Medical Market - Laborator 2016

Medicină de laborator Revista profesioniștilor din Sănătate

“Sprijinirea colegilor tineri a fost şi rămâne una din priorităţile noastre” Interviu realizat cu Conf. Dr. Ioana Brudaşcă

Particulele LDL „small-dense” – factor de risc independent pentru ateroscleroză Asist. univ. Dr. Antoanela Curici

4

26

Publicaţie adresată cadrelor medicale

2016

Sumar

14

28

42

„Sprijinirea colegilor tineri a fost şi rămâne una din priorităţile noastre“

4

Proteina de legare a acizilor graşi, fracţia cardiacă (H-FABP) – biomarker cu potenţial în diagnosticul şi prognosticul afecţiunilor cardiovasculare

6

Tehnologii moderne în imunohematologie

10

Anticorpii anti β-2 GP I D I – biomarker asociat în tromboze

14

T-SPOT.TB Testarea infecţiei latente TBC

18

Diagnosticul molecular al unor pneumobacterii

20

Particulele LDL „small-dense” (sdLDL) – factor de risc independent pentru ateroscleroză

26

Polimorfismele receptorului de FSH

40

Valoarea clinică a determinării numărului de eritroblaşti prezenţi în sângele periferic

42

Citeşte revista în format digital Editor ISSN 2285 - 6471 Calea Rahovei, nr. 266-268, Sector 5, Bucureşti, Electromagnetica Business Park, Corp 60, et. 1, cam. 19 Tel: 021.321.61.23 e-mail: redactie@finwatch.ro

www.revistamedicalmarket.ro Medicină de laborator 3

Interviu

„Sprijinirea colegilor tineri a fost şi rămâne una din priorităţile noastre“ Interviu realizat cu Conf. Dr. Ioana Brudaşcă

Cluj Napoca, oraşul istoric din inima Transilvaniei, îşi deschide porţile pentru a găzdui în perioada 18 – 21 mai prima Conferinţă Naţională a Asociației de Medicină de Laborator din România, cu participare internațională. Despre acest eveniment stăm de vorbă cu conf. dr. Ioana Brudaşcă, Președintele AMLR. Vă rugăm să ne spuneţi care sunt ţintele ştiinţifice pe care doriţi să la atingeţi la această prestigioasă manifestare? Cum consideraţi că au evoluat lucrurile în ceea ce priveşte această specialitate în ultimul an, atât din punct de vedere al dotărilor laboratoarelor cât şi al numărului medicilor de laborator?

Conferinţele şi congresele sunt un excelent prilej de a te pune la curent cu noutăţile profesionale, de a audia prezentări ale experţilor în diferite domenii, şi mai ales, oferă un cadru în care participanţii pot interacţiona direct şi îşi pot împărtăşi experienţa profesională, pot discuta problemele cu care se confruntă în mod concret în practică. În ceea ce priveşte dotarea laboratoarelor, ca principiu general, există standarde obligatorii impuse de acreditarea ISO. În mod particular, alegerea unui anumit tip de echipamente este o decizie complexă, în care intervin mulţi factori, inclusiv considerente economice.

Este prima Conferinţă Naţională a AMLR. Vorbiţi-ne, vă rugăm, despre implicarea societăţilor partenere, cât şi despre participarea internaţională.

Această manifestare continuă de fapt un lung şir de manifestări similare, desfăşurate de-a lungul anilor de către cele două societăţi profesionale existente anterior (Asociaţia Laboratoarelor Medicale din România ALMR şi Societatea Română de Medicină de Laborator SRML). Din 2015 cele două societăţi îşi desfăşoară activitatea sub forma unei asociaţii unice, Asociaţia de Medicină de Laborator

4

din România, AMLR. Prin urmare, nici asociaţia, nici evenimentul ştiinţific de care vorbim nu sunt la început de drum, ci au în spate mulţi ani de activitate. Conferinţa se desfăşoară sub auspiciile International Federation of Clinical Chemistry IFCC şi European Federation of Laboratory Medicine EFLM, precum şi sub egida Universităţilor de Medicină şi Farmacie din Cluj Napoca, Târgu Mureş, Bucureşti, Iaşi şi Timişoara, şi în parteneriat cu Societatea Română de Microbiologie şi Societatea Română de Hematologie.

Invitaţii internaţionali care ne onorează în acest an sunt Prof. TOMÁŠ ZIMA Institute of Medical Biochemistry and Laboratory Diagnostics, 1st Faculty of Medicine, Charles University and General University Hospital, Prague, Czech Republic, Janet Smith, Chair of the IFCC Education and Management Division (EMD), László MUSZBEK University of Debrecen, Division of Clinical Laboratory Science, Department of Laboratory Medicine, Debrecen, Hungary, Éva AJZNER on behalf of the Task and Finish Group on Critical Results of the European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine and the Australasian Association of Clinical Biochemistry, William W. Au, Ph.D., Professor and Chairman Shantou University Medical College, Shantou, China.

