蛋⽩质，如果我 们在⼀条染⾊体上有⼀个缺失，没有蛋⽩质形成；如果两条染⾊体上有相同的缺失，没有 蛋⽩质，则导致孩⼦没有 AADC 蛋⽩质。 或者我们在两条染⾊体上有相同的突变，这些就是所谓的同型合⼦性患者，他们只有⼀条 多肽链，构成整个 AADC 群体。这些是同型合⼦多肽，同型合⼦多肽很容易研究，因为如 果我们了解缺陷在哪⾥以及意味着什么，就能轻松提出建议，并尝试找到解决⽅案。 Page 8

杂合⼦的情况更复杂，因为我们有⼀个半合⼦的条件，其中⼀个等位基因不产⽣蛋⽩质， 另⼀个产⽣蛋⽩质，但这个蛋⽩质是变异的。我们只有⼀条多肽链，也就是变异的那条， 多肽链的数量较少。或者有来⾃⺟亲和⽗亲的两个不同的突变，因此我们有⼀个⾮常不同 的组合，理论上是 25% 的同型合⼦⼆聚体携带突变 1，25% 的同型合⼦⼆聚体携带突变 2，50% 的异源⼆聚体携带两个突变。因此，杂合⼦的情况更加复杂。 幻灯⽚ 14 有⼈问，我们能预测疾病的结果吗？ 可以根据模型中的酶的功能来预测疾病的严重程度。 为了回答这个问题，我了解了⽣物化学。我们可以预测酶的功能。如果我们想预测问题是 什么，就必须了解蛋⽩质的功能，这取决于蛋⽩质的结构。 蛋⽩质⼀个部分的结构修改可以决定⼀个精确的功能效果。我们都知道这种蛋⽩质， AADC，由左旋多巴和 5-羟基⾊氨酸形成多巴胺和⾎清素，是重要的神经递质。 这就是这种蛋⽩质。我已经展⽰了⼀些已经确定的、经过我们研究的突变。 我们必须收集结构数据以了解蛋⽩质的排列⽅式。这些都是技术性的⽣物化学⽅法，但其 含义是我们必须知道结构中的什么被改变了。例如，我们发现在这个突变中，这个⾮常早 期和末端的部分，确实对活性位点造成了很⼤的损害。⽽这⾥的突变的破坏性则较⼩。 因此，我们可以预测，收集结构数据，并收集催化参数数据，即功能数据，它是多巴胺和 ⾎清素的数量。我们可以把这两组数据放在⼀起，了解哪些催化参数如何被改变。这是⼀ 个化学反应的问题，因为从左旋多巴转化为多巴胺的某个步骤被改变了，还是⼀个结合的 问题，因为在这⾥左旋多巴和 5-羟基⾊氨酸结合在⼀起，但例如这⾥的突变阻⽌了多巴的 结合或改变了多巴的结合。 多巴胺和⾎清素形成较少的原因可能有很多种，我们正在寻找可能的原因。如果我们了解 反应的化学性质就可以了，但如果问题出在结合上，我们可以建议临床医⽣尝试包括多巴 和 5-羟基⾊氨酸的疗法，因为这可以帮助患者结合底物。蛋⽩质的问题只是⼀个结合问 题，不是功能问题，不是化学问题。 如果在反应中反⽽出现了化学问题，如果对活性⾄关重要的氨基酸发⽣了变化，这就是另 ⼀点，因为我们有功能不佳的蛋⽩质。它不能改善活性，所以我们必须为患者提供健康 的、功能良好的其他 AADC 蛋⽩质。 了解损害、突变在哪个层⾯上的发挥作⽤很重要。也就是说，哪个氨基酸发⽣了变化，替 代物是什么，替代物对分⼦的结构和功能有何影响。 然后将每个突变分配给⼀个特定的蛋⽩质区域。我们已经通过对病理、致病性突变进⾏研 Page 9

