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E N E R O

J U N I O

Revista científica tecnológica multidisciplinaria del Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México

EVALUACIÓN DE SUSTRATOS NATURALES PARA LA PRODUCCIÓN MASIVA DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO Metarhizium anisopliae

2 017

tesoem.edomex.gob.mx

EFECTO DE COLONIZACIÓN DE Beauveria bassiana SOBRE PLÁNTULAS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris)

BACTERIAS AISLADAS EN CULTIVOS DE Vicia faba

TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍA DE UN TACO AL PASTOR TRADICIONAL A UN PLATILLO DE VANGUARDIA UTILIZANDO LA Técnica de DECONSTRUCCIÓN PUBLICACIÓN SEMESTRAL

Año 2 / No. 3 ISSN 2448-816X

TESTLAPALLI NÂ° 3

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TESTLAPALLI N° 3

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DIRECTORIO INSTITUCIONAL

2 017

Directora General del TESOEM Lic. Carla Libertad Domínguez Del Río Revista científica tecnológica multidisciplinaria del Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México

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Director Académico EVALUACIÓN DE SUSTRATOS NATURALES PARA LA PRODUCCIÓN MASIVA DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO Metarhizium anisopliae

M. en C. E. Ambrocio Sánchez Cruz EFECTO DE COLONIZACIÓN DE Beauveria bassiana SOBRE PLÁNTULAS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris)

Área de Estudios de Posgrado e Investigacion Dr. Alfredo Trejo Martínez

BACTERIAS AISLADAS EN CULTIVOS DE Vicia faba

Editores TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍA DE UN TACO AL PASTOR TRADICIONAL A UN PLATILLO DE VANGUARDIA UTILIZANDO LA Técnica de DECONSTRUCCIÓN

M. en C. en A. Omar García Jiménez Dr. Rafael Alejandro Ángel Cuapio

PUBLICACIÓN SEMESTRAL

Año 2 / No. 3 ISSN 2448-816X

Coordinador de pagina web Dr. Rafael Alejandro Ángel Cuapio

Diseño Editorial TESTLAPALLI es una revista científica, tecnológica y multidisciplinaria del Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM), que tiene como finalidad publicar los avances y resultados de investigaciones que se realizan dentro de la Educación Superior Tecnológica (EST) y conexas. Con capacidad de difundir material de corte científico y tecnológico en las diversas ciencias: duras, exactas y aplicadas. En esta revista se colocan los principales avances en materia de investigación que se realizan en las divisiones de: Contaduría Pública, Gastronomía, Sistemas Computacionales, Ingeniería Ambiental, Ingeniería Industrial, Ingeniería en Energías Renovables, Ingeniería en Administración, Ingeniería en Tecnologías de la Información y Comunicaciones y la Maestría en Ingeniería Industrial, todas ellas adscritas al TESOEM. TECNOLÓGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DEL ORIENTE DEL ESTADO DE MÉXICO Paraje de San Isidro S/N, 56400 Los Reyes Acaquilpan, Municipio La Paz, Estado de México. (55) 5986-3497 | (55) 5986- 3503 | (55) 59-86- 35-03

http://tesoem.edomex.gob.mx/

DCG. Luis Javier Anguiano Esquivel

TESTLAPALLI, Año 2, No. 3, Enero - Junio de 2017, es una publicación semestral editada por el Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México, dirección: Paraje San Isidro s/n, Barrio Tecamachalco, Los Reyes Acaquilpan, Municipio de La Paz, Estado de México, C.P. 56400, Tel. 5986-3497 www.tesoem.edu. mx, testlapalli@yahoo.com.mx Editor responsable: Omar García Jiménez. Reserva de Derechos al uso exclusivo No. 04-2016102016405600-102, ISSN: 2448-816X, ambos otorgados por el Instituto Nacional del Derecho de Autor, Licitud de Título y Contenido No. En trámite, otorgado por la Comisión Calificadora de Publicaciones y Revistas Ilustradas de la Secretaría de Gobernación. Permiso SEPOMEX No. En trámite, Impreso por los talleres de Ediciones e Impresiones de México, S.A. de C.V., con domicilio en Manuel Gutiérrez Nájera No. 91, Col. Obrera, C.P. 06800, Delegación Cuauhtémoc, México, D.F., este número se terminó de imprimir el 15 de noviembre de 2017, con un tiraje de 100 ejemplares. Las opiniones expresadas por los autores no necesariamente reflejan la postura del editor de la publicación. Se autoriza la reproducción parcial o total del material publicado en TESTLAPALLI, siempre que se cite la fuente. E N E R O - J U N I O 2 0 1 7 | T E S T L A PA L L I

TESTLAPALLI N° 3

CONTENIDO 4 31

COMITÉ EDITORIAL

GUÍA DE AUTORES

TECHNOLOGY TRANSFERENCE OF A TRADITIONAL TACO AL PASTOR TO A VANGUARD FOOD USING DECONSTRUCTION TECHNIQUE

BACTERIAL ISOLATES EFFECT ON VICIA FABA CULTIVATION BACTERIAS AISLADAS EN CULTIVOS DE VICIA FABA

V.H. Pérez-España, J. Tapia Guerrero, M. Durán Alamilla, S. Gómez Hernández, O. San Agustín San Agustín, B. Trejo Chávez, T. Romero Cortes, S. Hernández-León, O. Arce-Cervantes

TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍA DE UN TACO AL PASTOR TRADICIONAL A UN PLATILLO DE VANGUARDIA UTILIZANDO LA TÉCNICA DE DECONSTRUCCIÓN

J. Espitia-López, M. J. Serrano-maldonado, M. A. Alonso-Lucas, T. Sánchez-Zempoaltecatl

EFFECT OF COLONIZATION OF BEAUVERIA BASSIANA ON BEAN SEEDLINGS (PHASEOLUS VULGARIS) EFECTO DE COLONIZACIÓN DE BEAUVERIA BASSIANA SOBRE PLÁNTULAS DE FRIJOL (PHASEOLUS VULGARIS)

P.M. Garza-López, O. Arce-Cervantes, J. EspitiaLópez, B. Flores-Chávez, A. Angel-Cuapio

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EVALUATION OF NATURAL SUBSTRATES FOR THE MASSIVE PRODUCTION OF ENTOMOPATHOGENIC FUNGUS METARHIZIUM ANISOPLIAE EVALUACIÓN DE SUSTRATOS NATURALES PARA LA PRODUCCIÓN MASIVA DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO METARHIZIUM ANISOPLIAE

D.V. Casales-Aguilar, J.V. Martínez-López, M.A. Ramos-Enríquez, Y. Escamilla-Lozano, A. Angel-Cuapio

TESTLAPALLI N° 3

PRESENTACIÓN La revista TEStlapalli es publicada por el Área de Estudios de Posgrado e Investigación del Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México. La publicación tiene como propósito central, divulgar contribuciones originales de investigación empírica sólidamente asentada en teoría y metodología rigurosa. En esta se alienta además la inclusión de artículos que reflejen la naturaleza inter y transdisciplinaria de la investigación científica, funcionando como un espacio de comunicación e intercambio de conocimiento especializado. Dentro del ámbito educativo cuando nos referimos a la conceptualización de la calidad educativa, es necesario referirnos a sus antecedentes y transformación a partir de los procesos de cambio en la construcción del conocimiento como parte inherente del propio desarrollo del hombre dotado de intelecto, dado que es inapelable el paradigma de reconocer que los medios se transforman y evolucionan a partir de las necesidades de las personas en cada momento socio histórico de la vida humana. Es entonces que reviste una gran importancia entender que se requieren respuestas ante los tiempos que de manera globalizada se viven hoy día, en la cual el propio ambiente demanda más y mejores sociedades del conocimiento y competentes dentro del trabajo colaborativo. Por tanto, con el afán de convertirse de una de esas importantes respuestas, TEStlapalli también pre-

tende consolidarse como un caldo de cultivo propicio para desarrollar las nuevas semillas de la creación científica; publica artículos sobre aplicaciones innovadoras, el desarrollo de nuevas tecnologías y soluciones eficientes en los campos de; la ingeniería, la informática, la gastronomía, ciencias administrativas y la investigación científica en general, que describen investigación original, con resultados significativos sobre la base de trabajo numérico, teórico y experimental. Nuestros ancestros consideraban que dos ideas que permanecían unidas podían expresar la totalidad de un concepto. Así pues las siglas de Nuestro Tecnológico de Estudios Superiores, unidas a la acepción, tlapalli entendida como; pintura de colores, podrían ser conceptualizadas de manera metafórica para hacer referencia a la sabiduría, la tradición y el conocimiento que quedan plasmados a través de la escritura, de cada uno de los artículos que en esta se presentan. Tecnología y progreso Lic. Carla Libertad Domínguez del Río M. en C. E. Ambrocio Sánchez Cruz