Specialiştii în medicina de laborator au o contribuţie decisivă (până la 70%) în luarea deciziilor medicale. Cum vedeţi, în acest context, rolul pregătirii permanente a medicului de laborator?

Ca în orice specialitate medicală, este esenţial pentru specialiştii din laborator

să se informeze permanent. Pregătirea noastră, ca şi a colegilor din alte specialităţi se face prin participarea la cursuri postuniversitare şi prin studiu individual.

Desigur că ritmul accelerat de acumulare a informaţiilor nu ne permite să cuprindem toate domeniile medicinei de laborator, care este o specialitate extrem de vastă, astfel încât fiecare din noi ne documentăm în sectorul nostru de interes.

Accesul la informaţie este mult facilitat de posibilitatea de învăţare la distanţă (seminarii şi workshopuri online, forumuri de discuţii, site-uri de e-learning).

Ce progrese s-au înregistrat în domeniul testelor de laborator? Testele specifice se fac acum în România la nivelul ultimelor noutăţi pe plan mondial?

Miniaturizarea (nanotehnologiile, utilizarea de biosenzori), automatizarea completă, cuplate cu progresele în domeniul IT au dus la o dezvoltare spectaculoasă în testarea de laborator. Efectuarea simultană a mai multor biomarkeri (paneluri de

www.revistamedicalmarket.ro

Interviu analiţi), testarea în sistem Point-of-Care (aplicată inclusiv la auto-monitorizarea pacienţilor) sunt utilizate pe scară largă, inclusiv la noi în ţară.

Ca perspectivă, se profilează tendinţa unei medicini personalizate, în care decizia medicală va fi ghidată de profilul particular al pacientului, ceea ce va permite identificarea precoce a unor factori de risc şi aplicarea unei terapii individualizate, ţintite. La atingerea acestui deziderat contribuie dezvoltarea tehnicilor de genomică, proteomică, metabolomică, microbiomică, farmacogenomică, analiza epigenetică. Şi în România, ca şi în alte ţări, există laboratoare care efectuează testele de laborator uzuale, precum şi laboratoare profilate pe testări înalt specializate (testare genetică, fertilizare in vitro, imunologia transplantului). Gradul de complexitate al analizelor efectuate şi suportul material care permite aceste testări depinde de profilul şi statutul/afilierea fiecărui laborator în parte (spital, institut de cercetări) şi depinde, evident, şi de factori economici.

Care sunt provocările medicului de laborator în condiţiile actuale, de subfinanţare a sistemului sanitar românesc? Sunt atinse standardele de calitate pentru munca de laborator?

Cred că provocările medicului de laborator sunt similare cu ale medicilor din celelalte specialităţi, fiind legate de constrângerile economice, din cauza cărora uneori puterea de decizie este transferată de la profesionistul din laborator la managerul economic, precum şi de disfuncţionalităţile din circuitul adminstrativ-birocratic. În privinţa standardelor de calitate, aşa cum am menţionat şi mai înainte, acestea sunt obligatorii, existând o preocupare permanentă pentru managementul calităţii.

Vă rugăm să ne spuneţi care sunt metodele de stimulare şi susţinere a tinerilor medici ai acestei specialităţi?

Aveţi stabilite anumite programe în acest sens?

Sprijinirea colegilor tineri a fost şi rămâne una din priorităţile noastre. Pentru colegii care activează în mediul universitar conferinţele şi congresele sunt o bună ocazie de a-şi prezenta şi supune discuţiilor colegiale rezultatele cercetărilor, iar revista

asociaţiei nostre, Revista Română de Medicină de Laborator le oferă cadrul publicării lor. Ca şi la manifestările ştiinţifice precedente, se vor acorda două premii, premiul „Marcela Zamfirescu-Gheorghiu” pentru cea mai bună prezentare poster şi Premiul „Academician Prof. Dr. Eugen Mody” pentru activitatea profesional-ştiinţifică. De asemenea, încercăm să susţinem financiar colegii rezidenţi prin menţinerea unor taxe mai mici de participare la conferinţe/ congrese, precum şi o cotizaţie de membru AMLR mai mică decât a specialiştilor.

AMLR este o asociaţie nouă, la început de drum. Vă rugăm să ne dezvăluiţi care este strategia AMLR pentru acest an şi câte dintre proiectele propuse anul trecut s-au materializat.

După cum precizam anterior, AMLR nu este de fapt o asociaţie nouă. Crearea unei asociaţii profesionale unice a reprezentat un avantaj din punct de vedere al organizării şi a unei credibilităţi profesionale sporite, demersul nostru fiind apreciat de către EFLM şi IFCC. Un deziderat important pe care îl avem în vedere este strângerea legăturilor cu societăţile profesionale clinice. Deşi deţine o pondere substanţială în decizia medicală, medicina de laborator evoluează adesea într-un con de umbră şi nu se bucură întotdeauna de recunoaşterea pe care o merită. Printr-o prezenţă mai activă şi o comunicare mai eficientă cu societăţile profesionale din specialităţi clinice dorim să contribuim la sporirea eficienţei clinice în ansamblul actului medical.