究了解到，这个区域确实与其有联系，以⼀种多⽶诺⻣牌效应与活性部位相连。因此，如 果我们改变这⾥的东西，蛋⽩质就不能发挥功能，如果我们改变这⾥的东西，蛋⽩质就不 能发挥功能。如果我们改变这⾥的东西，后果便没有那么糟糕。事实是它并不那么严重。 所以我们可以找到⼀个区域来关联蛋⽩质 AADC 上突变的严重程度。 这并不意味着我们可以将严重程度与症状联系起来，但我们正在这样做，因为当了解到蛋 ⽩质是如何被控制的时候，便可以思考并抵消这种影响。 我们正在努⼒的⽬标是，我们在收集差不多准备好了的最终数据，可以关联病理的严重性 和温和性与影响蛋⽩质功能的结构修改的严重性和温和性。我们在寻找相关性，寻找症状 与蛋⽩质结构和功能之间的联系，这就是蛋⽩质的研究的⽬的。 幻灯⽚ 15 在纯合情况下，相同的突变会产⽣相同的多肽链，因此我们只有⼀种类型的同型合⼦⼆聚 体。对于同型合⼦⼆聚体，更容易进⾏严重性预测，并建议或证实治疗⽅法。 例如，我们可以看到在同型合⼦⼆聚体中，只需要处理⼀个蛋⽩质种类。那些阻碍辅助因 ⼦结合的修改可以⽤⼤量的辅助因⼦来解决，我知道这是为患者提供的。 到⽬前为⽌，医学治疗对⼏乎所有患者都是⼀样的，这就是为什么科学和研究的⽬标是更 精确的、个性化的治疗，因为每个患者都有⾃⾝的突变，⽽每个突变都是不同的。 复合杂合型的问题是，我们有两条多肽链和三种可能的 AADC ⼆聚体组合。两个同型合⼦ ⼆聚体，每个都携带⼀个突变和异源⼆聚体。 我们在发表⼀篇关于两个异源⼆聚体蛋⽩的论⽂。我们发现，异源⼆聚体的⽣化特征和杂 合⼦患者的临床症状之间存在差异。这有⼀定的意义，因为杂合⼦患者携带的是杂合⼦， 但也携带两个同型合⼦，所以在这篇论⽂中，在这项调查中，我们提出突变可以正向或负 向互补。 互补是什么意思？当我们有两个不同的突变，并且我们看到异源⼆聚体的活性⾼于两个同 型合⼦⼆聚体的平均值时，即说互补是正的。如果活性较低，即说互补是负的。 我们发现，异源⼆聚体的互补性是有道理的。我们正在研究和了解控制显性的因素。例 如，如果两个突变中的⼀个产⽣了不溶性的蛋⽩质，表⾯上的许多突变产⽣了聚集，这反 映在可溶性蛋⽩质的表达程度上，也反映在异源⼆聚体中。 然后是氨基酸的替换的影响。因为两个活性部位在这⾥，如果⼀个突变在这⾥，另⼀个突 变在这⾥，这对活性部位没有影响。但是如果⼀个突变在这⾥，另⼀个在这⾥，这两个不 同的突变对两个活性位点都有影响，所以通常互补是负的 。 原因是什么？如果它们只影响⼀个活性位点，那么互补就是积极的？如果⼀个同型合⼦⼆ Page 10

