Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Cód. asignatura: Q0224-05
Nivel: Q108-07-70 Versión: 2.0 Página 142 de 156
PRÁCTICA 16 – SCRENING DE DROGAS RECREATIVAS O DE ABUSO 1. Objetivo • • •
Determinar la presencia de drogas recreativas o de abuso en muestras de orina proporcionadas por el docente. Aplicar los conceptos de la cadena de custodia y de consentimiento informado para estandarizar el proceso de recolección de muestras para screening de drogas recreativas. Establecer los criterios de inclusión y exclusión para la aceptación de matrices biológicas a ser sometidas a análisis de screening o confirmación de drogas recreativas o de abuso.
2. Resultados de aprendizaje esperados •
•
•
Seleccionar el método de análisis más adecuado para la determinación de marcadores óseos, electrolitos, gases sanguíneos, hormonas, marcadores tumorales y drogas de abuso, teniendo en cuenta las características técnicas de cada uno de ellos. Ejecutar los procesos preanalíticos, analíticos y posanalítico para la determinación de marcadores óseos, electrolitos, gases sanguíneos, hormonas, marcadores tumorales y drogas de abuso, teniendo en cuenta las normas de bioseguridad y el control de calidad respectivos Correlacionar los resultados de laboratorio con el estado de salud del paciente de acuerdo con lo descrito en la literatura médica.
3. Fundamento teórico 3.1 Introducción Las pruebas de drogas de abuso o recreativas se pueden clasificar en dos grandes categorías: pruebas realizadas en dependencias médicas y pruebas de drogas realizadas en el lugar de trabajo. Las pruebas realizadas en dependencias médicas se realizan en la mayoría de los laboratorios intrahospitalarios, así como en el consultorio de un médico, utilizando inmunoensayos disponibles o POC. Un resultado positivo para este tipo de pruebas puede o no ser confirmado por un método analítico alternativo, preferiblemente con cromatografía de gases / espectrometría de masas (GC / MS) porque no hay una consecuencia legal de un resultado positivo de la prueba, ya que la información se registra en el historial médico del paciente, y por tenas de confidencialidad, no se puede indicar el uso de estas drogas en su trabajo.
Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Cód. asignatura: Q0224-05
Nivel: Q108-07-70 Versión: 2.0 Página 143 de 156
En contraste, las pruebas de drogas en el lugar de trabajo tienen consecuencias legales y se puede negar un trabajo si una prueba de drogas es positiva para un posible nuevo empleado. Por lo tanto, se siguen procedimientos más rigurosos para garantizar que el resultado de la prueba es de hecho positivo más allá de una duda razonable. Después de la recolección de la muestra, se debe asegurar que esta se conserve sellada y se mantenga un procedimiento de cadena de custodia para garantizar quién tiene posesión de la muestra desde el momento de la recolección hasta el momento del informe del resultado no a adultere. Aunque se pueden usar inmunoensayos similares para las pruebas mencionadas como primera opción, la muestra debe ser confirmada por GC / MS o una técnica cromatográfica similar con identificación espectral de masas de las drogas usadas. (Dasgupta Amitava, 2012) Por otra parte, la persona que revise el resultado debe ser totalmente independiente del laboratorio que realizó la prueba, y en su entrevista con el paciente se debe confirmar que no exista otra explicación médica alternativa para la prueba positiva de drogas como, por ejemplo, positividad para morfina, porque el paciente fue recetad a tomar analgésicos que contienen codeína. Ambos tipos de pruebas pueden presentar los siguientes desafíos: • Las pruebas médicas y de drogas en el lugar de trabajo incluyen abuso frecuente de ácido lisérgico dietilamida (LSD), la misma que no puede ser detectada por este tipo de ensayos. • Muchas drogas sintéticas o de fabricación cacera pueden escapar a la detección. • Una persona puede intentar superar la prueba de drogas bebiendo una gran cantidad de líquido para diluir la orina porque las pruebas de drogas tienen un cierto límite de detección. • En las pruebas de drogas en el lugar de trabajo, una persona puede intentar adulterar la muestra; ciertas sustancias (shampoo, polvo de lavar ropa) son capaces de causar resultados falsos negativos cuando se usan ensayos de inmunocromatografía. • Una prueba de detección de drogas en la orina tiene una pequeña ventana de detección y solo puede detectar un abuso reciente, sin embargo, las pruebas de drogas capilares pueden eludir tales limitaciones.