Medicină de laborator 5

Articole de specialitate

Proteina de legare a acizilor graşi, fracţia cardiacă (H-FABP) – biomarker cu potenţial în diagnosticul şi prognosticul afecţiunilor cardiovasculare Proteinele de legare a acizilor graşi (FABP) sunt proteine citoplasmatice mici, exprimate abundent în țesuturile cu un metabolism activ al acizilor graşi, cum ar fi inima și ficatul (Viswanathan et al 2012), funcția lor principală fiind facilitarea transportului intracellular al acizilor graşi cu catenă lungă. Au fost identificate nouă tipuri distincte din familia FABP, cu tipul cardiac (H-FABP) fiind cel mai mult studiat, în mare parte datorită faptului că acesta se găsește din abundență în cardiomiocite. Greutatea moleculară a H-FABP este de numai 15 kDa, mai mică decât mioglobina (18kDa), Troponina I (22 kDa), troponina T (37 DKA) și CK-MB (86 kDa). H-FABP este specific miocardului, de aproximativ 15-20 de ori mai specific decât mioglobina.

Biochimist principal Şchiriac Elena-Corina1, Biolog principal Gabriela Dana Horoşanu (Pavel)1,2 1. „Investigații Medicale Praxis“, Iași 1,2. Institutul de Boli Cardiovasculare „Prof. Dr. George I.M. Georgescu“, Iaşi

D

eterminarile de H-FABP prezintă utilitate clinică în diagnosticul şi prognosticul sindromului coronarian acut (SCA) precum şi al altor afecţiuni cum ar fi embolia pulmonară, intervenţii chirurgicale de by-pass coronarian, afecţiuni cerebrovasculare (accident vascular cerebral ischemic).

Cinetica de eliberare a H-FABP şi rolul de biomarker în infarctul miocardic acut Datorită faptului că au greutate moleculară mică și localizare citoplasmatică, proteinele H-FABP sunt eliberate foarte rapid după infarct miocardic acut (IMA).

H-FABP (proteina de legare a acizilor graşi, fracţia cardiacă) este un biomarker de ischemie miocardică, detectabil încă din primele 30 de minute de la debutul durerii toracice și poate facilita gestionarea mai devreme a pacienților cu suspiciune de SCA (sindrom coronarian acut), alături de Troponină.

Concentrația H-FABP atinge în mod tipic un varf, la aproximativ 6-8 ore de la debutul simptomelor și revine la normal în termen de 24-30 ore. Cu toate că H-FABP are o cinetică de eliberare similară cu

6

mioglobina (eliberare rapidă și clearance), este de aproximativ 15-20 de ori mai specific muşchiului cardiac, prin urmare este un biomarker mult mai eficace pentru leziunile miocardului. De asemenea, valorile normale în ser sau plasmă ale H-FABP sunt mult mai mici decât ale mioglobinei, ceea ce reduce potențialul de rezultate fals positive. Un beneficiu secundar al cineticii de eliberare a H-FABP după IMA este acela că, deoarece revine la valoarea inițială de concentrație rapid (adică de obicei 20-24 ore), poate fi folosit ca un biomarker pentru reinfarctizare în zilele de după un IMA inițial. Aceasta a fost utilitatea uzuală a CK-MB din punct de vedere istoric, datorită clearance-ul său mai rapid decât al troponinei (3-4 zile vs 10-14 zile), însă H-FABP oferă utilitate potențială începând cu a doua zi.

Valoarea de diagnostic în ACS (sindrom coronarian acut) Mecanismul de eliberare timpurie a H-FABP după ischemie miocardică (30 de minute), adaugă la semnificaţia clinică a acestui biomarker, un rol extrem de eficient în diagnosticul și tratamentul pacienților cu suspiciune de sindrom coronarian acut (SCA), mai ales atunci când este utilizat în asociere cu troponina (TnT sau TNI). Dupa unii autori (Pelsers MM et.al., 2005), H-FABP s-a dovedit a oferi performanţe de diagnostic superioare, comparativ cu o serie de noi biomarkeri în cadrul SCA, pentru care s-au efectuat determinări imediat dupa internare, apoi la intervale de 3 si 6 ore (analiza ROC, figura de mai jos).

www.revistamedicalmarket.ro

Str. Mircea Bădescu nr. 22, sector 3, Bucureşti

TESTE RAPIDE Imunocromatografie INFECŢIOASE Test rapid-HBs Ag Test rapid-Anticorpi anti-HCV Test rapid-HIV1/2 Test rapid-Antigen HBe Test rapid-Anticorpi HBe Test rapid-Antigen Helicobacter Pylori din scaun Test rapid-Anticorp Helicobacter Pylori din ser/ plasma/sange Test rapid Syphilis Test rapid-hemoragii oculte/materii fecale Test rapid-Antigen Chlamydia din urina Test rapid-HAV IgM MARKERI TUMORALI Test rapid –markeri tumorali PSA Test rapid-Alfafetoproteina,AFP Test rapid-Antigen Carcinoembrionar,CEA MARKERI CARDIACI Test rapid Troponina I