聚体受 到⾼度影响，即使异源⼆聚体可以显⽰正向互补，临床表型也很严重。复合杂合⼦ 患者的两个异源⼆聚体的活性确实很重要。我们不能只考虑异源⼆聚体的蛋⽩质。 我可以理解这相当复杂。问题是，复杂的原因是在复合杂合⼦中，有三个不同的 AADC 蛋 ⽩质群，并且取决于同型合⼦ 1 和 2 以及异型 1 和 2 的突变类型，会有不同的结果。 这就是为什么⼀个复合杂合型的症状多样的原因。AADC 蛋⽩质的群体确实很⼤，但我们 已经找到了⼀种⽣化⽅法，来研究复合杂合型并分析蛋⽩质群体中所有物种的影响。 我们还想对健康的携带者进⾏研究，因为这对了解等位基因显性⾮常重要。 幻灯⽚ 16 另⼀个问题是，我们能否根据突变的类型来预测⼀个孩⼦是否适合基因治疗，或者另⼀个 孩⼦是否对该治疗的反应更好。 我们已经报告了⼀些治疗预测的结果。我将在下⾯向你们展⽰⼀个⾮常乐观的例⼦，它可 以验证或引导药物治疗。但是，关于中度表型的基因治疗问题，意味着⽣成⼀些活性蛋⽩ 质的表型，到现在为⽌还很难回答。 如果我们⽤健康的 AADC 灌注，我们的想法是，产⽣⼀种类似于健康携带者的状况，即⽗ ⺟拥有⼀个健康的等位基因和⼀个受影响的等位基因。因此，⼀般的设想是，对于⼀个温 和的表型，基因治疗⽅法可能会改善，因为我们给出了⼀些野⽣型蛋⽩。但我们不知道什 么是优势。我们不知道如果我们把这个健康的 AADC 放⼊细胞中，这个多肽链会不会对患 者体内仍在⽣成、仍在形成的链起主导作⽤。 对于不⽣成 AADC 的严重受损的患者来说，这肯定是⼀个有益的结果。到⽬前为⽌，还没 有⾜够的数据能解释，我们必须更好地理解等位基因的优势效应。基因治疗中的⼀件事 是，患者没有因基因型、蛋⽩质特征⽽聚类。在⼀些记录中，我们没有关于基因型的信 息，所以看到的结果，改善的结果，与开始时的基因型和蛋⽩质特征不匹配。因此，我⽆ 法深⼊理解这个问题，因为我们没有——⽽且基因治疗是在⼏年前开始的——没有很多的 报告解释，中度表型发育中的⼀些⾥程碑和症状得到的改善。 对于台湾的患者，以及其他接受基因治疗的患者，他们的情况得到了改善。我们的想法 是，他们类似于⽗⺟的表型，因为你给他们⼀些健康的 AADC。 最近，在与 Lisa 的合作中，我们试图将多巴胺和⾎清素的研究结合起来，因为最近⼈们都 在研究⽣成多巴胺的酶，却没有怎么对⾎清素进⾏研究。原因是我们不能将基因型和表型 与独特的症状完全匹配，所以我们正在评估已经发表的变体中产⽣的⾎清素，以确定从蛋 ⽩质的⻆度来看，多巴胺⾎清素的⽐例⾮常明显。 如果多巴胺减少，但⾎清素作为健康的蛋⽩质被制造出来，这可以告诉我们⼀些关于患者 情绪控制的情况。这可以解释为什么有些患者的情绪变化⽐其他⼈⼤，以及⾎清素可能导 Page 11

致的其他⾮系统性症状。 ⽬前，我们在重新确定患者携带的所有蛋⽩质的⾎清素⽔平，以便与多巴胺⽔平相匹配， 看⼆者间是否存在⼀些差异。这可能会使我们获得在治疗患者和了解突变⽅⾯的建议。 幻灯⽚ 17 我们还不能将基因型和表型与独特的疾病症状相匹配的另⼀个原因是个体差异。 这是 AADC，这是 AADC 在⽣成多巴胺时的反应。这个反应发⽣在涉及其他重要分⼦（如 去甲肾上腺素、肾上腺素和酪氨酸）的途径中。每个⼈在⽣成这些分⼦时都有⼀些差异， 因此，如果把患者的症状加上个体差异性，就可以理解为什么不那么容易匹配了。这就像 对疫苗接种的反应⼀样，⽐如说我们每个⼈都接种了疫苗，有的⼈发了烧，有的⼈没发 烧，在什么基础上是未知的。我们⼀般说免疫系统的反应好或不好，等等。但是，疾病症 状不仅受 AADC 损伤的⽀配，还受多巴胺和⾎清素途径中的⼤量其他分⼦的⽀配。 因此，我们在努⼒了解尽可能多的症状，但要做到这⼀点，例如我们⼏天前获得了酪氨酸 羟化酶，想了解这两种蛋⽩质在野⽣型和突变型之间是否存在⼀些关联。 这⾮常有趣，因为它能告诉我们，在⼀些变体中，问题不仅是障碍本⾝，⽽且还包括从前 ⼀个酶到下⼀个酶的传递。这很复杂，我们有⼀个神经元细胞模型，⼏天后将成为 Crispr。我们正在开展这些实验，不仅在体外、在溶液中，也在细胞中开展。 幻灯⽚ 18 在这⾥，我想向⼤家展⽰⼀些在出现可能性和希望。我与同事讨论了从成纤维细胞患者⾝ 上提取的 iPSC ⼲细胞。 在这⾥，我们的出版物涉及两个患者，其中⼀个携带⼀个同型合⼦突变，导致活性部位的 催化缺陷。这是对活性部位的⼀个重要残基的化学修饰。 这是⼀个复合杂合⼦，它有缺失氨基酸，所以没有蛋⽩质，只⽣成这个蛋⽩质，所以是半 杂合⼦。这个缺陷较为温和，它的位置在底物位点附近。我们已经确定，这种蛋⽩质对左 旋多巴的亲和⼒下降。我们与英国的 Manju Kurian 教授和 Simon Heales 教授（你们明 天会听到他们的分享）合作，建议对患者的这些细胞进⾏左旋多巴治疗，在突变 2 的功能 中，即治疗细胞对左旋多巴有反应。这个突变的问题是催化缺陷，我们可以⽤其他分⼦ （即所谓的伴侣）绕过催化步骤的分⼦来解决这个问题。 这些⽰例可以为患者的治疗提供⼀些建议，我知道从细胞到患者都有⼤量的问题，但我们 可能有办法改善对这类患者的治疗。 t

