April 2024

NR. 4, April PRØVETAGNINGSUDSTYR - VIGTIGERE END DU TROR Side 4-5 VANDSIKKERHED - BADEVANDSSÆSONEN NÆRMER SIG Side 2-3 SCREENING AF ANTIBIOTIKARESTER I ANIMALSKE FØDEVARER Side 6-7

VANDSIKKERHED

BADEVANDSSÆSONEN

NÆRMER SIG

Sommeren nærmer sig, og det er derfor snart tid til at hoppe i bølgerne. Badevandssæsonen er ifølge lovgivningen fra 1. juni til 15. september.

Den første prøve skal tages 5-10 dage før d. 1. juni. Der skal tages 4 prøver i løbet af sæsonen og hele 10 prøver, hvis stranden er en blå-flag-strand. Er I klar?

Ellers rådgiver vi gerne herom.

HVAD SKAL DER ANALYSERES FOR Vandet undersøges for indhold af bakterier af typen enterokokker (Intestinale enterokokker) og E. coli (Escherichia coli).

Når man måler for enterokokker og E. coli, skyldes det, at de findes i tarmkanalen hos dyr og mennesker. Derfor er de et tegn på, at der er sket fækal forurening af vandet – og dermed er der risiko for, at der er andre skadelige bakterier, såsom musetyfus- og dysenteribakterier. Bakterierne kan også være tegn på virus i vandet.

2

PRINCIP

Metoden er baseret på påvisning af to forskellige enzymer, det ene findes i de fleste E. coli, det andet i de fleste enterokokker. Substratet MUG (4-methylumbelliferyl-β-D-glucuronid) hydrolyseres af β-D-glucuronidase, et enzym, der findes i E. coli, mens enzymet β-D-glucosidase, der er til stede i enterokokker, hydrolyserer substratet MUD (4-methylumbelliferyl-β-D-glucosid eller 4-methylumbelliferyl-λ -D-glucopyranosid).

Hydrolyse af både MUG og MUD giver 4-methylumbelliferon, som fluorescerer blåt (λ ex 365nm og λem 445nm).

METODER

Referencemetoderne til analyse for Intestinale enterokokker og E.coli i badevand (overfladevand) er med mikrotiterplader med vækstmedie og fluorescens detektion. Resultaterne aflæses vha. MPN (Most Probable Number)-tabel.

MUD- og MUG-mikroplader blev udviklet til at strømline testning for fækal kontaminering ved hjælp af et mikropladeformat. Disse mikroplader bruges til at detektere to indikatorer for tilstedeværelsen af fækalt materiale, E. coli og Enterokokker i forskellige vandkilder.

Mikropladeformatet tillader fortyndinger og replikater af en prøve på den samme plade Detektering kan gøres rimeligt simpelt med en UV-lampe med lang bølgelængde.

FORDELE

•MUG mikroplader bruges til at påvise E. coli, mens MUD plader bruges til at påvise enterokokker

•Metoden kræver ingen vækst i bouillon eller på agarplader

•Mikropladeformat tillader fortyndinger og replikater af en prøve på den samme plade

•Anvendelse af fortyndningsrør indeholdende Bromphenolblåt eliminerer risikoen for fortyndingsfejl.

•Enkel og økonomisk detektering med UV-lamper med lang bølgelængde

•MUD og MUG kit er standardiseret i henhold til EN ISO 9308-3 (1999) and EN ISO 7899-1 (1999)

Vandprøver (fortyndingsrækken afhænger af kilden) sættes på mikroplader, der indeholder enten dehydreret MUD eller MUG. Efter inkubation i 36 til 72 timer ved 44°C aflæses brøndene med UV-lys. Resultater udlæses vha. MPN-tabel.

3

Prøvetagningsudstyr vigtigere end du tror.

PUR-BLUE SWABS

Dit resultat bliver aldrig bedre end din prøvetagning, og derfor er det vigtigt at tænke over de prøver du tager. Det er især vigtigt at tænke over hvorfor, hvor og hvordan, du tager dem.

Prøvetagning er ofte et overset emne. Når man taler om prøveudtagning er der ofte også tale om “Garbage in - garbage out“, hvilket vil sige, at dit resultat afspejler din prøveudtagning.

Derfor skal du også gøre dig nøje overvejelser omkring, hvilket udstyr der bruges, og være opmærksom på, at der kan være en “risiko“ for, at du finder noget.

