¿Por qué necesitamos test para endotoxinas en los centros de Diálisis y Hemodiálisis?
Anteriormente la diálisis solo podía ser administrada a los pacientes con
falla renal, por cortos periodos de tiempo. Actualmente, la hemodiálisis por largo tiempo o crónica puede llevarse a cabo por años. Sin embargo, si durante la terapia existe exposición a endotoxinas pueden resultar en reacciones pirogénicas como: • Fiebre, escalofríos, caída de la presión sanguínea • Incremento de citocinas • Inflamación • Resistencia a la eritropoyetina recombinante humana Este último punto, es de especial preocupación, ya que la anemia es común en pacientes con falla renal y esta última es utilizada para tratar a dichos pacientes. La inflamación inducida por la exposición a niveles relativamente bajos de endotoxinas a través del tiempo disminuye la efectividad de la eritropoyetina humana.
Diálisis y pruebas de detección de endotoxinas LA AAMI (American Association for Medical Instrumentation) señala que existen potenciales y severos efectos adversos por la exposición a endotoxinas. En 2011 la AAMI introdujo los nuevos estándares de calidad para agua ultra purificada para hemodiálisis y agua de diálisis, entre ellos se añadió el límite máximo de endotoxinas que es de 0.25UE/mL para agua y 0.03eu/mL para agua ultrapura y 0.125 EU/mL y 0.5EU/mL respectivamente como límites para tomar acciones y corregirlas.
Cualquiera de los métodos existentes puede ser utilizado para la detección de endotoxinas esto son: • El clásico método Gel Clot • Test de cinética por turbidimetría • Test cinético cromogénico • Test por Factor C recombinante (protocolos en prueba)
Recolección de las muestras de agua Solución
de Las muestras de agua diálisis pueden ser recolectadas de las trampas o puertos en el sistema de distribución de agua. Las trampas/puertos Catéter no deben ser desinfectado Cavidad abdominal antes de la recolección, de Peritoneo ser necesaria la desinfección solo realizarlo con alcohol y gasa estéril. No se debe utilizar cloro u otro desinfectante ya que estos podrían interferir en los resultados. Las trampas deben de ser abiertas y permitir correr el agua por al menos 60 segundos antes de la recolección de la muestra. Se debe de recolectar un mínimo de 50mL.
Recolección de muestra de Dializado Se debe muestrear por lo menos 2 maquinas al mes, rotando para que todas las maquinas sean muestreadas a lo largo de 12 meses. El dializado debe ser recolectado de los puertos del dializador. • Los dializadores nuevos tienen un puerto de muestreo al que se puede acceder con una jeringa • Si la desinfección es necesaria, usar solamente alcohol y gasa estéril y permita que el alcohol se evapore por completo. • No usar blanqueador o desinfectante. La toma se debe realizar con una jeringa de 30mL para aspirar y dispensar la muestra recolectada, se debe de usar una jeringa nueva cada vez que se realiza la recolección de una muestra. Se necesita un mínimo de 25mL en almacenado en un contenedor estéril libre de pirógenos.
Equipo necesario para realizar la prueba • Baño seco con bloque de aluminio diseñado para aceptar tubos de 10 mm // De manera alternativa se puede utilizar un baño María a 37°C siempre y cuando no sea recirculante par evitar el movimiento de los tubos. • Vortex • Pipetas • Tubos Libres de Pirógenos 1.1 Para recolección de muestras (vidrio o poliestireno) 1.2 Preparación de estándares (vidrio) 1.3 Dilución de muestras (vidrio) 1.4 Tubos de reacción de 10mm (vidrio) • Temporizador • Lector de absorbancia en placas para ensayos cuantitativos (Turbidimetría y cinético cromogénico)
Más información • Matsuhashi N, Yoshioka T. Endotoxin-free dialysate improves response to erythropoietin in hemodialysis patients. Nephron. 2002;92(3):601-4. doi: 10.1159/000064087. PMID: 12372943. • Kasparek T, Rodriguez OE. What Medical Directors Need to Know about Dialysis Facility Water Management. Clin J Am Soc Nephrol. 2015 Jun 5;10(6):1061-71. doi: 10.2215/CJN.11851214. Epub 2015 May 15. PMID: 25979976; PMCID: PMC4455220. • Obayashi T, Tamura H, Tanaka S, Ohki M, Takahashi S, Arai M, Masuda M, Kawai T. A new chromogenic endotoxin-specific assay using recombined limulus coagulation enzymes and its clinical applications. Clin Chim Acta. 1985 Jun 30;149(1):55-65. doi: 10.1016/0009-8981(85)90273-6. PMID: 3896576.
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