TESTE RAPIDE LATEX Serologie CRP ASLO RF RPR CARBON TPHA-detectie serologica sifilis Waaler Rose SLE

TRUSE ELISA HORMONI TIROIDIENI TSH T3 T4 FT4 FT3 TIROIDĂ AUTOIMUNĂ ATPO Anti Tiroglobulină HORMONI FERTILITATE FSH LH PROLACTINA PROGESTERON ESTRADIOL TESTOSTERON DHEA-S INFECŢIOASE HbsAg ELISA HbsAb Anti-HBc ELISA HCv ELISA HBeAc (anti-HBeElisa) HBeAg anti-HBc

Anti-Hbe Anti-HBs cantitativ HDV IgM HDV IgG HDV Ag HEV Ag HEV Ab HEV IgM HEV IgG HIV 1 +2 with CE HP pylori Antigen HP pylori IgG HP pylori IgM

Sistem automat de electroforeză - SAIO Datorită flexibilităţii sale, este soluţia ideală pentru laboratoare cu nivel mediu şi mare de probe. Este un sistem complet automatizat, uşor de utilizat cu un design special dedicat laboratoarelor medicale, ocupă un spaţiu redus şi are computer inclus.

Truse electroforeză Trusă electroforeză proteine serice pe gel de agaroză Trusă electroforeză proteine serice pe acetat de celuloză pentru analizor automat SAIO

Sifilis CITOMEGALOVIRUS-IgG TOXOPLASMA GONDII- IgM TOXOPLASMA GONDII IgG CITOMEGALOVIRUS-IgM MARKERI TUMORALI AFP CEA PSA FREE PSA ALERGIE ŞI ANEMIE IgE FERITINA

Articole de specialitate cazul pacienților normotensivi cu diagnosticul de PE cu grad de risc scăzut sau mediu (Dellas C, et al., 2010).

Utilitatea biomarkerului în bypass de arteră coronariană (CABG)

Valoarea de prognostic în SCA În plus față de valoarea de diagnostic timpuriu în ASC, s-a demonstrat că determinarea H-FABP poate oferi o contribuţie semnificativă în prognoza pe termen lung a acestor pacienți, comparabil cu testele de troponină de sensibilitate ridicată (Kilcullen N et. al., 2007). În cadrul studiilor în care H-FABP, troponina I și BNP au fost evaluate simultan, H-FABP a furnizat informații elementare pentru stratificarea riscului, indiferent de valoarea iniţială a troponinei sau a BNP (brain natriuretic peptide).

Utilitate în stratificarea riscului în embolia pulmonară acută Embolia pulmonara (PE) este o urgență cardiovasculară relativ frecventă și o cauză majoră a mortalității și morbidității în populația generală.

Ghidurile internaționale recomandă ca pacienții ce prezintă embolie pulmonară acută să fie clasificaţi în grupuri cu „grad ridicat de risc” și grupuri „fara risc ridicat”, grupurile având „risc ridicat” fiind cele cu instabilitate hemodinamică și care necesită tromboliza imediată sau îndepărtare mecanică a trombului. Strategia de tratament pentru grupul de pacienţi cu embolie pulmonară „fără risc ridicat” este mai puțin clară și prin urmare stratificarea riscului acestui grup, aparent mai stabil, reprezintă o reală provocare sub aspect clinic. O serie de publicații recente au demonstrat că H-FABP poate ajuta la stratificarea riscului, nu doar pentru pacienţii hipotensivi din grupul PE cu risc ridicat, dar şi în

8

IMA perioperator apare la aproximativ 7-15% dintre pacienţii cu intervenţii chirurgicale cardiace şi este asociat cu o durată crescută de spitalizare şi reducerea atât pe termen scurt cât și pe termen lung a ratei de supravieţuire a pacienţilor. Cu toate acestea, diagnosticul de IMA perioperator poate fi o provocare din cauza valorilor predominant crescute ale biomarkerilor cardiaci traditionali, cum sunt troponina şi CK-MB, chiar și în chirurgia fără complicații. Datorită mecanismului său de eliberare timpurie, H-FABP s-a demonstrat a fi un predictor independent al disfuncție ventriculare și mortalitatii post-operatorii, superior atât Troponinei cât şi CK-MB (Muehlschlegel JD et. al., 2010).

Eliberarea mai lentă a CK-MB şi cTnI generează incapacitatea de a face o discriminare între eşec de grefă cu necroză tisulară masivă și leziuni ischemice de reperfuzie în termen de 24 de ore după chirurgia de bypass aorto-coronarian (CABG).