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Editores en Jefe Dr. Rafael Alejandro Angel Cuapio Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

M. en C. en A. Omar García Jiménez Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

Áreas de Conocimiento: I. BIOLOGÍA Y QUÍMICA II. CIENCIAS SOCIALES, HUMANIDADES Y ADMINISTRATIVAS III. BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS IV. CIENCIAS DE LOS ALIMENTOS

COMITÉ EDITORIAL

V. CIENCIAS DE LA INGENIERÍA VI. TURISMO

I. Biología y Química EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

Dr. Jesús Olayo Lortia

Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa

Dr. Benito Flores Chávez

Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo REVISORES:

Dra. María Luisa Lozano Camargo

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

M. en C. Miriam Vega Loyola

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

M en I. María del Carmen García Araiza

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

Dr. Víctor Manuel Duarte Zaragoza

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

II. Ciencias Sociales, Humanidades y Administrativas EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

M. en C. Armando Camacho Gálvez

Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa

M. en C. Ana Lieseld Guzmán Elizalde

Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo REVISORES:

Dra. María Antonieta Andrade Vallejo

Escuela Superior de Comercio y Administración Instituto Politécnico Nacional

M. en C. Omar García Jiménez

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

Mtro. Juan Carlos Navarrete Narváez

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

M. en C. Ana Beatriz Vega Cruz

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

COMITÉ EDITORIAL

III. Biotecnología y Ciencias Agropecuarias EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

Dr. Paul Misael Garza López

Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

Dra. Josefa Espitia López

Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo REVISORES:

Dra. Gloria Maribel Trejo Aguilar

Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa

Dr. Daniel Torres Martínez

Universidad Tecnológica de Tecámac

Dr. Arturo Alejandro Figueroa Montero

Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Cuajimalpa

Dr. Roberto Montesinos Matías

V. Ciencias de la Ingeniería

Servicio Nacional de Sanidad Inocuidad y Calidad Agroalimentaria (SENASICA)

EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

Dr. Armando Ordaz Hernández

Dr. Alfredo Trejo Martínez

Universidad de la Cañada

Dr. Juan Manuel Loeza Corte Universidad de la Cañada

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM) REVISORES:

M en I. María del Carmen García Araiza

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

IV. Ciencias de los Alimentos

Dr. Miguel Ángel Martínez Cruz

Escuela Superior de Ingeniería Mecánica y Eléctrica, Zacatenco. Instituto Politécnico Nacional

EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

Dra. Yolanda Escamilla Lozano

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

Dra. María José Serrano Maldonado

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM) REVISORES:

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Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

L.N.G. Roger Omar Cruz Sánchez

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

VI. Turismo EDITORES DE ÁREA DE CONOCIMIENTO:

M. en C. Francisco Joaquín Villafaña Rivera

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM) REVISORES:

M. en C. Abel Efraín Peña Hernández

Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM)

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EVALUACIÓN DE SUSTRATOS NATURALES PARA LA PRODUCCIÓN MASIVA DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO Metarhizium anisopliae

EFECTO DE COLONIZACIÓN DE Beauveria bassiana SOBRE PLÁNTULAS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris)

BACTERIAS AISLADAS EN CULTIVOS DE Vicia faba

TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍA DE UN TACO AL PASTOR TRADICIONAL A UN PLATILLO DE VANGUARDIA UTILIZANDO LA Técnica de DECONSTRUCCIÓN PUBLICACIÓN SEMESTRAL

Año 2 / No. 3 ISSN 2448-816X

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Las categorías que abarca TESTLAPALLI son avances en materia de investigación que se realizan en las divisiones de: Contaduría Pública, Gastronomía, Sistemas Computacionales, Ingeniería Ambiental, Ingeniería Industrial, Ingeniería en Energías Renovables, Ingeniería en Administración, Ingeniería en Tecnologías de la Información y Comunicaciones y la Maestría en Ingeniería Industrial, todas ellas adscritas al Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México (TESOEM). Además, se consideran aportes relacionados con Investigación y Desarrollo Tecnológico de otras instituciones académicas.

ESPITIA / SERRANO / ALONSO / SÁNCHEZ

CIENCIAS DE LOS ALIMENTOS

TECHNOLOGY TRANSFERENCE OF A TRADITIONAL TACO AL PASTOR TO A VANGUARD FOOD USING DECONSTRUCTION TECHNIQUE TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍA DE UN TACO AL PASTOR TRADICIONAL A UN PLATILLO DE VANGUARDIA UTILIZANDO LA TÉCNICA DE DECONSTRUCCIÓN

J. Espitia-López1 M. J. Serrano-Maldonado2 M. A. Alonso-Lucas2 T. Sánchez-Zempoaltecatl2 1Área Académica de Ciencias Agrícolas y Forestales (ÁACAyF), Instituto de Ciencias Agropecuarias (ICAP), Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Rancho Universitario. Av. Universidad Km 1, Ex-Hda. de Aquetzalpa, CP 43600, Tulancingo de Bravo, Hidalgo. 2Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México. Paraje de San Isidro S/N, Barrio de Tecamachalco, 56400, Los Reyes Acaquilpan, Estado de México. *Autor de correspondencia. E-mail: josefa_espitia11153@uaeh.edu.mx Fecha de envío: 19/05/2017

ABSTRACT: “Taco al pastor” is one of the most popular and more consumed snacks of Mexican street food in Mexico City and its metropolitan area. Taking into consideration the conventional recipe, it was carried out the technological transference to a vanguard taco, using several techniques for the deconstruction. It was possible to stablish a new presentation of “taco al pastor” using methods such as gelling, dehydration and pulverization. This kind of food promotes Mexican food in new branches of gastronomy, such as Gourmet, allowing to taste the traditional flavors with different textures and offering new experiences. Keywords: Taco al pastor, deconstruction, textures, technology transference

RESUMEN: El taco al pastor es uno de los principales antojitos de la comida callejera mexicana más consumidos en la Ciudad de México y área metropolitana, tomando en cuenta la receta tradicional se realizó la transferencia tecnológica a un taco de vanguardia utilizando diversas técnicas

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TECHNOLOGY TRANSFERENCE OF A TRADITIONAL TACO AL PASTOR TO A VANGUARD FOOD

para la deconstrucción. Se logró establecer una nueva presentación del taco al pastor utilizando métodos tales como: gelificación, deshidratación y pulverización. Este tipo de platillos pone a disposición a la cocina mexicana para incursionar en ramos novedosos de la gastronomía como es el Gourmet, permitiendo degustar los sabores tradicionales con diferentes texturas y ofrecer nuevas experiencias. Palabras clave: Taco de pastor, Deconstrucción, Texturas, Transferencias de tecnología

1. INTRODUCCIÓN El historiador Manuel Romero menciona que a partir del siglo XVIII empezó a llamarse taco en España al abocado o una comida ligera que suele ingerirse fuera de las horas de las que se acostumbra a comer normalmente (Iturriaga, 1998), existen tres principales tacos entre ellos se encuentran los tacos al pastor mencionados en el mapa Tacografía que tuvieron influencias orientales o griegas en donde es predominante la carne de puerco adobada (Chapa, 2008). Aunque los inicios del taco al pastor no fueron en la Ciudad de México (CDMX) es un alimento muy representativo, su origen fue en la ciudad de Puebla, se comenzó a comercializar primero con “Tacos árabes” que se servían en tortilla de maíz o en el pan árabe con una salsa de chipotle, al aumentar de popularidad del platillo llega a la CDMX la técnica del asador vertical que se usa en la cocción de los tacos árabes, los cambios que se le hicieron a este alimento fueron fundamentales para llegar a este taco los cuales consisten en que la carne de cerdo sea con adobo y posteriormente al taco se les agregó cebolla, cilantro y piña (Escalante, 2013). Existen diversos movimientos gastronómicos uno de ellos es la Nouvelle cuisine, inició en Francia después de la segunda guerra mundial, aquí se consideró la necesidad de la reforma de las técnicas culinarias con el fin de simplificarlas y adaptarlas a las nuevas necesidades, el precursor de esta corriente gastronómica es Paul Bocuse (Lozano-Leal, et al., 2007). La Nouvelle cuisine fue retomada por el cocinero catalán Ferrán Adrià quien destaca por su cocina novedosa y creativa, se le consideró como un movimiento o escuela la cual tuvo como ante-

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cesores a los cocineros Juan Mari Arzak y Pedro Subijana (Garrido, 2012). Ferrán Adrià retoma los elementos de “Deconstrucción” la cual es una técnica que utiliza novedosos métodos aplicados a la cocina convencional teniendo como resultado una transferencia de tecnología, esta nueva cocina es llamada “Cocina molecular”. El creciente mercado y la demanda por parte de los consumidores hacia la oferta de nuevas experiencias culinarias tiene como resultado el empleo de diversos métodos para la obtención de “transferencias tecnológicas”, las cuales se han decidido emplear en un platillo con mucha aceptación como él es taco al pastor para incursionar en la gastronomía mexicana de vanguardia.

