Issuu

Din par tner i fødevaresikkerhed

CFX OPUS

REAL-TIME PCR SYSTEMS

Analyse – PCR (Polymerase Chain Reaction)

En af metoderne til at analysere for patogener er PCR. PCR er en metode, som gør det muligt at lave millioner af kopier af en specifik DNA-sekvens på kort tid.

Sådan fungerer det i tre trin:

1. Denaturering: DNA varmes op (ca. 95 °C), så de to strenge skilles.

2. Annealing: Temperaturen sænkes (ca. 50–65 °C), så korte DNA-stykker kaldet primere binder sig til målsekvensen.

3. Elongering: Enzymer (ofte Taq-polymerase) bygger nye DNA-strenge ud fra primerne. Denne cyklus gentages typisk 25–40 gange, hvilket giver en eksponentiel stigning i mængden af DNA.

Fordele ved PCR

Hurtigere resultater

• Testresultater inden for 24 timer for de fleste protokoller

• Ultrahurtig screening (12 timer) af rå kødprøver for visse protokoller

• Hurtig screening af op til 94 prøver

Let at bruge

• Simpel DNA-ekstraktion

• Automatiseret amplifikation og detektion

• Brugsklare reagenser, herunder til DNA-ekstraktion

Minimal risiko (for falske resultater)

• Positive og negative PCR-kontroller plus intern kontrol

• Specifikke primere og prober

Høj følsomhed

• Kan detektere meget små mængder DNA fra patogener, selv i komplekse fødevarematrixer.

Automatiserbar

• Velegnet til automatiserede systemer, hvilket øger effektiviteten og reducerer menneskelige fejl.

Multiplexing

• Mulighed for at teste for flere patogener i én og samme analysekørsel

Kits

Valideringer

Mange af kittene er validerede efter for eksempel AOAC eller Afnor, også til mere specielle prøver som eksempelvis cannabisprodukter eller plantebaseret kød.

Læs mere om, hvilke PCR-kits vi kan tilbyde, ved at scanne de to QR-koder.

Patogener og PCR

Forskellige sygdomsfremkaldende organismer kan forurene fødevarer – der er identificeret mere end 250 fødevarebårne sygdomme. De fleste af disse infektioner er forårsaget af en bred vifte af bakterier, vira og parasitter. Men også skadelige toksiner og kemikalier kan forurene fødevarer og forårsage fødevarebårne sygdomme.

Infektiøse invasive patogener:

• Trænger ind i kroppen og invaderer eller koloniserer værten

• Symptomer opstår typisk efter mere end 8 timer

• Eksempler: Salmonella, Listeria monocytogenes, Campylobacter og enteroinvasive Escherichia coli

Toksindannende patogener:

• Producerer enterotoksiner i fødevaren

• Sygdommen afhænger ikke af, at organismen når tarmen, sætter sig fast og vokser

• Symptomer kan opstå allerede efter 1 time, da toksinet er dannet i fødevaren og indtages direkte

• Eksempler: Staphylococcus aureus, Bacillus cereus og Clostridium botulinum, samt enterotoksiske og enterohæmoragiske E. coli

Kommissions forordning (EF) nr. 2073/2005 om mikrobiologiske kriterier for fødevarer med ændringerfastsætter harmoniserede mikrobiologiske kriterier. Følgende patogener er for eksempel inkluderet:

•Salmonella

•Listeria monocytogenes

•E. coli

•Enterobacter sakazakii

•Enterobacteriaceae

•Stafylokok-enterotoksiner

Grundlæggende fastsættes to forskellige typer kriterier i forordning 2073/2005:

Fødevaresikkerhedskriterier: Vurderer sikkerheden af et produkt/parti fødevare

Proceshygiejnekriterier: Sikrer, at produktionsprocesserne fungerer korrekt

Den vigtigste forskel mellem dem er konsekvensen: Hvis et fødevaresikkerhedskriterium ikke er opfyldt, skal det pågældende parti fødevarer trækkes tilbage eller må ikke markedsføres.