Adecvarea la scop a metodei de determinare a H-FABP Metoda imunoturbidimetrică validată de către Randox Laboratories, UK pentru măsurarea cantitativă a concentraţiei de H-FABP în ser, plasmă şi LCR este un test

de laborator clinic, care poate fi folosit cu ușurință pe o gamă largă de analizoare de biochimie. Domeniul de masurare al metodei este cuprins în intervalul 0.747 – 120 ng/ml, cu un coeficient de variaţie (CV%) < 6.85% şi deviatia standard (SD) = 0.38 ng/ml, pentru o valoare medie de 5.47 ng/ ml. Valorile mai mari de 6.48 ng/ml pot identifica pacienții cu risc foarte ridicat de evenimente adverse. Printre pacienţii cu Troponina negativă, pe baza valorilor H-FABP mai mari de 6.48 ng/ml, pot fi identificaţi cei care prezintă risc crescut de evenimente adverse, independent de vârsta pacienţilor și de valoarea creatininei serice (Viswanathan K et.al., 2010).

Bibliografie 1. Dellas C, Puls M, Lankeit M, Schäfer K, Cuny M, Berner M, Hasenfuss G, Konstantinides S. Elevated heart-type fatty acid-binding protein levels on admission predict an adverse outcome in normotensive patients with acute pulmonary embolism. J Am Coll Cardiol.

2010 May 11;55(19):2150-7.

2. Keller T, Zeller T, Ojeda F, Tzikas S, Lillpopp L, Sinning C, Wild P, GenthZotz S, Warnholtz A, Giannitsis E, Möckel M, Bickel C, Peetz D, Lackner K, Baldus S, Münzel T, Blankenberg S. Serial changes in highly sensitive troponin I assay and early diagnosis of myocardial infarction. JAMA. 2011 Dec 28;306(24):2684-93 3. Kilcullen N, Viswanathan K, Das R, Morrell C, Farrin A, Barth JH, Hall AS; EMMACE-2 Investigators.

Heart-type fatty acid binding protein predicts long-term mortality after acute coronary syndrome and identifies high-risk patients across the range of troponin values. J. Am. Coll.

Cardiol. 2007;50(21):2061-7 4. Muehlschlegel JD, Perry TE, Liu KY, Fox AA, Collard CD, Shernan SK, Body SC. Heart-type fatty acid binding protein is an independent predictor of death and ventricular dysfunction after coronary artery bypass graft surgery. Anesth Analg.2010; 111(5):1101-9.

5. Pelsers MM, Hermens WT, Glatz JF. Fatty acid-binding proteins as plasma markers of tissue injury. Clin. Chem.

Acta.2005;352(1-2):15-35.

www.revistamedicalmarket.ro

BIVARIA GRUP Sediu central: Str. Eroilor, Nr. 2 D, 331078 Hunedoara

Sediu secundar: Drumul Ghindari nr.58/62, Bucuresti, Sector 5 Tel/Fax: 0254 740 680; 0254 713 216; Mob: 0744 330 888 Email: bivaria@yahoo.com; Site: www.bivaria.ro

ECHIPAMENTE MEDICALE – BIVARIA GRUP 2016 Distribuitor exclusiv

ANALIZOR AUTOMAT DE BIOCHIMIE BS 600 PRODUCĂTOR MINDRAY Destinat laboratoarelor clinice de mărime medie – mare 600 teste/oră fără modul ISE, până la 225 teste/oră pentru modulul ISE 90 poziţii pentru probe şi 80 poziţii pentru reactivi Sistem complet automatizat, deschis, pentru reactivi de chimie umedă, random access Efectuează toată gama de analize biochimice, turbidimetrie, abuz de droguri Volum scăzut de reactivi şi apă distilată

Analizor Automat de hematologie 5 Diff cu citire laser flowcitometrie Se adresează Spitalelor de Pediatrie, Spitalelor de Urgenţă şi laboratoarelor clinice medii Generează un raport de 32 parametri + CRP şi 3 histograme Viteza de lucru 60 teste/oră Detecţie CRP de la 0,2 – 320 mg/l

Distribuitor exclusiv

ANALIZOR AUTOMAT HEMATOLOGIE MODEL BC 5390CRP 5 DIFF + CRP - PRODUCĂTOR MINDRAY

Probă utilizată : sânge integral, prediluat şi capilar Soft prietenos, consum probă doar 20µl

ANALIZOR AUTOMAT DE IMUNOLOGIE MAGLUMI 800 PRODUCĂTOR SNIBE Analizor automat de chemiluminiscenţă 180 teste/oră Posibilitate de lucru pacient cu pacient (random), pe tipuri de teste (batch) 9 poziţii pentru reactivi şi 40 poziţii pentru pacienţi Identificare RFID pentru reactivi Kit integrat gata de lucru, nu necesită nici o preparare

ANALIZOR AUTOMAT DE COAGULARE SOLEA 100 BIOLABO FRANŢA Analizor automat de coagulare 100 teste/oră Posibilitate de lucru pacient cu pacient (random), pe tipuri de teste (batch) 16 poziţii pentru reactivi şi 4 pentru controale de calitate 32 poziţii pentru probe şi 4 pentru calibratori Încărcarea automată a cuvetelor 8 canale de citire Tehnologie unică de incubare

Articole de specialitate

Tehnologii moderne în imunohematologie La peste 114 ani de la descoperirea grupelor sanguine de către Dr. Karl Landstener, accidentele transfuzionale, prin eroare de grupaj ABO, sunt încă o realitate. Din acest motiv, căutarea continuă de noi şi noi modalităţi pentru evitarea erorilor de grupaj sanguin în reţelele de transfuzie, constituie o preocupare continuă pentru lumea ştiinţifică şi marile corporaţii producătoare de echipamente.