2. MATERIALES Y MÉTODOS 2.1 Taco de pastor tradicional Para la elaboración de la tortilla primeramente se nixtamalizó el maíz, después se trituro mediante el uso de un “metate” hasta obtener una pasta húmeda y homogénea, posteriormente se emplearon 15 g de masa para cada tortilla las cuales tuvieron 7 cm de diámetro (De’Angeli A. G. y De’Angeli J., 1993). La preparación de la carne requiere un proceso de “marinado” con un adobo, el cual se realizó con los siguientes ingredientes: 1 chile guajillo, 1 cucharadita de azúcar, 1 grano de pimienta gorda, ½ cebolla picada, ½ cucharada de canela molida, 2 dientes de ajo, pelados, vinagre blanco, 1 cucharadas de achiote, 1 cucharadita de orégano, 3 granos de pimienta negra, 2 clavos de olor, ½ cucharadita de comino, 1 taza de jugo de naranja agria y1 pizca de anís en polvo. Para la elaboración del adobo se limpió el chile quitando rabos y semillas, después el chile se hidrató cociéndose en agua caliente, una vez terminado este proceso del chile se licuo con los demás ingredientes (Escalante, 2012). La carne se marinó por 24 horas, sumergiendo la carne de cerdo para lograr que se impregnaran todos los sabores del adobo, para la cocción se colocó en un comal caliente para vigilar que se cocinará evitando que se quemara, una vez cocida la carne se puso en porciones sobre las tortillas para su presentación.

ESPITIA / SERRANO / ALONSO / SÁNCHEZ

1.a. Taco tradicional

1.b. Taco deconstruido

Figura 1. Presentación final del taco de pastor tradicional (1.a) y el taco de pastor deconstruido (1.b).

La elaboración de la salsa se realizó utilizando los siguientes ingredientes: 2 jitomates, 3 chiles chipotles, ¼ de taza de agua tibia, ¼ de cebolla, 2 dientes de ajo, 1 cucharadita de aceite y sal. Se asaron los jitomates en el comal con los chiles hasta lograr el tatemado de estos, posteriormente se remojaron los chiles mientras tanto los jitomates se pelaron hasta no tener ningún residuo de cascara. Después todos los ingredientes se licuaron hasta tener una salsa homogénea, se vertió la salsa en un sartén a fuego medio, se sazono y después se retiró para dejarla enfriar (Anon, 1986). También se cortaron trozos delgados piña, con un tamaño aproximado de 4 cm. la cual se colocó en el comal para quedar azada ligeramente, así mismo se picó cilantro y cebolla finamente, los cuales se colocan crudos en el taco. Además se lavaron y colocaron limones partidos en cuartos ya que es común el uso del jugo de éstos como condimento.

2.2 Taco de pastor deconstruido La desconstrucción del taco se realizó partiendo de las técnicas tradicionales de elaboración de taco de pastor, la tortilla se preparó según la metodología de Escalante (2012), para proporcionar un color diferente al característico de las tortillas amarillas se empleó además el uso de tortillas azules. Las torti-

llas se deshidrataron a una temperatura de 180ºC en un horno convencional durante 8 min y después se pulverizaron con una licuadora, de esta manera se creó una “arena de tortilla”. El procedimiento que se le dio a la carne de cerdo consistió en cortarla lo más delgada posible y posteriormente se dejó marinar por 24 horas con el adobo preparado de forma habitual para lograr que la carne fuera más jugosa (Ríos, 2002), la cocción se llevó a cabo en un comal evitando que se quemara. Para la deconstrucción de la salsa se partió de la receta original, una vez terminada la salsa se colocó en charolas de acero inoxidable una base de silicona, se hicieron gotas de salsa con ayuda de una cuchara y se deshidrataron a 100ºC durante 10 minutos en un horno convencional. Se elaboraron dos gelificaciones una de jugo de piña y la otra de jugo de limón, los ingredientes que se emplearon para su preparación fueron: 100 mL de jugo, 2 hojas de grenetina (Gelita®, México) y 20 ml de agua. Se tomaron 100 mL de jugo y se calentaron hasta llegar a 70ºC y se agregó la grenetina hidratada y se disolvió, para finalizar se refrigeró hasta tener la gelificación. El cilantro y la cebolla se sustituyeron por brotes los cuales conservan el sabor y proporcionan un aspecto visual fresco (Ponce de León y col., 2012).

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TECHNOLOGY TRANSFERENCE OF A TRADITIONAL TACO AL PASTOR TO A VANGUARD FOOD

ATRIBUTO

DEFINICIÓN

PICOR

Probar el taco y percibir el grado de ardor, irritación o dolor en la boca.

DULZOR

Degustar el taco y percibir la intensidad de sabor dulce.

ACIDEZ

Percepción del ácido del limón y de la piña.

SALADO

La proporción de sal en el taco es equilibrada.

TEXTURA

Evalúa la textura en el taco.

TEMPERATURA

Aprecia la temperatura del taco.

ARMONÍA

Equilibrio, proporción y correspondencia adecuada entre los diferentes ingredientes del taco.

Tabla 1. Atributos de la evaluación del taco de pastor.

2.3 Análisis sensorial Para el análisis sensorial se empleó una prueba afectiva donde el juez señaló el nivel de agrado/ aceptación, se utilizó una escala de evaluación de las muestras mediante un sistema binario, el numero 1 fue empleado cuando la muestra cumplía con la característica ideal del platillo y el numero 0 cuando no cumplía (Pedrero, 1989).

Picor 5 4 Armonia

Dulzor

3 2 1 0

Temperatura

Acidez

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN El taco de pastor tradicional y el taco de pastor deconstruido (Figura 1) fueron evaluados por 20 jueces los cuales valoraron 7 principales características en el platillo (Tabla 1), los jueces colocaron el número 1 cuando la muestra presentaba la característica ideal del platillo y 0 cuando no la presentaba (Pedrero, 1989). Se realizó una sumatoria de las frecuencias de los atributos que se calificaron como ideales y se esquematizaron en una gráfica radial como se muestra en la Figura 2.

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Textura Taco de pastor tradicional

Salado Taco de pastor deconstruido

Figura 2. Gráfica radial de las frecuencias de los descriptores del taco de pastor tradicional y del taco de pastor deconstruido.

ESPITIA / SERRANO / ALONSO / SÁNCHEZ

En cuatro de las características evaluadas el taco de pastor y tradicional presentaron el mismo grado de gusto ideal esperado de la muestra, estas características fueron: picor, armonía, salado y acidez. Esto quiere decir que la deconstrucción del taco se realizó de forma exitosa con las técnicas de gelificación, deshidratación y pulverización. Los jueces evaluaron a las características de textura, temperatura y dulzor como menos ideales, esto es esperado tomando en cuenta que la técnica de deconstrucción

está basada en modificar la textura tradicional de los alimentos (Garrido-Moreno, 2012).

5. REFERENCIAS

Iturriaga, J., N. 1998. Las cocinas de México I. Fondo 2000. México.

Anon. 1986. La Cocina Mexicana En La Variedad Está El Gusto, México: Reader´S Digest México. Pp 35.

Lozano-Leal, R., Martin-Artacho, A., Martin-Artacho, J., A. 2007. Procesos De La Cocina (Aspectos Trasversales). Visión Libros. Madrid, España.

Chapa, M. 2008. Los tacos de México. Pp 32. Aguilar. México. De’Angeli, A., G., De’Angeli, J. 1993. Gran Larousse De La Cocina Mexicana. Larousse, México. Escalante, A. 2012. La Tacopedia. Enciclopedia del Taco. México: Trilce. Garrido-Moreno, B. 2012. “La cocina y la experiencia culinaria como procesos artístico y creativo “, Creatividad y sociedad, 8: 11-18.

4. CONCLUSIÓN Se realizó una deconstrucción del taco de pastor tradicional utilizando una transferencia de tecnología utilizando métodos de cocina de vanguardia, de esta manera se puede ofrecer sabores tradicionales con nuevas texturas de para incursionar en el mercado Gourmet.

Pedrero D., Pangborn R. M. 1989. Evaluación sensorial de los alimentos. Métodos analíticos. Alhabra Mexicana, México. Ponce De León, C., Torija, E. 2012. Utilidad en la alimentación de algunas semillas germinadas: brotes de soja y trigo. Madrid. Ríos Fuenmayor, G. 2002. Tecnología e industria: Universidad de Zulia.