Hvad er mest optimalt at bruge hvor og hvornår? Til mindre områder (op til 100 cm2), som også kan være svært tilgængelige, anbefales svabere. Hvis prøvetagningsområdet overstiger 100 cm2, anbefales svamp (evt. med håndtag) eller klud.

Hvis overfladen er våd, kan der bruges tørt prøvetagningsudstyr, ellers anbefales prævædet prøvetagningsudstyr. Væsken kan være sterilt vand, eller eksempelvis peptonbuffer. Hvis der kan være rester af desinfektionsmiddel på overfladen, anbefales det ydermere at vælge prøvetagningsudstyr, der er blevet tilsat neutraliserende stoffer.

Uanset hvilken opgave der skal løses, er vi klar med rådgivning, og hjælp til at finde det rette produkt.

4

Klude og sokker

Disse produkter fås i en række varianter, både med og uden handsker og med forskellige væsker, afhængigt af, hvilke mikroorganismer man kontrollerer for. De fleste fås både i en variant med steril pose og en variant med twirl-bag for en ekstra nem lukning. En af de nyeste varianter er med Ringers solution, som er en isotonisk opløsning af forskellige salte, men som ikke indeholder ”mad” til bakterierne.

Hvilke faktorer skal overvejes i valget af prøveudtagningsudstyr?

1. Er det en kvantitativ eller kvalitativ analyse der skal laves efterfølgende?

2. Hvilket underlag skal testes?

3. Er overfladen våd eller tør?

4. Er det før eller efter en eventuel desinfektion af overfladen?

5. Arealet af overfladen som skal testes.

6. Hvilken type mikroorganisme der ledes efter.

7. Hvor lang tid der går fra prøven er taget, til den analyseres.

Nyhed – til de trælse udtagningssteder

Er undskyldningerne mange, når det drejer sig om de svært tilgængelige prøveudtagningssteder?

“Der kan jeg ikke nå op – jeg kan ikke komme ind under her – jeg synes det er hårdt at bukke sig hele tiden”.

Løs problemerne med en “Extension Pole”en aluminiumsteleskopstang med en max. længde på knap 2,5m, hvorpå der kan kobles en adapter enten til Swabs eller Sponges.

Pur-Blue™ Swab Sampler

PUR-Blue™ Swab Sampler anvendes på små eller mellemstore (op til 100 cm2) overflader til kvantitativ analyse eller analyse for patogener. PUR-Blue findes også som en DUO-svaber med både broth og opformeringsmedium. Swab sampleren findes bl.a. med 1mL HiCap broth, som er egnet til direkte overførsel til Compact Dry plader med henblik på kvantificering (tælling) af f.eks. Totalkim, Enterobakterier etc.

Til Pur-Blue™ Swab Sampler fås adapter til Extension Pole

Veriswab™ Swab Sampler

Veriswab™

Sampleren har en spids af Dacron og anvendes til små/ smalle områder, som er svære at nå.

SampleRight™ Sponge Sampler

SampleRight™ Sponge Sampler er en traditionel svamp til prøveudtag af miljøprøver og overflader. Den er fremstillet af polyuretan eller cellulose og er 3,8cm x 7,6cm i en 532ml eller 710 ml prøvepose. Hver pose er med hvidt skrivefelt og kan fås med og uden handsker.

EZ Reach™ Sponge Sampler

EZ Reach™ Sponge Sampler har et fleksibelt håndtag, hvor svampen kan aftages med et enkelt vrid. Den er særligt anvendelig på lidt større områder, og kan fås i enkelt- og dobbeltversion og med forskellige størrelser ”sponge” Til EZ Reach™ Sponge Sampler fås adapter til Extension Pole

5

Premi®Test.

screening af antibiotikarester i animalske fødevarer.

I husdyravl bruges antibiotika til behandling af bakterielle infektioner og sygdomme. Derudover kan antibiotika ulovligt bruges som antimikrobielle vækstfremmere (AGP). Som en konsekvens heraf kan antibiotikarester forblive i fødevarer af animalsk oprindelse og udgøre en sundhedsrisiko for forbrugerne.

Hvor farlige er antibiotikarester i fødevarer?