Dr. Georgeta Hanganu Medic Director Centrul de Transfuzie Prahova

D

atorită importanţei determinărilor grupei sanguine, a Rh-ului, şi a altor teste de imunohematologie în centrele de transfuzie,

10

datorită numărului tot mai mare de probe care trebuie efectuate cu o foarte mare corectitudine, datorită tendinţei de concentrare a laboratoarelor mici, în platforme tehnologice mari, care să fie capabile să preia o cantitate tot mai mare de probe şi să le proceseze într-un timp tot mai scurt, pentru a putea să valideze şi să elibereze un număr tot mai mare de pungi de sânge, în timp tot mai scurt, a apărut necesitatea automatizarii

în laboratoarele de imunohematologie.

Automatele de imunohematologie sunt maşini profesionale folosite pentru diagnosticul in vitro, care sunt utilizate în Centrele de Transfuzie şi în Platformele tehnice din sistemul transfuzional.

Automatul de imunohematologie efectuează: grupajul sanguin, fenotipul Rh Kell, screeningul de anticorpi iregulari şi identificarea anticorpilor, Testul Coombs indirect, Testul Coombs direct, probele de compatibilitate pentru pacienţi.

Una dintre cele mai moderne tehnologii în imunohematologie implementată într-un sistem automat, este bazată pe magnetizarea globulelor roşii.

Această magnetizare înlocuieşte etapa centrifugării, cea mai comună şi laborioasă etapă în mai toate tehnicile şi metodele de lucru din imunohematologie.

Eritrocitele magnetizate ale pacienţilor, donatorilor, gravidelor, sau eritrocitele din panel, reacţionează cu anticorpii corespunzători. Odată plasate în câmpul magnetic, eritrocitele magnetizate, migrează la baza godeului, adunându-se într-un buton. Echipamentul automat citeşte prezenţa sau absenţa butonului eritrocitar, fiind programat să interpreteze grupajul sanguin, fenotipul Rh Kell, screeningul,

www.revistamedicalmarket.ro

•• Gama completă de analizoare pentru dotarea laboratorului clinic

Analizor automat de biochimie, turbidimetrie şi modul ISE Na+, K+, Cl-, Li+

•• Reactivi de diagnostic şi teste rapide •• Sisteme de recoltare •• Consumabile şi accesorii

Analizor automat de hematologie 3 DIFF_HA3

Analizor automat de imunologie ELISA_AP22 ELITE

Articole de specialitate sau identificarea anticorpilor, Testul Coombs direct sau indirect, probele de compatibilitate, în funcţie de prezenţa sau absenţa butonului eritrocitar.

Se utilizează probe de pacienţi, gravide sau de donatori, recoltate în tuburi cu anticoagulant, centrifugate inainte de lucrul propriu zis, care sunt în mod obligatoriu etichetate cu etichete având cod de bare, al căror număr îl citeşte echipamentul, înainte de a începe pipetarea probelor şi a reactivilor.

Automatul este încărcat cu plăcile cu godeuri care conţin reactivi specifici testelor care se doresc a fi lucrate, cu alţi reactivi necesari, şi apoi automatul este programat de operator să efectueze testele dorite. După pipetare şi incubare, urmează perioada de acţiune a eritrocitelor magnetizate, şi apoi citirea reacţiilor. Echipamentul transmite rezultatele într-un sistem informatic al laboratorului sau în sistemele informatice ale centrelor de transfuzie, sau a platformelor tehnice, care atribuie rezultatele obţinute, pungilor de sânge.

Pentru asigurarea calităţii şi securităţii transfuzionale, echipamentul utilizează toate controalele obligatorii în testele clasice şi martorii necesari validării reacţiilor de grupaj sanguin, fenotip Rh Kell, screeningului de anticorpi, Testului Coombs indirect, Testului Coombs direct, probelor de compatibilitate.

Aportul manual, direct al tehnicianului care operează, este realizat doar la începutul procedurii, la încărcarea echipamentului cu probe şi reactivi, apoi efectuarea operaţiilor se face doar prin comandă pe computer. Tehnicianul vizualizează rezultatele şi efectuează o validare a lor comandată prin computer.

Lipsa intervenţiei directe a tehnicia-

12

nului în efectuarea propriu-zisă a tehnicii, scoate din calcul posibilitatea, şansa erorii umane şi subiectivismul interpretării de către tehnician a reacţiilor. Transmiterea rezultatelor direct în sistemul informatic al centrului de transfuzie, sau a platformei tehnice, face ca să fie ocolite posibilele erori de înscriere a rezultatelor.