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EFFECT OF COLONIZATION OF Beauveria bassiana ON BEAN SEEDLINGS

BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS

EFFECT OF COLONIZATION OF BEAUVERIA BASSIANA ON BEAN SEEDLINGS (PHASEOLUS VULGARIS) EFECTO DE COLONIZACIÓN DE BEAUVERIA BASSIANA SOBRE PLÁNTULAS DE FRIJOL (PHASEOLUS VULGARIS)

P.M. Garza-López1* O. Arce-Cervantes1 J. Espitia-López1 B. Flores-Chávez1 A. Angel-Cuapio2 Instituto de Ciencias Agropecuarias, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Av. Universidad Km 1, Ex-Hda. de Aquetzalpa, C.P. 43600, Tulancingo, Hidalgo, México.

Ingeniería Ambiental, Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México, Paraje San Isidro S/N, Barrio de Tecamachalco, C.P. 56400, Los Reyes, La Paz, Estado de México, México.

*Autor de correspondencia. E-mail: paul_garza@uaeh.edu.mx Fecha de envío: 19 de mayo de 2017

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ABSTRACT: The endophytic organisms are capable to grow and develop inside vegetable tissues and structures, being fungi the most studied. On the other hand, it was observed that some entomopathogenic fungi (EF), such as Beauveria bassiana, have endophytic activity, conferring capacity to colonize plants, among which are some of economic interest, such as bean (Phaseolus vulgaris), which is an important product in the diet of Mexican population. The aim of this study was to evaluate the response of two varieties of beans (Cacahuate and Queretaro) on growth variables, due to inoculation with the EF B. bassiana, by determining the colonization of the EF and the modification in growth of the bean plants. The results shown that B. bassiana induced significant increase (P < 0.05) in length and number of leaves of the seedlings in both varieties of beans. Otherwise, the amount of chlorophyll was not increased significantly (P > 0.05). Likewise, it was observed that colonization percentage of the fungus was close to 100% in both bean varieties. Keywords: Beauveria bassiana, bean, endophytic activity, growth variables, colonization percentage.

GARZA / ARCE / ESPITIA / FLORES / ÁNGEL

RESUMEN: Los organismos endófitos son aquellos capaces de crecer y proliferar dentro de los tejidos y estructuras vegetales, siendo los hongos los más caracterizados. Por otra parte, se ha observado que algunos hongos entomopatógenos (HE), como Beauveria bassiana, poseen actividad endófita, confiriéndole capacidad para colonizar plantas, dentro de las que se encuentran algunas de interés económico como el frijol (Phaseolus vulgaris), el cual forma parte importante de la dieta de la población en México. El objetivo de este estudio fue evaluar el impacto del HE B. bassiana sobre variables de crecimiento en dos variedades de frijol (Cacahuate y Querétaro), mediante la determinación de la colonización del HE y la respuesta en el crecimiento de las plantas de frijol. Los resultados mostraron que, en ambas variedades de frijol, la inoculación con B. bassiana provocó incremento significativo (P < 0.05) en la longitud y número de hojas de las plántulas. Por otra parte, la cantidad de clorofila presente no se incrementó significativamente (P > 0.05). Asimismo, se observó que el porcentaje de colonización del hongo fue cercano al 100% en ambas variedades de frijol. Palabras clave: Beauveria bassiana, frijol, actividad endófita, variables de crecimiento, porcentaje de colonización.

1. INTRODUCCIÓN Los hongos entomopatógenos (HE) son microorganismos ampliamente utilizados para controlar poblaciones de insectos nocivos. Algunas especies de HE pueden ser específicas, sin embargo existen especies de amplio espectro (Zimmermann, 2007), dentro de las cuales se encuentra Beauveria bassiana, (siendo una de las especies más utilizadas y comercializadas en México (Tamez-Guerra y col., 2001). Sin embargo, dada la diversidad de hábitats de este grupo de microorganismos, es posible que presenten actividad endófita, es decir que sean capaces de colonizar algunas especies de plantas, ya sea de manera natural o artificial (Ownley y col., 2008; Vega, 2008). Los hongos endófitos han sido caracterizados y detectados en una variedad muy extensa de plantas,

incluyendo algunas de importancia agrícola y económica, (Vega y col., 2008), en donde se ha observado que ayudan a inducir resistencia sistémica de los hospederos y algunos mecanismos de supresión de enfermedades. Asimismo, se ha evidenciado que estos organismos endófitos son capaces de controlar y eliminar poblaciones de organismos patógenos mediante antibiosis, competencia por sustrato o micoparasitismo (Ownley y col., 2010). Recientemente, se ha estudiado la capacidad endófita del HE B. bassiana y se ha demostrado que es capaz de colonizar diversas especies de plantas, tales como arroz, jitomate, papa, haba, algodón, trigo, cebolla, pino blanco y palmera (Akutse y col., 2014; Ownley y col., 2008; Ownley y col., 2010; Parsa y col., 2013; Powell y col., 2009; Vega, 2008). Por otra parte, el frijol (Phaseoulus vulgaris) es un producto agrícola de gran importancia en México, debido a que forma parte importante en la dieta de la población. Además, se han catalogado cerca de 600 plagas y enfermedades que afectan a dicho cultivo (Parsa y col., 2013). Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad endófita de B. bassiana sobre plántulas de P. vulgaris determinando variables de crecimiento y colonización.

2. MATERIALES Y MÉTODOS 2.1. Microorganismo Se utilizó la cepa del hongo Beauveria bassiana Bb 882.5, propagado en matraces Erlenmeyer de 250 mL que contenían 50 mL de agar dextrosa Sabouraud (ADS) estéril (120°C, 15 min). Todos los matraces se incubaron por 15 d a 28 °C con fotoperiodo 12-12 h (luz-oscuridad).

2.2. Frijol Se utilizaron dos variedades de frijol (Phaseolus vulgaris), “Cacahuate” y “Querétaro”, las semillas se sembraron en un sustrato compuesto de tierra de monte y hojarasca en una proporción 1:1. El sustrato se esterilizó en la autoclave a 120°C durante 30 min. Al enfriarse el sustrato, se llenaron 4, macetas de 6” de diámetro con semillas de cada variedad de frijol, de las cuales una se utilizó como control (Veloz-Badillo, 2017).

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EFFECT OF COLONIZATION OF Beauveria bassiana ON BEAN SEEDLINGS

45 40

Clorofila (SPAD)

30 25 20 15 10 5 0

Cacahuate

Querétaro Variedad

Figura 1. Clorofila presente en dos variedades de frijol (Cacahuate y Querétaro). Plántulas inoculadas con B. bassiana, Control. (*) indica diferencia significativa entre variedades.

2.3. Inoculación de las plántulas de frijol Transcurridas 4 semanas después de la siembra, se preparó una suspensión de conidios de B. bassiana adicionando 20 mL de Tween 20 (0.05%) a los matraces destinados a su propagación y se agitó durante 10 min. Posteriormente, se realizó el conteo de conidios en una cámara de Neubauer y las diluciones necesarias para obtener una concentración de 1x108 conidios/mL. Una vez obtenida la suspensión de conidios, la inoculación se realizó en la campana de flujo laminar, para lo cual se desinfectó la superficie con etanol al 70%. Posteriormente, las hojas de las plántulas se sumergieron directamente en la suspensión durante 15 seg. Las plántulas de las macetas destina-

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das para control fueron sumergidas en solución de Tween 20 (0.05%).

2.4. Colonización foliar de B. bassiana Para corroborar que el hongo penetró a las plántulas de frijol, transcurridas tres semanas de la inoculación, se cortaron y lavaron pequeños trozos de hojas (1 cm aproximadamente) en una solución de hipoclorito de sodio (0.5%) con agitación constante durante 2 min, seguido de un lavado con etanol al 70% por 2 min y otro adicional con agua destilada estéril. Posteriormente los trozos se colocaron en cajas Petri con 25 mL de ADS estéril. Las cajas se incubaron durante 7 d a 28 °C con fotoperiodo 12:12 (Tefera y Vidal, 2009; Vega, 2008). Los datos se reportaron como porcentaje (%).

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2.5. Determinación de Parámetros de Crecimiento

las plántulas inoculadas y su respectivo control en ambas variedades.

Se determinó el contenido de clorofila (Minolta Spad 502) de 15 plantas por maceta, la medición se obtuvo de la parte media de las hojas; los datos obtenidos se reportaron en unidades SPAD. Adicionalmente, se midió la longitud de las plantas y número de hojas. Las determinaciones se realizaron a los 49 días trascurridos desde la siembra (7 semanas).

2.6. Análisis Estadístico Con los datos obtenidos se realizó la prueba de t student (α = 0.05) para cada variable de respuesta en el programa estadístico SPSS 20 para Windows.