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幻灯⽚ 19 这是我的⼩组。我想给你们看 Giada 的照⽚，她现在在伦敦进⾏关于 AADC 的研究。 Giovanni 在认真⽐较蛋⽩质，将症状的严重程度与结构和功能修改的类型联系起来。我们 有望取得有⾮常重要的结果。 最后，感谢 Lisa 的⽀持和友谊以及 AADC 研究基⾦会。

问答环节 Julie

是否有某些药物对某些突变的反应更好？ Mita Bertoldi 教授 到⽬前为⽌，治疗依据三种类型的治疗展开。吡哆醇，这是对辅酶的供应，因为如果没有 辅酶，酶就不能发挥作⽤。多巴胺激动剂，因为酶没有⽣成⾜够的多巴胺，所以激动剂让 多巴胺受体传递信息。然后是单胺氧化酶抑制剂，因为通常情况下，多巴胺在⽣理上被单 胺氧化酶破坏，如果我们给予抑制剂，将防⽌这些少量的多巴胺被破坏。 因此，选择的治疗就是这个。在这个意义上来说，这三种成分和其他成分都是治疗的关 键。这不关乎哪种功能更好，⽽是在多巴胺激动剂⾥，通过患者实验发现，使⽤⼀种多巴 胺激动剂的反应⽐使⽤另⼀种更好，这关乎个⼈敏感性的领域。 这与 AADC ⽆关，因为多巴胺激动剂与多巴胺受体相互作⽤。对于 AADC，可能的治疗⽅ 法是左旋多巴，但这只是在⽣化数据显⽰多巴结合有问题的情况下，否则是没有⽤的。如 果突变触及 PLP 结合位点的⼀些残基，PLP 便不能很好地结合，那么更⼤量的吡哆醇就很 重要了。 伴侣可能很重要。⽬前，我们开始开展⼀组实验，因为我们已经了解到两个单体之间的界 ⾯残基确实很重要，我们想应⽤⼀些伴侣，使界⾯更加交错，以便让酶更好地发挥作⽤。 在同⼀组激动剂、或治疗、或药物中，治疗在个体上具有差异性。这与突变没有关系。 Julie

你认为基因治疗会适合我⼀岁的⼉⼦吗？他属于中度表型。还是说，他应该继续药物治 疗？ Page 13

教授 我是⼀名⽣物化学家，不是医⽣或临床医⽣。我的依据只是科学的结果。我认为 Krys 进⾏ 的基因治疗针对的是⼤脑的⼀个部分，以更有针对性的⽅式灌注多巴胺。 但我认为，如果表型很严重，那么基因治疗⼏乎是⼀种必要的治疗⽅法。我不能说，因为 没有研究，但在⼏年后，当看到神经递质在更⼤时间跨度上的进展，我就会有更多关于⽤ 基因疗法治疗的结果的公开数据，这将使我们将得到更合理的数据。 从我个⼈的⻆度来说，我认为基因治疗可能对⾮常⼩的婴⼉有帮助，因为它可以防⽌在多 年的⼉童实验之后，在多年的多巴胺和⾎清素减少之后，对⼤脑的损害。我也理解对年级 更⼤的患者的同情基因治疗。 我可以分享我个⼈的建议，采取基因疗法，但到⽬前为⽌我还没有科学数据。我们希望在 短时间内能有这些数据，但就⽬前⽽⾔，以我的专业知识，我不能说什么。⾮常抱歉，但 我不能说什么，因为没有合理的依据。 Mita Bertoldi