Un exemplu sugestiv este în imaginea următoare: Plăcuţa de grupaj sanguin prin metoda Beth Vincent în şirurile de godeurri 1, 2, 3, Rh D,

în şirul de godeuri 5, fenotipare Rh Kell în şirurile de godeuri 5,6,7,8, 9, control Rh în şirul de godeuri 10, şi grupaj sanguin prin metoda Simonin, doar cu hematii A şi B, în şirul de godeuri 11 şi 12. Într-o plăcuţă de 96 godeuri se efectuează 8 determinări de grup ABO şi fenotip Rh, Kell.

Dacă acum 114 ani se făceau primii paşi în dezvoltarea imunohematologiei, astăzi, pentru creşterea securităţii transfuzionale, automatizarea face paşi uriaşi în toate domeniile medicale, chiar şi acolo unde metodele clasice păreau de neînlocuit.

www.revistamedicalmarket.ro

A&P Italian Pharmaceuticals S.r.l Calea Rahovei 266-268, Sector 5 Bucuresti Romania Electromagnetica Business Center, Corp 61, Et.3,camera 11 Tel. +40 021.423.05.97 • www.aepfarma.ro

Schebo Pancratic Elastase 1Quick Test din fecale pentru testarea non-invasiva a functiei pancreasului exocrin

CALFAST- Teste pentru determinarea cantitativă a calprotectinei din fecale CALPREST-Teste Elisa pentru determinarea cantitativă a calprotectinei din fecale Xeliac-test simplu şi rapid pentru boala celiacă Xeligen RT-cea mai avansată soluţie pentru identificarea predispoziţiei HLA de a dezvolta boala celiacă Diagnosticul molecular al Polyomavirus Diabegen-Test genetic pentru determinarea riscului şi prevenţia Diabetului zaharat de tip I

Gama de produse de diagnosticare a Biohit include examenele GastroPanel®, care sunt folosite pentru a ajuta la diagnosticul infecției cu Helicobacter pylori şi gastritei dintr-o probă de sânge. Ele sunt instrumentele ideale pentru identificarea pacienților cu risc crescut de cancer gastric, ulcerul peptic, boala de reflux gastroesofagian (GERD) şi deficienţele de vitamina B12, calciu și fier.

Biohit oferă teste rapide pentru detectarea: • Intoleranței la lactoză • infecției cu Helicobacter pylori • Bolii celiace • Screening-ul cancerului colorectal

▶▶ Prevent ID CRP1/3- used for primary prevention in cardiovascular risk patients ▶▶ PreventIDTroponin I- human cardiac troponin I ▶▶ Prevent ID D-Dimer – immunochromatography test fo r the quatitative determination of D-Dimer ▶▶ Prevent ID Micro-Albumin ▶▶ Prevent ID- TSH ▶▶ Prevent Vital-D ▶▶ Rheumachec –specific rapid test for the diagnosis of rheumatoid arthritis ▶▶ Prevent ID CalDetect- semiquatitative immunological rapid test for the determination of faecal calprotectin. ▶▶ Prevent ID CalDetect50/120- immunological rapid test for the determination of faecal calprotectin. ▶▶ Prevent ID Cal Screen - immunological rapid test for the determination of faecal calprotectin. ▶▶ PreventID CC-test for the specific detection of human hemoglobin in faeces ▶▶ PreventID Haemo/Hapt Occult- simple one step qualitative immunological reapid test for the detection of human occult blood in faeces. ▶▶ PreventID H. Pylori ▶▶ PreventID H. Pylori Antigen-quantitative immunological assay for the determination of H. Pylori antigen in faeces ▶▶ PreventID Bladder: immunological rapid test which detrmines in one step the bladder cancer marker factor H

Schebo 2 in 1 Quick M2Pk+Hb Test rapid combinat (din fecale) pentru screeningul cancerului colorectal (test de scaun)

Schebo M2-Pk Quick test (din fecale) pentru screeningul cancerului colorectal

CONTACT: Dr. Răzvan Neagoe Tel: 0721 202.519 mail: dr.razvanneagoe@aepfarma.ro

Articole de specialitate

Anticorpii anti β-2 GP I D I – biomarker asociat în tromboze Pavel Gabriela Dana1,2, Hărmănescu Elena-Andreea , 1

Şchiriac Elena Corina1 1 - S.C. Investigaţii Medicale Praxis S.R.L., Iaşi 2 - Institutul de Boli Cardiovasculare “Prof. Dr. George I.M. Georgescu”, Iaşi β-2 GP I -glicoproteina plasmatică care circulă ca monomer; liberă în plasma, prezintă două conformații: forma închisă - circulară și forma deschisă.