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Una vez transcurridos los 49 d desde la siembra de P. vulgaris, se pudo observar que la cantidad de clorofila en las plántulas inoculadas con B. bassiana de la variedad Querétaro fue significativamente mayor (P < 0.05) comparado con aquellas inoculadas de la variedad Cacahuate (40.3 y 32.9 SPAD, respectivamente) (Fig. 1 de la página anterior). Adicionalmente, no hubo diferencia significativa (P > 0.05) entre

Parámetro

Respecto a la longitud de las plántulas, fue evidente el efecto de la inoculación con B.bassiana ya que se registró un incremento significativo (P < 0.05) con respecto a las plántulas que no fueron inoculadas en ambas variedades de frijol (25% y 36% para Cacahuate y Querétaro, respectivamente) (Tabla 1). Asimismo, al comparar entre variedades de frijol, se observó diferencia significativa entre ellas (P < 0.05) siendo la variedad Querétaro la que presentó mayor longitud. De la misma forma, la inoculación de las plántulas con B. bassiana provocó el incremento en el número de hojas con respecto al control, en las 2 variedades de frijol. Para la variedad Cacahuate, dicho incremento fue de 31%, mientras que para Querétaro fue tan sólo del 15%, siendo significativamente mayor (P < 0.05) que sus respectivos controles. Sin embargo, al comparar entre variedades, la que mayor número de hojas desarrolló fue Querétaro (Tabla 1). Por otra parte, el porcentaje de colonización observado en ambas variedades fue cercano al 100% en las muestras foliares a los 4 d de haberlas colocado en las cajas Petri, las cuales no mostraron diferencia significativa (P > 0.05) (Tabla 2).

Variedad

Cacahuate Longitud (cm) Querétaro

Cacahuate Número de hojas Querétaro

Tiempo (d) 49

Inoculadas

74.5 ± 1.2*

Control

59.5 ± 3.4^

Inoculadas

80.1 ± 2.4

Control

58.8 ± 1.9^

Inoculadas

19.8 ± 0.6

Control

15.1 ± 1.3*^

Inoculadas

22.5 ± 0.9*

Control

19.6 ± 0.7^

(*) indica diferencia significativa entre variedades, (^) indica diferencia significativa entre tratamientos. Tabla 1. Parámetros de crecimiento de dos variedades de frijol (Cacahuate y Querétaro).

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EFFECT OF COLONIZATION OF Beauveria bassiana ON BEAN SEEDLINGS

Variedad

Colonización (%)

Cacahuate

99.1 ± 0.1

Querétaro

100 ± 0.0

Tabla 2. Porcentaje de colonización de B. bassiana en dos variedades de frijol (Cacahuate y Querétaro).

Los resultados obtenidos mostraron que la variedad Querétaro fue más resistente a la inoculación con B. bassiana, esto debido las diferencias inherentes de calidad, características físicas entre variedades (Guzmán-Tovar y col., 2009). Asimismo, se ha reportado que la inoculación de sorgo con B. bassiana no afectó la longitud de las plántulas (Tefera y Vidal, 2009). En contraste, se han realizado estudios en donde se inocularon diferentes plantas, obteniendo respuestas diferenciales en el porcentaje de colonización, dependiendo del método de inoculación (Akutse y col., 2014; Ownley y col., 2008; Ownley y col., 2010; Parsa y col., 2013; Powell y col., 2009; Vega, 2008). Por otra parte, Veloz-Badillo (2017) reportó que al inocular 2 variedades de cebada con B. bassiana, la longitud de las plántulas no fue afectada, mientras que para la variedad Esmeralda, la cantidad de clorofila y porcentaje de colonización disminuyeron.

7. REFERENCIAS

4. CONCLUSIONES Con los resultados obtenidos se puede establecer que la cepa Bb 882.5 posee actividad endófita sobre 2 variedades mexicanas de frijol. Además, la inoculación con B. bassiana mejoró el crecimiento de las plántulas. En este sentido, se observó que la variedad Querétaro fue más resistente a la inoculación.

5. AGRADECIMIENTOS Los autores agradecen a la red SEP-PRODEP proyecto UAEH-PTC-687 y la Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo por el financiamiento otorgado.

6. NOMENCLATURA

hongos entomopatógenos

ADS

agar dextrosa Sabouraud

(2009). Estudio comparativo de características de calidad entre genotipos de frijol grano negro. Agricultura Técnica en México. 35, 446-454.

Akutse, K. S., Fiaboe, K. K. M., Van den Berg, J., Ekesi, S. y Maniania, N. K. (2014). Effects of endophyte colonization of Vicia faba (Fabaceae) plants on the life–history of leafminer parasitoids Phaedrotoma scabriventris (Hymenoptera: Braconidae) and Diglyphus isaea (Hymenoptera: Eulophidae). PLOS One. 9, 1-11.

Ownley, B. H., Griffin, M. R., Klingeman, W. E., Gwinn, K. D., Moulton, J. K. y Pereira, R. M. (2008). Beauveria bassiana: Endophytic colonization and plant disease control. Journal of Invertebrate Pathology. 98, 267-270.

Guzmán-Tovar, I., Almanza-Aguilera, E., Acosta-Gallegos, J. A. y Guzmán-Maldonado, S. H.

Ownley, B. H., Gwinn, K. D. y Vega, F. E. (2010). Endophytic fungal entomopathogens with ac-

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GARZA / ARCE / ESPITIA / FLORES / ÁNGEL

tivity against plant pathogens: ecology and evolution. BioControl. 55, 113-128.

pathogenic fungus Beauveria bassiana. BioControl. 54, 663-669.

Parsa, S., Ortiz, V. y Vega, F. E. (2013). Establishing fungal entomopathogens as endophytes: towards endophytic biological control. Journal of Visualized Experiments. 74, 1-5.

Vega, F. E. (2008). Insect pathology and fungal endophytes. Journal of Invertebrate Pathology. 98, 277-279.

Powel, W. A., Klingeman, W. E., Ownley, B. H. y Gwinn, K. D. (2009). Evidence of endophytic Beauveria bassiana in seed-treated tomato plants acting as a systemic entomopathogen to larval Helicoverpa zea (Lepidoptera: Noctuidae). Journal of Entomological Science. 44, 391-396. Tamez-Guerra, P., Galán-Wong, M. J., Medrano-Roldán, H., García-Gutiérrez, C., Rodríguez-Padilla, C., Gómez-Flores, R. A. y Tamez-Guerra, R. S. (2001). Bioinsecticidas: su empleo, comercialización y uso en México. Ciencia UANL. 4, 143-152. Tefera, T. y Vidal, S. (2009). Effect of inoculation method and plant growth medium on endophytic colonization of sorghum by the entomo-

Vega, F. E., Posada, F., Aime, M.C., Pava-Ripoll, M., Infante, F. y Rehner, S. A. (2008). Entomopathogenic fungal endophytes. Biological Control. 46, 72-82. Veloz-Badillo, G. M. (2017). Efecto de la Actividad Endófita del Hongo Entomopatógeno Beauveria bassiana en dos Variedades de Cebada (Hordeum vulgare). Reporte de Investigación de Ingeniería en Agronomía para la Producción Sustentable. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. México, Zimmermann, G. (2007). Review on safety of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Beuaveria brongniartii. Biocontrol Science and Technology. 17, 553-596.

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BACTERIAL ISOLATES EFFECT ON VICIA FABA CULTIVATION

BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS

BACTERIAL ISOLATES EFFECT ON Vicia faba CULTIVATION BACTERIAS AISLADAS EN CULTIVOS DE Vicia faba V.H. Pérez-España1 J. Tapia Guerrero2 M. Durán Alamilla2 S. Gómez Hernández2 O. San Agustín San Agustín B. Trejo Chávez2 T. Romero Cortes1 S. Hernández-León2 O. Arce-Cervantes2* 1

Escuela Superior de Apan, Carretera Apan-Calpulalpan km 8, Chimalpa, Apan, Hidalgo, México.

Instituto de Ciencias Agropecuarias, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Av. Universidad Km 1, Ex-Hda. de Aquetzalpa, C.P. 43600, Tulancingo, Hidalgo, México.