Julie

基因治疗后，⽣化结果显⽰多巴胺⽽⾮⾎清素增加，你认为家庭应该考虑⽤ SSRI 治疗⾎清 素缺乏症吗？ Mita Bertoldi 教授 从⽂献中发表的内容来看，⼈们对 5-羟基⾊氨酸和⾎清素激动剂了解得并不多。我知道， 由于⾎清素对精神症状的影响⽐对运动症状的影响更⼤，我们必须对细胞模型进⾏更多的 研究，以了解这样做是否真的有好处。 如果这真的有益，因为我认为多巴胺激动剂和 SSRi 的重叠可能有益，但我们没有⾜够的数 据来回答这个问题，不过⽬前⼀些相关研究正在开展中。问题是，这种疾病很多年来被忽 视。基础研究真正开始的时间是在 10 年前。 作为⼀名医⽣，对抗症状是⼀回事，你可以成功地做到这⼀点，但找到缺陷的分⼦原因并 对抗分⼦原因是另⼀回事。这确实是新事物，因此我们没有太多数据，但我们确实在努⼒ 填补这⼀空⽩。 Julie

你如何确定⼀个患有 AADC 的⼉童是否可以接受左旋多巴并对其有更好的反应？ Mita Bertoldi 教授 我可以测量⼀个参数，这个参数的技术名称是 Km，是⼀个常数。我们⽤动⼒学分析来测 Page 14

量，这个参数会告诉我们多巴对酶的亲和⼒信息。亲和⼒是亲抗原性，即多巴如何与酶结 合。 在健康的蛋⽩质中，多巴在纳摩尔范围内结合得⾮常健康，⽽在⼀些突变中，多巴在毫摩 尔范围内结合，所以不是那么多，因为我们需要毫摩尔数量来使多巴与酶结合。 因此，我们测量并发现这个突变是否适合接受多巴治疗。我们做到了，⽽且孩⼦继续这样 做。 Lisa

你可以确定左旋多巴在杂合⼦、同合⼦和半合⼦中可能的反应吗？ Mita Bertoldi 教授 可以。 Lisa

在不知道显性时也可以做到吗？对于所有的组合，都可以进⾏左旋多巴分析吧？ Mita Bertoldi 教授 只要有酶，就可以做。我可以给酶和左旋多巴，并测量⽣成速率，我把这些点放在图上， 从数学的⻆度来看，我可以提取亲和⼒，即酶、同质体、异质体对左旋多巴的亲抗原性。 Lisa

从你之前给我们展⽰的突变组合列表中，你能否预测左旋多巴会对谁起作⽤？ Mita Bertoldi 教授 我们已经为许多突变确定了这个参数。有公开的数据，我们为许多⼈确定这⼀点，我刚刚 提交了⼀篇关于两个杂合⼦突变的论⽂。有三种类型的蛋⽩质，我给出了对底物的亲和⼒ 和化学活性的理由。我们能够了解蛋⽩质功能失调的影响是否由多巴结合不佳⽽导致，这 是成为左旋多巴治疗候选⼈的前提条件。 例如，所有活性部位的突变都有多巴结合的问题。界⾯突变，其中⼀些突变有多巴结合的 问题。 Lisa

为了简单起⻅，在那份合并突变的清单中，你能否预测哪些突变会对左旋多巴有反应， Page 15

我们⼤多数家庭知道他们的突变组合是什么，这可以帮助他们进⾏识别，然后便能和医⽣ 讨论可能的治疗⽅案。 Mita Bertoldi 教授。 如果你把相应的突变组合发给我，我可以告诉你我们是否已经或将表征相应的参数。 Lisa

还有左旋多巴和多巴胺激动剂的组合。你能否知道他们的反应如何？ Mita Bertoldi 教授 我不知道从医学的⻆度来看，将左旋多巴和多巴胺激动剂结合起来会有什么结果，因为它 是⼀样的。但它们在两个不同的系统上发挥作⽤。⼀个增加多巴胺，另⼀个占据了受体。 我不知道是否存在交叉作⽤和竞争。 Julie