ECA i praksis

ECA (Electro Chemical Activated)-vand fremstilles ved elektrolyse af almindeligt salt og vand, hvilket skaber en opløsning af hypoklorsyre – et naturligt og yderst effektivt desinfektionsmiddel. Det er den samme substans, som vores krop selv producerer til at bekæmpe bakterier og vira.

Fordele ved ECA-vand:

• Miljøvenligt: Nedbrydes hurtigt og efterlader ingen skadelige rester.

• Effektiv desinfektion: Dræber op til 99,999 % af bakterier – inkl. Listeria og E. coli .

• Ingen skadelige dampe: Kan bruges uden værnemidler.

• Fjerner biofilm: Ideelt til fødevareproduktion og rengøring i fugtige miljøer.

• Økonomisk: Mange brugere oplever op til 90 % besparelse på desinfektionsmidler.

ECA-vand er godkendt af Fødevarestyrelsen som desinfektionsmiddel uden afskyl af overflader i kontakt med fødevarer. Desuden er det godkendt af ECHA (European Chemicals Agency) i henhold til Biocidforordningens pkt. 4 - Fødevarer og foderstoffer og 5 - Drikkevand.

Hvordan kan ECA bruges?

ECA kan anvendes i en lang række forskellige situationer. Det er nemt, billigt og kemikaliefrit at gøre rent og desinficere med ECA.

Ved blandestationen opblandes ECA-vandet til den optimale koncentration til overflader, maskiner, gulve, CIP-anlæg osv.

SNAPTUN FRYSEHUS

Hos Snaptun Frysehus har man en frysekapacitet på ca. 80.000 kg Regnbueørred (Oncorhynchus mykiss) i døgnet. Trods den store mængde fisk, opretholdes en høj kvalitet på den indfrosne ørred og virksomheden er certificeret af IFS.

Hos Snaptun Frysehus anvender man ECA i forbindelse med rengøring. Både til gulvvask og på produktbærende overflader udnyttes ECA-vandets rengørende og desinficerende effekt.

Medarbejderne er glade for brugen af ECA-vandet. De synes at gulvene visuelt er renere og at lugten af fisk er fjernet.

Samt produktion og anvendelse af ECA-vand i stedet for konventionelle rengørings- og desinfektionsmidler, har ovenikøbet sparet virksomheden penge Måske allervigtigst: siden man begyndte at anvende ECA, er der ikke fundet Listeria-bakterier, når kunderne har analyseret ørrederne.

Snaptun Frysehus har lavet et showroom, hvor det er muligt at se mere om ECA-vandets anvendelser. Hvis du har lyst til at komme på besøg, så tag kontakt til Patrick hos Food Diagnostics.

Sandwich ELISA

Sandwich ELISA bruges ofte til proteinanalyse såsom fødevareallergener. Analytten (antigenet) skal være stor nok til at have bindinger to steder (epitoper).

I denne metode et specifikt antigen (analyt) i prøven, binder til vedhæftede antistoffer på den faste fase af en mikrotiterplade.

Efter vask tilsættes antistof, som binder til et andet bindingssted (epitop) af antigenet (analyt). Efter vask tilsættes konjugat og resultaterne kan måles via den optiske tæthed (OD).

Signalet er proportionalt med mængden af antigen (analyt).

ELISA og automatisering

Metode og muligheder

ELISA er en forkortelse for Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay. Det er en metode, som anvendes i en lang række forskellige sammenhænge.

• Er baseret på brug af antistoffer specifikt for det stof, eller den gruppe af stoffer, der analyseres for

• Detektion vha. farvereaktion (visuelt eller photometrisk)

• Kvantitativt, semi-kvantitativt eller kvalitativt resultat

• Højt prøveantal muligt (mikroplade design)

• 2 varianter: Kompetitiv og Sandwich ELISA

Kompetitiv ELISA

Kompetitiv ELISA er velegnet til at måle prøver med bare én epitop, samt små analytter som f.eks. mykotoksiner eller antibiotika.

Ved kompetitiv ELISA er den optiske tæthed (OD) omvendt proportionalt med indholdet af analyt.