ABSTRACT: In this study, we evaluate the effect of bacterial isolates from the Agave salmiana rhizosphere on Vicia faba cultivation. A trial was conducted in the greenhouse at the Agricultural Sciences Institute of the Autonomous University of Hidalgo State. A completely randomized design with four treatments and one control was performed. Each treatment consisted in a five isolated bacterial strains mixture from the Agave root-zone. Seed germination percentage, plant height, stem diameter, number of leaves and SPAD units were measured. Our results indicate that bacterial isolates had an effect on evaluated parameters, the highest stem diameter (4.66 mm) and mean chlorophyll content (42.9 SPAD) was observed in treatment number one, SPAD values range from 39.9 to 43.3 units. The highest seed germination percentage (100%) and plant height (35.6 cm) was observed in treatment number three. Mean leaf number (16) was higher in all treatments compared to the control, for which mean leaf number was 13. Keywords: Bacterial isolate, Agave, Vicia faba

*Autor de correspondencia. E-mail: oarce@uaeh.edu.mx

RESUMEN:

Fecha de envío: 31-05-2017

El presente trabajo se realizó para evaluar los efectos de aislados bacterianos extraídos de la rizósfera del Agave salmianaen el cultivo de Vi-

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cia faba. Se realizó un ensayo en el invernadero del Instituto de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo.Se estableció un diseño completamente al azar con cuatro tratamientos y un testigo. Cada tratamiento consistió en un cocktel con cinco cepas de aislados bacterianos de la rizósfera de Agave. Se evaluó el porcentaje de germinación, la altura de la planta, diámetro del tallo, número de hojas y unidades SPAD. Los resultados obtenidos indican que los aislados bacterianos mostraron efecto en las variables evaluadas: el tratamiento 3 mostró el mayor porcentaje de germinación (100%) y altura promedio (35.6 cm), en todos los tratamientos el número promedio de hojas (16) fue superior al control, que sólo contabilizó 13. En lo referente a las unidades SPAD los niveles se presentaron en intervalos de 39.9 hasta 43.3. Palabras clave:Aislados bacterianos, Agave, Vicia faba

1. INTRODUCCIÓN El maguey Agave es una planta de la cual se pueden aprovechar todas sus partes, de estas se puede obtener aguamiel, pulque, gusano rojo, blanco y pencas para la elaboración de barbacoa, incluso se pueden aprovechar las raíces extrayendo rizobacterias (Narvaez y col., 2011). Esta tecnología ofrece un enfoque sustentable al contribuir a la nutrición de la planta, disminuir el uso de fertilizantes inorgánicos, fungicidas y plaguicidas químicos y así prevenir el desgaste y contaminación del suelo. El Agave es originario de México, crece desde el nivel del mar hasta 3400 msnm. Esta planta ofrece servicios agroecológicos como retención y formación de suelo con su sistema radicular, aun en condiciones de terrenos pedregosos o tepetate (Narváez y col, 2011). Recientemente, se ha dado un nuevo uso al agave, mediante la extracción de bacterias benéficas, las cuales colonizan las raíces y entorno rizosférico de la planta. Para que una bacteria pueda considerarse como bacteria rizosférica promotora de crecimiento vegetal (PGPR, por sus siglas en inglés) se determina con base al tiempo en que esta permanece en la rizósfera después de llevarse a cabo el proceso de inoculación, otra característica es la facilidad de poder colonizar la superficie de las raíces, provocando efectos fisiológicos que promuevan el

crecimiento de las plantas (Domínguez y Gómez, 2016). El haba Vicia faba es una planta anual, forma parte importante en la dieta alimenticia de la población mexicana por ser una leguminosa con una importante fuente proteínica; su cultivo se ha extendido a 17 entidades de nuestro país. Vicia faba requiere temperaturas templadas que fluctúen entre 8° y 14°C y una precipitación de 700 a 1000 mm a través de su ciclo vegetativo. El presente trabajo evalúa los efectos de aislados bacterianos en el cultivo de Vicia faba, se pretende contribuya a futuras investigaciones acerca de dicho cultivo en relación con el uso de rizobacterias.

2. MATERIALES Y MÉTODOS 2.1. Microorganismo Las cepas bacterianas fueron extraídas de la rizósfera de Agave salmiana de la región de Apan, Hidalgo (Osorio-Suárez, 2016). Se realizaron siembra de distintas diluciones en medio selectivo NFb (ácido málico (Figura 1): 3g/l; glucosa: 2g/l; K2HPO4: 5ml (sol.10%); MgSO4 .7 H2O: 2ml (sol.10%); NaCl: 1ml (sol.10%); CaCl2 .2 H2O: 2ml (sol.1%); azul de bromotimol: 2ml (0.5% en KOH 0.2N); solución de micronutrientes: 2ml (Na2Mo4 .2 H2O: 0.2g/l; MnSO4: 0.235g/l; H3BO3: 0.28g/l; CuSO4 .5 H2O: 0.008 g/l; ZnSO4 .7 H2O: 0.024 g/l); EDTA-Fe: 4 ml (sol 1.64%); solución de vitaminas: 1ml (biotina: 0.1g/l; agar: 2g/l.), se seleccionaron veinte colonias y se sembraron en medio de cultivo YMA líquido (Extracto de levadura (1g/l); manitol (10g/l); K2HPO4 (0.5g/l); MgSO4 (0.2g/l); NaCl (0.1g/l); CaCO3 (1g/l). Después de 24 horas se realizaron cuatro tratamientos con cinco aislados bacterianos cada cocktel (C1-C5; C6-C10; C11-15 y C16-C20).

2.2. Inoculación de Vicia faba Para el establecimiento del cultivo se estableció un diseño completamente al azar. La semilla de haba se inóculo con cuatro tratamientos y un control (agua destilada) con 10 repeticiones por tratamiento. Los tratamientoes fueron los diferentes cockteles bacterianos (C1-C5, C6-C10, C11-15 y C16-C20).

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BACTERIAL ISOLATES EFFECT ON VICIA FABA CULTIVATION

Figura 1. Preparación de inóculos bacterianos

Se obtuvó semilla de haba (V. Faba) var. equino del municipio de Singuilúcan que se encuentra ubicado a una altura de 2640 msnm. Posteriormente, este lote de semillas se lavó con agua abundante y se sumergieron en una solución de hipoclorito de sodio al 10%, durante 1 minuto. Hecho lo anterior, se enguajaron con agua destilada (3 ocaciones), se secaron en la campana de flujo laminar. Finalmente, la semilla de haba fue sumergida durante dos minutos en la suspension del cocktel bacteriano. Posteriormente se colocaron en la charola para su germinación.

2.3. Siembra Se realizó la siembra de V. faba en charola de germinación (60 cavidades), colocando una semilla por cavidad. En esta etapa se utilizó como sustrato peat moss (100%). Para su manejo agrícola las charolas

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se mantuvieron en el invernadero del Instituto de Ciencias Agropecuarias (figura 2a y 2b). Simultaneamente, se tamizó tezontle a tamaño de partícula de 10 mm. Con este material se llenaron bolsas negras (25x25 cm) y después de 21 días se transplantaron las plántulas (figuras 3a y 3b). El manejo agrícola se realizó de acuerdo a la etapa fenológica del cultivo.

2.4. Parámetros de Crecimiento Se elaboró una solución nutritiva Steiner (Favela y col., 2006) se aplicó al cultivo en una solución al 50% a los 15 días después del trasplante. Se evaluó el diámetro del tallo con un Vernier, número de hojas, altura de la planta y unidades SPAD (Minolta Spad 502). Las determinaciones se realizaron a los 49 d trascurridos desde la siembra (7 semanas). (Figuras 4a y 4b).

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Figura 2a y 2b. Siembra y plantula de Vicia faba previamente fue inoculada con PGPR

Figura 3a y 3b. Transplante de haba en sustrato de tezontle

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Se obtuvieron 66 colonias en medio NFb, el cual es un medio que permite el crecimiento de microorganismos que pueden fijar N2. Las colonias aparecieron después de una semana a 18ºC. Se eligieron 20 cepas para cultivarse en medio YMA, donde crecieron más rápido, en 24 horas (Figura5).

Se obtuvo 100% de germinación a los 15 dds, como se muestra en la Tabla 1, el tratamiento con mayor porcentaje de germinación fue el cocktel bacteriano tres; en cuanto al número de hojas los tratamientos con bacterias promotoras del crecimiento vegetal mostraron un mayor número de hojas con 16 hojas, frente al testigo que mostró menor cantidad de hojas (13); el tratamiento con mayor diámero de tallo en promedio fue el 1 con 4.8 mm; el tratamiento

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BACTERIAL ISOLATES EFFECT ON VICIA FABA CULTIVATION

Figura 4a y 4b. Evaluación del crecimiento de Vicia faba

con mayor altura promedio fue el tratamiento 3 con 35.6 cm; en tanto que el tratamiento 1 mostró el mayor promedio de unidades SPAD (43.8). Basandonos en estos resultados, el tratamiento 3 mostró una tendencia mejor en el porcentaje de germinación, número de hojas y altura promedio, el tratamiento 1 manifestó mayor diámetro de tallo y niveles más altos de clorofila. A pesar de lo anterior no hubo un tratamiento que mostrara todos o la mayoría de los mayores o me-

nores porcentajes y promedios de las variables evaluadas; esto puede deberse a la variedad de aislados bacterianos que se inocularon en cada tratamiento ya que se desconoce si pueden generar antagonismo o sinergismo entre sí, por lo que es necesario establecer diseños que permitan validar estos cockteles bacterianos. Los resultados obtenidos nos dejan un referente respecto a los aislados endémicos del municipio de Apan y sus efectos en el cultivo de Vicia faba.