3.1.1
Historia y Clasificación
Los Estados Unidos de Norteamérica tiene una de las estructuras más consolidadas en relación con el manejo y abuso de drogas. En 1.986, en la administración Reagan, se emitió la Orden Ejecutiva No. 12564 dirigir a todos los empleados federales involucrados en la aplicación de la ley, la seguridad nacional, protección de la vida y la propiedad, salud pública y seguridad, así como otras funciones que requiere un alto grado de confianza pública para ser sometido al tamizaje de drogas obligatorias. En 1974 se creó el Instituto Nacional de Abuso de Drogas (del inglés National Institute of Drug Abuse - NIDA) y se convirtió en la agencia líder para implementar del Programa Federal libre Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Nivel: Q108-07-70 Versión: 2.0
Cód. asignatura: Q0224-05
Página 144 de 156
de drogas en el trabajo. Más tarde NIDA fue transformó en el Servicio de salud Mental y abuso de sustancias (del inglés Substance Abuse and Mental Health Services Administration - SAMSHA) quien expidió la guía “Pautas obligatorias para el programa de Testeo de drogas en el lugar de trabajo”. Esta guía organizó y clasifico las drogas que eran de testeo obligatorio, así como se establecieron las pautas para la recolección adecuada de la muestra, el inicio de la cadena de custodia, y finalmente el análisis de muestra (cribado y confirmación por (GC / MS) por laboratorio certificado por SAMHSA. El cribado por Inmunoensayo debe realizarse utilizando un método aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA), mientras que la confirmación debe realizarse por una segunda técnica, preferiblemente por GC / MS. Este programa estableció la muestra primaria: orina para realizar el screening y muestras capilares (cabello) para pruebas confirmatorias. Además, clasificó a las drogas de abuso en las siguientes categorías, como se expresa en la Tabla 45: Tabla 45 Drogas recomendadas por la SAMSHA Primera recomendación Anfetamina Cocaína como Benzoilecgonina Opiáceos Marihuana Fenciclidina
3.1.2
Drogas de Abuso o recreativas Segunda recomendación
No recomendadas SAMHSA
3,4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) 3,4-metilendioxietilampetamina (MDEA) 3,4-metilendioxianfetamina (MDA)
Barbitúricos Benzodiacepinas Metadona Propoxifeno Oxicodona
Límites de detección
Este tipo de pruebas tienen ciertas limitaciones. La orina es la muestra más común usada para su detección, ya que los fármacos o metabolitos de fármaco se puede detectar más tiempo en la orina que en forma oral líquido (saliva) o sangre, las pruebas positivas de drogas en orina solo indican un abuso reciente de una droga ilícita pero no puede proporcionar ninguna información si el donante es un consumidor ocasional de una droga o abusador crónico de una droga. Usando un valor de corte de 1000 ng / ml, las anfetaminas se pueden detectar hasta 5 días después de su ingestión. Después de fumar un cigarrillo de marihuana, el metabolito de la marihuana puede ser detectado por 2 a 4 días en la orina. El uso más frecuente puede conducir a una detección de Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Nivel: Q108-07-70
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Cód. asignatura: Q0224-05
Versión: 2.0 Página 145 de 156
ventana de 1 mes. Las ventanas de detección de varios SAMHSA y no SAMHSA se enumeran en la Tabla 46. La pequeña ventana de detección de muestras de orina para detectar drogas de abuso puede extenderse a semanas, meses o incluso años cuando se usa el cabello como muestra alternativa para prueba de drogas, información valiosa sobre todo en casos puntuales de solicitar un trasplante de órganos. Drogas Recomendadas por SAMSHA
Periodo de ventana
Anfetamina Metanfetaminas Cocaína como benzoilecgonina Morfina Codeina Heroína(morfina) Fenciclidina Marihuana ( 11-o-Δ-9- tetrahydrocannabinol-9-ácido carboxílico
2 – 3 días 2 días 2 – 3 días 2 – 3 días 2 días 2 días 8 – 14 días 2 – 4 días después de un solo uno 30 días en abusadores crónicos
Drogas No recomendadas por SAMHSA BARBITÚRICOS De corta acción: pentobarbital, secobarbital De Larga duración: Fenobarbital
1 día 21 días
BENZODIAZEPINAS Acción corta: alprazolam, lorazepam Larga acción: diazepam Metadona Metaqualona Oxicodona Propoxifeno
3 días 30 días 3 días 3 días 2 – 4 días 1 – 2 días
4. Actividades prácticas La determinación de Drogas recreativas o de abuso se realizará por el método de inmunocromatografía lateral en muestras de orina, empleando pruebas monotest y multitest.
Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Nivel: Q108-07-70
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Versión: 2.0
Cód. asignatura: Q0224-05
Página 146 de 156
4.1 Reactivos, materiales y equipos Tabla 46 Materiales para la determinación de CEA REACTIVOS
MATERIALES
EQUIPOS
Tiras reactivas marcas i-Tell Tiras reactivas marca Orgenics – DrugCheck - 70220010
Tubos vidrio 12 x 75 nuevos
Cronómetro Pipetas automáticas de volumen variable de 20 a 200 µ L Pipetas automáticas de volumen variable de 200 a 1000 µ L
Guantes descartables 40 ml de orina Papel absorbente
4.1.1
Procedimiento
La determinación de drogas de abuso se llevará a cabo siguiendo los pasos propuestos por el fabricante. Como recomendación del fabricante, las muestras deben estar a temperatura ambiente antes de su procesamiento. Los pasos, en términos general son: 1. Preparar los materiales necesarios para el procesamiento, esto incluye: muestras, papel absorbente, guantes, cronómetro y demás. 2. Definir el número total de cassette y tubos de vidrio según el número de muestras a procesar. 3. Usando la pipetear proporcionada en el cassette, colocar 3 gotas de orina en la zona S, homogenizada previamente. 4. Dispara el cronómetro con el tiempo de 5 minutos. 5. Dejar el dispositivo en posición horizontal. 6. Realiza la lectura a los 5 minutos, pero nunca en más de 10 minutos. 7. Registrar los resultados, como se muestra en la ilustración
Ilustración 20 Interpretación resultados Drogas recreativas Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Cód. asignatura: Q0224-05
Nivel: Q108-07-70 Versión: 2.0 Página 147 de 156
4.2 Intervalos de referencia Este tipo de pruebas se reportan indicando el límite de detección: Tabla 47 Intervalo de referencia CEA Droga Cocaína (COC) Marihuana (THC)
Límite de detección < 300 ng/ml < 50 ng/ml < 500 ng/ml < 2.000 ng/ml < 1.000 ng/ml
3,4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) Opiáceos (OPI) Metanfetamina (MET)
5. Cálculos y/o resultados En esta práctica, no se requiere el cálculo de ninguna magnitud.
6. Guía para discusión de resultados-cuestionario Para poder completar el informe de resultados de la guía 16, se requieren las siguientes acciones: Paciente con síndrome de abstinencia en tratamiento por abuso de drogas por 2 semanas: • • • • •
Informar el valor de las 5 drogas descritas en clases. Informar el valor de Triglicéridos en la paciente al que pertenece la muestra de orina. Informar el valor de Albúmina en la paciente al que pertenece la muestra de orina. Informar el valor de Colesterol total en la paciente al que pertenece la muestra de orina. Informar el valor de VSE en la paciente al que pertenece la muestra de orina.
7. Conclusiones y recomendaciones Al final de la práctica, el alumno deberá demostrar: • • •
Aplicación de técnicas inmunocromatográficas para la detección de drogas de abuso o recreativas en muestras de orina. Describir el proceso de cadena de custodia y de consentimiento informado para la recolección de muestras de orina para screening de drogas recreativas. Establecer los criterios de inclusión y exclusión para la aceptación de matrices biológicas a ser sometidas a análisis de screening o confirmación de drogas recreativas o de abuso.
Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clinica
Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica Clínica III Plan: B011
Cód. asignatura: Q0224-05
Nivel: Q108-07-70 Versión: 2.0 Página 148 de 156
8. Anexos relacionados
Resolving_Erroneous Inserto cocaina _Reports_in_Toxicology.pdforina.pdf
9. Bibliografía Dasgupta Amitava. (2012). Resolving erroneous reports in toxicology and therapeutic drug monitoring : A comprehensive guide. John Wiley & Sons, Incorporated. Gaw, A. (2015). Bioquímica clínica : texto y atlas en color ([tr. 5a. ed. ing. ed.). Madrid: Elsevier. Lange. (2013). Diagnóstico clínico y tratamiento (52a. ed.). México: McGrawHill. Wild, D. (2013). The handbook of immunoassays (4ta ed.). USA: Elsevier Science & Technology.
Elaboró:
Máster Oscar Puente
Revisó:
Dr. Santiago Escalante
Aprobó:
Dr. Santiago Escalante
Cargo: Fecha
Docente 11/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020
Cargo: Fecha:
Coordinador Carrera 20/08/2020