和 Crisp ON 最近经常出现在新闻中，这种治疗⽅法是否为⼀种选择，你认 为 在未来可能被它治愈吗？ Mita Bertoldi 教授 这个问题确实很重要，但到⽬前为⽌，我们在简单的细胞模型中的 Crispr 单基因已经成 功。我认为对于未来来说，这真的很有趣，因为你将患病基因沉寂，并在细胞内放⼊⼀个 作⽤的 AADC 基因。从理论的⻆度来看，这很容易。在⼀些简单的细胞模型（如神经元细 胞）中，这很容易，但通过⼈类细胞，然后到⽣物体，就有点困难了。 我认为每⼀个可以对抗这种罕⻅类型疾病的策略都应被考虑，但我们需要在之前进⾏⼀些 基础研究。我认为在未来是有可能的，但现在我们应该⼀步步⾛。 Crispr KAS 9 AADC

Julie

我们听说关于肠道细菌/益⽣菌增加 AADC 活性的研究很不过。其机制是什么？ Mita Bertoldi 教授 肠道细菌有⾃⼰的 AADC，所以其机制是它们供应外周 AADC。这⾮常重要。我们正在考 虑尝试针对肾脏的酶替代疗法，因为针对⼤脑很困难，要通过⾎脑屏障。这可能会使我们 开始帮助患者。回答是：它很重要，因为它能增加多巴胺，不过是外周多巴胺，⽽⼉童的 问题是⼤脑多巴胺。因此，它在某些⽅⾯可能有⽤，因为在肾脏中，⼤部分肾上腺素和去 甲肾上腺素的⽣成都是外周的，所以它能提升这种神经递质，但该⽅式应该与其他⽅法相 Page 16

结合。这个话题⾮常有趣。 Julie

氨基酸含量较⾼的蛋⽩质⻝物是否会有好处？ Mita Bertoldi 教授 含有多巴胺和⾎清素前体的蛋⽩质⻝物是动物蛋⽩，即动物来源的蛋⽩质。对于素⻝主义 者来说，很遗憾，他们必须通过药物来获得同样的蛋⽩质。动物蛋⽩中含有⼤量的，如⾊ 氨酸，⽽植物蛋⽩中的含量则不是那么多。⼈应该多吃⾖类，像英国⼈⼀样，像我⼀样在 早上吃⾖类。我是在英国发现了早餐的⾖类，并且⾮常喜欢⾖类。动物蛋⽩是⼀个来源。 另外⽜奶中含有特别丰富的⾊氨酸。晚上喝⼀杯⾊氨酸丰富的⽜奶，通过酶 5-羟基⾊氨酸 转化为⾎清素，为我们提供安宁、平静、喜悦和助眠的神经递质。因此，我们必须⽤⾊氨 酸和苯丙氨酸或⾁的酪氨酸等来供应动物蛋⽩（⽜奶）。蔬菜含有必需的氨基酸，因为苯 丙氨酸和⾊氨酸是⼈体必需的。我们⽣成这些氨基酸，但数量不够。因此，如果患者是素 ⻝者，就必须⽤药物等来供应这些必需的氨基酸。 Julie

我发现补充 Forskolin Cyclic AMP 可以改善我⼉⼦的症状。他是复合杂合⼦型。请分享⼀ 下对环状 AMP 在酸酶活动中的参与的看法。 Mita Bertoldi 教授 环状 AMP 是⼀种调节分⼦。我们不知道环状 AMP 和 AADC 之间的确切联系，但环状 AMP 的功能之⼀是激活介导磷酸化的酶。 磷酸化是调节许多酶活性的机制。我们对 AADC 的磷酸化⼀⽆所知，但我们对 AADC 在 溶液中的初步数据显⽰——我的⼀个博⼠⽣去了美国，研究 AADC 的磷酸化，发现活性部 位的⼀些丝氨酸残基被磷酸化了。 因此，这是⼀个可能的效果，但我没有科学依据，环状 AMP 的有益效果是使磷酸化⽔平 更⾼，AADC 的磷酸化对多巴胺和⾎清素的⽣产速度⽅⾯的化学反应没有影响，但似乎它 使多巴和⾊氨酸更强，它会增加多巴和⾊氨酸与 AADC 的结合亲和⼒。Lisa 之前问过我那 个参数。 AADC 活性部位的⼀些残基的磷酸化，好像改善了多巴和⾊氨酸的结合，从⽽改善了多巴 胺和⾎清素。我可以认为，在在结合多巴和多巴胺⽅⾯不那么有效的某些变体中，这可能 很重要。它可能有⼀些影响，但到⽬前为⽌，我唯⼀获得的结果是在体外。我不知道它是 否发⽣在细胞中。在体外，磷酸化增强了对底物的亲和⼒，所以它对孩⼦的影响可能是由 于磷酸化调节的改善造成的。这是我们研究的另⼀个主题。我们想知道在野⽣型蛋⽩中观 察到的这种磷酸化是否会对致病变体中的其他⼈产⽣同样的影响。 Page 17