Figura 5. Crecimiento de bacterias en medio NFb y YMA. a) Las bacterias fueron seleccionadas en medio NFb sin fuente de N2; posteriormente fueron tranferidas en medio YMA.

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Variable Germinación (%) Altura (cm) CV Diámetro (mm) CV Número de hojas CV Unidades SPAD CV

Aislados bacterianos C1-C5

C6-C10

C11-C15

C16-C20

Control

100

30.7 ± 5.7

35.1 ± 6.8

35.6 ± 6.7

29.0 ± 5.6

31.5 ± 4.7

18.5

19.5

19.0

19.3

15.0

4.5 ± 0.5

4.7 ± 0.7

4.8 ± 0.5

4.3 ± 0.5

4.2 ± 0.6

11.4

16.3

10.8

11.6

14.7

16 ± 2

15 ± 2

16 ± 3

16 ± 2

13 ± 3

15.1

13.3

19.7

10.2

22.1

43.8 ± 3.6

41.8 ± 3.6

39.9 ± 3.8

41.3 ± 2.6

40.1 ± 6.0

8.2

8.7

9.5

6.2

CV: Coeficiente de variación Tabla 1. Parámetros de crecimiento de Vicia faba con diferentes cocteles baterianos

4. CONCLUSIONES

5. AGRADECIMIENTOS

Los aislados bacterianos de la rizósfera de Agave salmiana inoculados en Vicia faba mostraron efecto en las variables evaluadas, sin embargo es necesario continuar investigando para determinar si algún aislado bacteriano en específico tendrá mejores resultados sobre algún cultivo agronómico o si requieren menores o mayores dosis de inoculación.

Los autores agradecen a la red SEP-PRODEP por el financiamiento otorgado. Así como a los productores de agave de Apan y a la Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo por las facilidades otorgadas para realizar este proyecto.

6. NOMENCLATURA

Favela Chávez Esteban, Preciado Rangel Pablo y Benavides Mendoza Adalberto. 2006. Manual para la preparación de soluciones nutritivas. Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro. ISBN 968844-051-5. Pp. 148.

YMA:

agar extracto de levadura

PGRP:

Bacterias promotoras de crecimiento vegetal

7. REFERENCIAS Domínguez Pérez Valeria M., Gómez Luna Blanca E. 2016. Aislamiento y caracterización de bacterias promotoras de crecimiento en áreas naturales protegidas del estado de Guanajuato, primer acercamiento. Jóvenes en la ciencia. Vol. 2, (1), 556560.

Narváez Suárez Alfonso U., Martínez Saldaña Tomás, Jiménez Velázquez Mercedes A. 2011. El cultivo de maguey pulquero: opción para el desarrollo de comunidades rurales del altiplano mexicano. Revista de Geografía Agrícola. 56: 33- 44. Osorno-Suárez M.P., Romero Cortes T., Peralta Gil M., Noguez Moreno R., Hernández Guzmán G., Vega Arreguín J., Duran Figueroa N., Bravo Rámirez J y Pérez España V.H. 2016 Isolation and characterization of microorganism with agronomic importance from the rhizosphere of “maguey pulquero” (Agave salmiana). XXXI Congreso Nacional de Bioquímica. Congreso llevado a cabo en Aguascalientes, México.

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EVALUATION OF NATURAL SUBSTRATES FOR THE MASSIVE PRODUCTION

BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS

D.V. Casales-Aguilar1, J.V. Martínez-López1, M.A. Ramos-Enríquez1, Y. Escamilla-Lozano1, M.J. Serrano-Maldonado1 A. Angel-Cuapio1 1Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México. Paraje de San Isidro S/N, Barrio Tecamachalco, 56400, Los Reyes, México. *Autor de correspondencia. E-mail: rafael.angel@tesoem.edu.mx Fecha de envío: 14 de mayo del 2017

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ABSTRACT: The indiscriminate use of chemical pesticides for the control of agricultural pests results in detrimental effects on the environment. A viable alternative is the application of mycoinsecticides, which are products based on aerial conidia of entomopathogenic fungi. The fungus Metarhizium anisopliae is one of the most used worldwide and is produced in culture techniques on solid support (CSS). This research proposes the mass production of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae using natural substrates by culture techniques on solid support, to produce large numbers of infective units (conidia) and with this, the production of mycoinsecticides. When using amaranth as a substrate, the highest conidia production of approximately Ca ≈ 3.2x108 conidia per gram of initial dry substrate (conidia/gids) was reached, being statistically different (p<0.05) to the values obtained with other substrates. Keywords: conidia, viability, Metarhizium anisopliae, culture on solid support.

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RESUMEN: El uso indiscriminado de plaguicidas químicos para el control de plagas agrícolas trae como consecuencia efectos perjudiciales en el medio ambiente. Una alternativa viable es la aplicación de micoinsecticidas, que son productos basados en conidios aéreos de hongos entomopatógenos. El hongo Metarhizium anisopliae es uno de los más utilizados en todo el mundo y es producido en técnicas de cultivo sobre soporte sólido (CSS). Esta investigación, propone la producción masiva del hongo entomopatógeno Metarhizium anisopliae utilizando sustratos naturales mediante técnicas de cultivo sobre soporte sólido, con la finalidad de producir grandes cantidades de unidades infectivas (conidios) y con ello, la elaboración de micoinsecticidas. Al utilizar amaranto como sustrato se alcanzó la mayor producción de conidios de aproximadamente Ca ≈ 3.2x108 conidios por gramo de sustrato seco inicial (conidios/gssi), siendo estadísticamente diferente (p<0.05) a los valores obtenidos con otros sustratos. Palabras clave: conidios, viabilidad, Metarhizium anisopliae, cultivo sobre soporte sólido.

INTRODUCCIÓN El desconocimiento y mal uso de plaguicidas químicos afectan a todo el entorno, provocando un desequilibrio en el ecosistema. De esta manera, el control biológico es una herramienta sustentable, ecológica que bien operada evita esos desequilibrios reportados e involucra la acción de organismos benéficos sobre organismos plaga (de Faria y Wraight, 2007). El control biológico considera a los hongos entomopatógenos, los cuales tienen la capacidad de regular poblaciones de insectos considerados plaga en el sector agrícola. El hongo Metarhizium anisopliae tiene un amplio rango de hospederos que puede infectar, los cuales perjudican cultivos de gran importancia económica en todo el mundo, además de que ha sido inofensivo contra organismos benéficos (Glare, 2004). Para producir este hongo en gran escala se requiere una unidad infectiva como los conidios aéreos, los cuales suelen ser producidos en cultivo sobre soporte sólido (CSS) y da lugar a la producción de co-

nidios más resistentes a los factores abióticos comparado con el micelio y las blastosporas producidas en cultivo líquido (Jackson et al., 2010). Esta investigación, propone la producción masiva del hongo entomopatógeno Metarhizium anisopliae utilizando sustratos naturales mediante técnicas de cultivo sobre soporte sólido, con la finalidad de producir grandes cantidades de unidades infectivas (conidios) y con ello, la elaboración de micoinsecticidas. Dado que, los micoinsecticidas tienen un efecto positivo al reducir poblaciones de insectos considerados plaga sin deteriorar el medio ambiente y la salud humana.

2. METODOLOGÍA 2.1 Microorganismo, propagación y conservación El estudio se realizó con el hongo Metarhizium anisopliae. La cepa Metarhizium anisopliae CP-OAX perteneciente a la colección de hongos del Colegio de Posgraduados (COLPOS) (Texcoco, Estado de México). Esta cepa tiene la clave de acceso en el GenBank FJ876298 (Tlecuitl-Beristain et al., 2010). Se obtuvieron cultivos monocolonia (Montesinos-Matías et al., 2011), se cosecharon colonias que se propagaron en caja Petri y en matraz Erlenmeyer con medio avena (Tlecuitl-Beristain et al., 2010), posteriormente se conservaron en agua desionizada estéril (López-Lastra et al., 2002).

2.2 Preparación del sustrato Se utilizaron con diez sustratos naturales los cuales fueron: arroz precocido, arroz blanco, maíz palomero, lenteja, avena, trigo, amaranto, soja, frijol y maíz palomero. Se pesaron 50 g de cada sustrato y la materia sólida se colocó en bolsas de polipapel con las siguientes dimensiones 18x25 cm, con capacidad para ½ kg. Las bolsas fueron cerradas formando un nudo ligeramente apretado. Consiguientemente se esterilizó en autoclave a 121°C y 15 Psi (condiciones estándar) durante 15 minutos.

