Séparation électrophorétique des AA

Electrophorèse des acides aminés

Halitim Leila

Electrophorèse sur support

Sur papier

Sur acétate de cellulose Sur gel Amidon, agar, agarose, polyacrylamide …

Electrophorèse Sur support ou de zone Des Acides Aminés « AA »

Charge électrique

Distance De migration

Les cations (+) migrent vers le pôle négatif qu’on appelle : cathode (-) ; Les anions (-) se déplacent vers le pôle positif qu’on appelle : anode (+) ; Les zwitterions (+–) ne migrent pas, restent au voisinage.

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Electrophorèse des acides aminés

Halitim Leila

Comment on calcule la distance de migration ?

Distance de migration en cm =|PHi - PH|

Pourquoi on appelle le pôle négatif (-) cathode ?

Pourquoi on appelle le pôle positif (+) anode ?

Goutte contenant le mélange d’acides aminés

Anions(-)

Anode

Bande de papier filtre

On appelle le pôle positif(+) anode Car Les anions (-) migrent vers ce pôle.

Cations(+)

-

Cathode

On appelle le pôle négatif(-) cathode Car les Les cations (+) migrent vers ce

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Electrophorèse des acides aminés

Halitim Leila

Exercice 2 En milieu acide (PH < PHi)

AA+(Cations) Migre vers la Cathode

En milieu basique (PH > PHi)

AA- (Anions) Migre vers l’anode AA+– (Zwitterion, ion mixte) Ne migre pas

En milieu neutre (PH =PHi)

PH = 3 < PHi Val, Lys, His Val+, Lys+, His+ PH = 3 > Phi Asp Asp-

Carte électrophorétique

Dépôt Val+

Asp-

His+

Lys+

-

0 cm

Justification : L’acide aminé le plus basique est le plus proche du pôle négatif ; L’acide aminé le plus acide est le plus proche du pôle positif ; Sinon, on calcule la distance de migration en cm d=|PH-PHi|.

C’est la valeur PH- PHi Distance Asp- = |PHi - PH|= 3 – 2,97 = 0,08 cm Distance Va+l = |PHi - PH|= 3 – 5,97 = 2,97 cm Distance His+ = |PHi - PH|= 3 – 7,58 = 4,58 cm Distance Lys+ = |PHi - PH|= 3 – 9,14 = 6,14 cm 3

Electrophorèse des acides aminés

Halitim Leila

Exercice 10 Rappels

 PH < PHi, l’acide aminé est chargé positivement « + » (Cation), migre vers la cathode ;  PH > PHi, l’acide aminé est chargé négativement « - » (Anion) migre vers l’anode.

- Asp migre vers l’anode (Pôle +), Asp chargé – PH > Phi Asp PH > 2.97 - Lys et Arg migrent vers la cathode (Pôle -) Lys et Arg chargés + PH < Phi Lys et Arg PH < 9.79 et 10.76 - Gly et Val restent au voisinage du point de dépôt donc Gly+– et Val+– PH = Phi de Gly et Val = 5.97 L’intervalle dont lequel est compris la valeur du PH de cette électrophorèse 2.97< PH ≥ 5.97

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