Lisa

粉末状的⽜肾上腺⽪质提取物是否也会增加 AADC ⼉童的外周去甲肾上腺素和肾上腺素， 使他们能够更好地管理⽇常压⼒⽔平？ Mita Bertoldi 教授 我真的不知道，因为这个问题更多地属于医学问题的范畴。我认为肾上腺⽪质提取物对提 ⾼肾上腺素或去甲肾上腺素的⽔平有好处，但这确实超出了我的专业范围。从理性的⻆度 来看，我不知道有什么反作⽤或交叉作⽤。可能有⼀定的道理。 Lisa

克罗恩病对肠道的影响很⼤，有时医⽣会通过粪便微⽣物群移植 (FMT) 来改善症状。你认 为像这样的疗法是否是 AADC 患者的⼀个选择，以改善肠道功能并增加 AADC 的⽣成？ Mita Bertoldi 教授 这是另⼀个我不知道的问题，因为我研究的是与 AADC 的直接关系。我可以查看⽂献，看 看这与多巴胺和⾎清素的合成途径之间是否存在⼀些相互作⽤。如果我看到有⼀些分⼦参 与到该途径中，那么回答便是可能可以，但我不知道。 Lisa

我想李博⼠所说的 PS128 可能会有帮助，所以我们也许可以把这个问题反馈给李博⼠。 Mita Bertoldi 教授 我希望⾃⼰表达清楚，没有说得太快。这是更技术性的问题。如果你们在接下来的⼏天⾥ 有更多的问题，可以把转给我。我很⾼兴能从我的⻆度来回答 AADC 缺乏症的相关问题。 Lisa

我还有⼀个问题。对于携带者，特别是半合⼦和纯合⼦，你能预测他们是否会成为有症状 的携带者，并推荐治疗⽅法？杂合⼦因为显性⽽更加复杂，但在半合⼦和纯合⼦中，你是 否可以预测他们会不会出现症状，是否有可能得到治疗？ Mita Bertoldi 教授 从研究的⻆度来看，这些类型的⼈很有趣。我们不知道，我们没有关于即半合⼦携带者的 信息。我们现在所做的是，我们的系统功能试图模仿携带者的基因型，以了解可能出现的 不那么严重的症状是否可能是因为另⼀个突变的等位基因导致的，并给出⼀些建议。我们 需要有分⼦基础以给出建议，但现在我们还没有。 Page 18

Lisa

，谢谢你的精彩分享。我知道每个⼈都会回看并认真学习你所分享的内容，并且肯定 会有问题。请继续你的研究。理解基因对为每⼀个表现不同的⼉童提供定制药物⾮常重 要。了解更多这⽅⾯的信息再好不过了。因此，⾮常感谢你今天的发⾔和你付出的时间和 经历。 Mita Bertoldi 教授 这是我的荣幸。我真的很想念在伦敦的会议。能与家庭和孩⼦们⻅⾯真的很不错。我们可 以相互交谈，了解问题所在。我发现家⻓们对科学问题⾮常了解，所以这对我来说也⾮常 重要和有意义。 Mita

Lisa

谢谢你。感谢⼤家今天的参与，希望明天能在最后⼀个分享上⻅到⼤家。⽆论你在哪⾥， 希望你度过愉快的早晨、下午或晚上。

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AADCd Family Workshop 4 : Transcript Produced by Julie Ramsay Verified by Lisa Flint & Professor Mita Bertoldi Translations by

teamextended.com

The AADC Research Trust would like to thank all involved.

#CureAADC #CureAADCd Page 20