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2.3 Preparación del inóculo Para la obtención del inóculo se tomaron matraces de 7 días de incubación. En campana de flujo laminar se agregaron 30 mL de Tween 80 al 0.05% junto con un agitador para extraer el inóculo mediante agitación magnética, a 350 rpm a temperatura ambiente por 10 min hasta obtener una suspensión de conidios, inmediatamente la suspensión de conidios se filtró con gasa estéril, trasvasando en tubos Falcón de 50 mL. Posteriormente se determinó la concentración de conidios mediante el uso de una cámara de Neubauer en un microscopio con un objetivo 40x, se estandarizó una suspensión de conidios a 1x107 conidios/mL que fue utilizada para inocular el sustrato.

2.4 Producción de conidios El cultivo sólido se llevó a cabo sobre sustratos naturales que fueron inoculados de manera separada con 5 mL de una suspensión de conidios a 1x107 conidios/mL, con una humedad inicial del 40% e incubados a 28 °C durante 8 días. Después del periodo de incubación se determinó la producción de conidios mediante el uso de una cámara de Neubauer.

La producción de conidios (Ca) se reportó como conidios por gramo de sustrato seco inicial (conidios/ gssi).

2.5 Análisis estadístico Para todos los resultados se utilizó un análisis de varianza de una vía (ANOVA) seguido de la prueba de Tukey para la comparación de medias con un p < 0.05. Para todos los análisis se utilizó el software SPSS (SPSS, Chicago, IL).

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1 Cultivos monocolonia y conservación del hongo Metarhizium anisopliae Esta técnica se realizó con la finalidad de obtener una colección confiable del hongo Metarhizium anisopliae CP-OAX, ya que a pesar de conocer su procedencia es necesario asegurar su autenticidad y pureza. En la Figura 1 se muestra un cultivo monocolonia y viales de conservación.

Figura 1. Cultivo monocolonia (izquierda) y viales de conservación en agua desionizada (derecha) de M. anisopliae CP-OAX.

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Todos los métodos empleados para conservar la vida y las características genéticas de los hongos microscópicos se basan fundamentalmente en la atenuación o suspensión de su actividad metabólica (Mier et al., 2005). El método de conservación empleado en esta investigación se basó en una metodología descrita por López-Lastra et al. (2002). Los resultados de la conservación se reportan como el porcentaje de viabilidad, medida como unidades formadoras de colonias (UFC) y se muestran en la Tabla 1. Estos valores indican que el uso de viales con agua desionizada estéril mantenidos a 4ºC resultó adecuado. Tiempo de conservación (Meses)

Viabilidad (%)

90.78

2.87

81.00

3.06

Tabla 1. Viabilidad de los conservados.

En la investigación realizada por Mier y col. (2005) reportaron con este método que los hongos mostraron la conservación de la viabilidad y caracte-

rísticas morfológicas durante 3.5 años para M. anisopliae y de 4.5 para I. fumosorosea, por otro lado, Miranda-Hernández (2010), reportó un porcentaje de viabilidad del 50% para M. anisopliae CP-OAX a 6 meses de conservación, mientras que para I. fumosorosea CNRCB1 del 70% a 2 meses de conservado, ambos hongos fueron propagados en medio PDA (agar papa dextrosa) ; la diferencia en los porcentajes de viabilidad antes mencionados para M. anisopliae CP-OAX, comparados con los obtenidos en este trabajo puede deberse a la composición del medio de cultivo en el que el hongo fue propagado antes de ser conservado (medio harina de avena), ya que los diferentes tipos de nutrientes en el medio dan como resultado una variabilidad en el número de conidios producidos (Kamp y Bidochka, 2002).

3.2 Producción de conidios La producción de conidios obtenida por el hongo Metarhizium anisopliae CP-OAX sobre sustratos sólidos a los 8 días de cultivo se muestra en la Gráfica 1. Al utilizar amaranto como sustrato se alcanzó la mayor producción de conidios de aproximadamente Ca ≈ 3.2x108 conidios/gasi, siendo estadísticamente diferente (p<0.05) a los valores obtenidos con otros sustratos, a su vez, al utilizar avena, soja y

Figura 2. Microfotografía a 40X, crecimiento del hongo Metarhizium anisopliae CP-OAX sobre sustratos sólidos. a) arroz precocido, b) arroz blanco, c) maíz palomero, d) lenteja, e) avena, f) trigo, g) amaranto, h) soja, i) frijol y j) maíz palomero.

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Grafica 1. Producción de conidios de Metarhizium anisopliae CP-OAX sobre sustratos sólidos.

trigo no se encontró diferencia significativa (p>0.05) entre estos sustratos, siendo aproximadamente de Ca ≈ 2.3x108 conidios/gasi, por otro lado, con frijol y arroz precocido se alcanzó una producción promedio de Ca ≈ 1.5x108 conidios/gasi, entre estos sustratos no se encontró diferencia significativa (p>0.05), con respecto a utilizar lenteja y maíz palomero no se encontró diferencia significativa (p>0.05) entre estos sustratos con una producción promedio de Ca ≈ 5.2x107 conidios/gasi, finalmente con maíz pozolero y arroz blanco fueron estadísticamente diferentes (p<0.05) y se alcanzó una producción de Ca ≈ 1x108 conidios/gasi y Ca ≈ 5.6x107 conidios/gasi, respectivamente. En la Figura 2 se muestra una micrografía a 40x del crecimiento de Metarhizium anisopliae CPOAX sobre los sustratos estudiados. El impacto del tipo de sustrato sobre la producción de conidios fue analizado. Cuando se utilizó amaranto como sustrato sólido, la producción de conidios por gramo de arroz seco inicial fue mayor com-

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parado con los otros tratamientos. La producción de hongos entomopatógenos se basa en la multiplicación masiva de sus estructuras reproductivas en un sustrato. Hasta la fecha se han evaluado diferentes soportes inertes impregnados con medio de cultivo y sustratos naturales, en otros casos, los sustratos utilizados son de bajo costo o de desechos agroindustriales y esto es apropiado para países en desarrollo con baja tecnología y mano de obra barata (Monzón, 2001). Algunos reportes de hongos entomopatógenos en cultivo sólido, destaca el trabajo de Arzumanov et al., (2005) en el cual encontraron una producción de conidios del orden de 5x109 conidios por gramo de materia seca, de una cepa de Metarhizium anisopliae sobre granos de arroz. Por otro lado, Kim et al., (2010) proponen un medio de cultivo basado en una mezcla de maíz-aceite de maíz para la obtención de 1x109 conidios por gramo de sustrato, de la cepa termotolerante de Isaria fumosorosea SFP-198, realizado en bolsas de

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polietileno. A nivel planta piloto Ye et al., (2006) desarrollaron una cámara de fermentación de medio sólido para la producción de conidios de Beauveria bassiana sobre arroz, alcanzando una producción de 2x109 conidios por gramo de arroz. Utilizando soportes inertes, Xu et al., (2011) evaluaron diferentes soportes embebidos con medio de cultivo líquido, alcanzaron una producción de 1x1010 conidios por gramo de soporte inerte con la cepa Verticillium lecanii CBS 102071. Se ha demostrado que la producción de estos propágulos fúngicos para la formulación de micoinsecticidas, es mayor en cultivo en soporte sólido que las obtenidas por cultivo en medio líquido (Dorta y Arcas, 1998).

4. CONCLUSIONES

las ventajas que ofrece y por la capacidad de resguardar la viabilidad de los propágulos. Los resultados demuestran que los sustratos utilizados pueden ser utilizados para la producción de conidios de Metarhizium anisopliae CP-OAX en cultivo sólido, sin embargo, se recomienda utilizar el amaranto por el rendimiento alcanzado.

5. AGRADECIMIENTOS Los autores agradecen al Tecnológico Nacional de México por el financiamiento, al Tecnológico de Estudios Superiores del Oriente del Estado de México y a la Universidad Autónoma Metropolitana-Unidad Iztapalapa.

El método de conservación del hongo Metarhizium anisopliae CP-OAX resultó ser factible de utilizar, por

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Artículos: Bourriot, S., Garnier, C. y Doublier, J.L. (1999). Phase separation, rheology and microstructure of micellar casein-guar gum mixtures. Food Hydrocolloids, 7, 9095.

Tesis: Carvajal, M. N. (2000). Estudio del Sembrado en Procesos de Cristalización por Lotes. Tesis de Maestra en Ciencias en Ingeniería Química, Instituto Tecnológico de Celaya, México.

Internet: Saunders, L. (1994). Beverage creation. Design elements. Disponible en: www.foodproductdesign. com/archive/1994/0494DE.html. Accesado: 24 agosto 2005.

Presentaciones en Congresos: Bósquez-Molina, E. (2002). Water vapor permeability of edible films. Presentación 100B-34. 15-19 Junio. Anaheim, California: Institute of Food Technologists Annual Meeting. NOTA: Los trabajos publicados en TESTLAPALLI deben citarse como TESTLAPALLI.

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