Test kits

Da ELISA er en velkendt og gennemprøvet analyseform, er der udviklet kits til analyse indenfor en lang række forskellige områder:

• Mykotoksiner – vores største område, når det gælder ELISA kits. Mykotoksiner kan give alvorlige sygdomme hos både mennesker og dyr og der er derfor i Forordning 2023/915 om maksimalgrænseværdier for bestemte forurenende stoffer i fødevarer oplistet grænseværdier for de forskellige mykotoksiner i forskellige fødevarer. Også i foder er der beskrevet grænseværdier.

• Allergener – der findes kits til en lang række af de allergener, som er beskrevet i Mærkningsforordningen (1169/2011). Fordelen i denne forbindelse er, at analysen kan laves kvantitativt, hvilket er nødvendigt ved anprisning af glutenfrie fødevarer (gluten <20ppm). Ved varmebehandlede og/eller fermenterede fødevarer, kan der med fordel, bl.a. ved mælk og gluten, anvendes et kompetitiv ELISA kit, der gør det muligt at detektere delvist ødelagte proteiner.

Har I mange prøver?

Dynex DSII ELISA Robot er et avanceret automatiseret system, der kan håndtere to mikroplader og flere assays på samme tid. Systemet har brugervenlig software, der giver fuld kontrol over systemet og resultaterne. Dynex DSII er fleksibel og pålidelig, den kan behandle to 96-brønds mikroplader og op til 12 forskellige assays samtidig, uden manuel indgriben. Systemet har et intuitivt grafisk interface og DS-Matrix-softwaren er funktionel og brugervenlig.

Vi hjælper jer gerne med en behovsafdækning:

• Hvad er jeres udfordring (kundekrav, lovgivning etc.)

• Hvad skal der testes for? (allergener, mykotoksiner ??)

• Hvad er jeres ønsker til kittet (LOD og LOQ?)

• Hvor mange prøver er der tale om?

• Hvad er vigtigt for jer (tid, arbejdskraft, præcision?)

• Har personalet kendskab til ELISA (Træning?)

• Skal der laves valideringsarbejde?

• Hvordan skal resultaterne kvalitetssikres?

Andre ELISA kits:

• Kits til kontrol for “Food Fraud”, f.eks. hest i oksekød eller komælk i gedemælken

• Marine biotoksiner

• Antibiotika

• Hormoner

Læs mere om ELISA her:

Bakterier i syrnede mælkeprodukter – især mælkesyrebakterier – spiller en central rolle i både smag, konsistens og sundhedsmæssige fordele.

Hvad er mælkesyrebakterier?

Biokemi

Danmark

mængde mikroorganismer).

Runi Nielsen

Færøerne

Tonny NielEhsan Mirsharghi Mikrobiologi

Eksempler på bakteriekulturer:

Cristiana@foodiagnostics.dk Telefon: 2594 8086

Mælkesyrebakterier er mikroorganismer, der omdanner mælkesukker (laktose) til mælkesyre. Denne proces kaldes fermentering og er det, der giver syrnede mælkeprodukter som yoghurt, A38, tykmælk og Cultura deres karakteristiske syrlige smag og cremede konsistens

Funktion og fordele:

• Fermentering: Bakterierne gør mælken tykkere ved at få proteinerne til at danne et netværk, som binder væsken.

• Smag og aroma: Under fermenteringen dannes aromastoffer, som giver produkterne deres unikke smag.

• Sundhed: Mange mælkesyrebakterier har en positiv effekt på tarmfloraen og fordøjelsen. Nogle kan overleve turen gennem mavesyren og nå tarmen, hvor de kan bidrage til en sund mikrobiota (den samlede

•Lactobacillus bulgaricus og Streptococcus thermophilus bruges typisk i yoghurt.

Runi@foodiagnostics.dk Telefon: (298) 591667

Danmark

Ehsan@foodiagnostics.dk Telefon: 2222 7592 Hygiejne & ECA

Danmark

Tonny@foodiagnostics.dk Telefon: 4056 5659

•Nordiske kulturer bruges i produkter som ymer og tykmælk og har en anden smagsprofil end yoghurt

Produkter med mælkesyrebakterier:

•Yoghurt

•A38

•Cultura

•Tykmælk