Mens brugen af antibiotika stort set er forbudt i økologisk landbrug, er det udbredt i industrielt husdyrbrug. Selvom brug af antibiotika kun er tilladt til den specifikke behandling af syge dyr, sker det stadig, at antibiotika også anvendes som en forebyggende foranstaltning. Forkert eller ulovlig brug kan resultere i rester i animalske produkter.

Forurenede fødevarer kan omfatte fisk og skaldyr, kød, indmad, mælk, æg eller endda honning. Antibiotikarester kan fremme udviklingen af multiresistente bakterier. For at beskytte forbrugerne gælder maksimalgrænseværdier for restkoncentrationer i mange lande.

Forskellige testmetoder er tilgængelige til overvågningen. ELISA-test anvendes til en præcis kvantificering af individuelle antibiotika. Derudover findes en hurtig mikrobiel test i form af Premi®Test, som muliggør en simpel og hurtig screening direkte på stedet på bedriften, på slagteriet eller i kødforarbejdningsanlæg. Den kan også påvise antibiotikarester direkte i urinen fra kvæg og svin.

Premi®Test er baseret på væksthæmning af sporer med antibiotika, og er en enkel og omkostningseffektiv kvalitativ screening for et bredt spektrum af antibiotika.

Premi®Test kan detektere rester af β-lactamer, cephalosporiner, macrolider, tetracycliner, sulfonamider, aminoglycosider, quinoloner, amphenicoler og polypeptider i kød (okse, gris, fjerkræ).

Hvordan anvender du premi®test?

fjern det ønskede antal ampuller fra rammen. Pas på ikke at beskadige folien på de resterende ampuller. Brug en ekstra ampul til den negative kontrol, som er en prøve, der ikke indeholder antibiotika.

Skær kødet i stykker på ca. 2 cm3 og kom det ene stykke ned i kødpressen. Øg trykket langsomt og hold konstant indtil ca. 200 µL kødsaft opnås.

Åbn ampullerne med det ene hjørne af den grønne ramme og mærk ampullerne.

Dyp pipetten i væsken og sug kødsaften op.

Ved at presse toppen af pipetten sammen, frigives ca. 100 µL af kødsaften. (Bemærk: Et lille overskud af væske kan blive tilbage i den nederste del.)

Inkuber ampullerne 20 minutter ved stuetemperatur. Premi®Test-inkubatoren indstilles til 64 °C

Vask ampullerne to gange med demineraliseret vand. Fjern overskydende vand ved at vende ampullerne på hovedet på et stykke køkkenrulle, men bank ikke på ampullerne.

Luk ampullerne med den medfølgende perforerede folie.

Sæt ampullerne i inkubatoren ved 64°C.

Aflæs resultaterne af prøverne, når den negative kontrol viser en klar farveændring til gul (ca. efter 3 timer).

Biokemi

Danmark

Cristiana@foodiagnostics.dk

Telefon: 2594 8086

Antibiotikaresistens er stigende på verdensplan. Eksperter ser dette som en af de største sundhedsrisici for den menneskelige befolkning. Hvis patogene mikroorganismer bliver resistente over for antibiotika, kan mange bakterielle infektioner ikke længere behandles i fremtiden og kan endda være dødelige. Dette gælder især i tilfælde af multiresistente bakterier. Hovedårsagen til udviklingen af resistens er overdreven eller ukorrekt brug af antibiotika – i humanmedicin såvel som i husdyrbrug.

Færøerne

me, der er resistent over for mange antibiotika, herunder Methicillin og andre beta-lactam-antibiotika.

Runi Nielsen Tonny NielEhsan Mirsharghi Mikrobiologi

Runi@foodiagnostics.dk

Danmark

Telefon: (298) 591667

Et af eksemplerne på en resistent bakterie er Staphylococcus aureus. Methicillin-resistent Staphylococcus aureus (MRSA) er en bakteriestam-

Danmark

Tonny@foodiagnostics.dk

Telefon: 4056 5659

Ehsan@foodiagnostics.dk

Telefon: 2222 7592 Hygiejne & ECA

Den har stor betydning ved hospitalsindlæggelser, hvor man typisk vil blive spurgt, om der er øget risiko for, at man kan være bærer af denne bakterie, ved eksempelvis at have været i nærheden af svineopdræt.

Staphylococcer smitter ret nemt fra person til person via hudkontakt og det er derfor vigtigt at have stort fokus på håndhygiejne.