Figura 1: Structura cristalină a β-2 GP I formă de “cârlig de pescuit” (Bouma şi col., 1990 ; Schwarzenbacher ș.a., 1990)

Matsuura şi colab. au demonstrat că β-2 GP I leagă aCL la pacienţii cu APS. Mecanismele exacte prin care APL produc diferite manifestări clinice - > tromboză nu sunt pe deplin elucidate; au fost propuse mai multe mecanisme potenţiale: •• APL provoacă activarea endoteliului •• APL interferă cu funcţia proteinelor anticuagulante PC sau Anexina V, intensificând activitatea procoagulantă. β-2 GP I – in vitro -> se leagă de fosfolipide încărcate negativ (cardiolipina şi fosfatidilserina). β-2 GP I - în prezenţa APL -> creşte absorbţia LDL (oxidat de macrofage) -> formarea plăcii aterosclerotice. β-2 GP I - este principalul antigen important în fiziopatologia APS. In anul 1990 - s-a constatat că este necesar un cofactor (antoantigen) pentru ca aCL să se lege de cardiolipin şi anume β-2 GP I. Când apar ac. anti β-2 GP I -> funcţiile β-2 GP I sunt depreciate, ceea ce explică hipercoagulabilitatea în APS. Ac. anti β-2 GP I – sunt găsiţi la 4090% din pacienţii cu APS

Sindromul antifosfolipidic În anul 1980 - descris pentru prima dată.

S-a demonstrat că ac. pentru fosfolipide sunt principalii agenţi responsabili de boală -> provenienţa numelui. În anul 1999 – primele criterii de consens. În anul 2006 – criterii internaţonale de diagnostic Sapporo -> actualizate la Sydney 2012.

APL – evaluaţi pentru APS: •• cu teste “în fază solidă” - ac. anti β-2 GP I şi aCL •• cu teste şi “în fază lichidă” – AL Importanţa clinică a APS: afecţiuni în care caracteristicile clinice (tromboză vasculară, pierderi fetale recurente, trombocitopenii) apar în asociere cu prezenţa APL în sânge. În prezent -> una din cele mai frecvente cauze de hipercoagulare dobândită în populaţie.

Deşi anticorpii sunt diferţi, manifestările clinice asociate sunt aceleaşi.

Figura 2: Mecanismul de legare a anticorpilor anti fosfolipidici de β-2 GP I

În anul 1990 – s-a descoperit la unii pacienţi testaţi pentru aCL ELISA, diagnosticaţi cu APS că aveau anticorpi care reacţionau cu o proteină componentă a sistemului de testare. anti β-2 GP I - artefact? β-2 GP I – funcţie fiziologică incertă - importantă pentru APS având activitate anticoagulantă.

14

www.revistamedicalmarket.ro

PCHEM 3 este un analizor complet automatizat pentru chimie clinică, destinat laboratoarelor medii şi mari, cu o viteză de 300/500 de teste pe oră.

Adaltis oferă pentru sistemul Pchem 3 o gamă completă de reactivi pentru efectuarea rapidă a testelor de rutină. Modulul ISE, disponibil opţional, asigură o viteză globală de 500 de teste pe oră.

Preţul este de 75.000 ron cu TVA inclus.

PLAB CLIA / ELISA - Adaltis, Italia Sistem automat 2 plăci tehnologie CLIA şi EIA în paralel Rulare 4 teste diferite în paralel 192 teste/oră Puncte CNAS: 185,2 PUNCTE (50 + 115,2 + 20) Sisteme noi producţie 2016

Control intern pe toţi parametrii Control extern pe 103 parametri din lista de rambursare CNAS, producători BGMS şi HematRom – 5324 RON cu TVA - 4 sesiuni /an Preţ sistem în regim închiriere 3500 RON cu

Kituri EIA şi CLIA la preţuri foarte avantajoase: HIV Ab/Ag GEN 4 EIA – 192 teste = 585 RON cu TVA inclus = 3 RON/test TSH – Format EIA – 96 teste = 368 RON cu TVA inclus = 3,8 RON/test Discount suplimentar în funcţie de cantităţi!

TVA/lună Fără consum impus Preţ vânzare directă – 122.000 RON TVA inclus Garanţie extinsă 4 ani (se achită numai kiturile de mentenanţă)!

OFERTĂ SPECIALĂ!!!!!

Valabilă numai până la 30.06.2016 ECLECTICA TICA este un analizor imunologic (metoda IEMA-EIA) ce răspunde necesităţilor laboratorului dumneavoastră într-un format compact şi complet automatizat.

Tehnologia utilizată se bazează pe particule imunomagnetice marcate cu fluoresceină (FITC).

Meniul de teste (29) include

majoritatea testelor de rutină, kit-urile având împachetări de minim 2x50 de teste.

Sistem special automat: - 50 de puncte CAS - viteza de lucru de 48 teste/oră- 28,8 puncte CAS Total: 78,8 puncte CAS Preţuri competitive: Free T4 2x50 teste: 243 Ron cu TVA inclus; Alpha-Feto Proteina: 260 Ron cu TVA inclus.

Garanţie extinsă de 4 ani

Proton Impex 2000 SRL - 63, Trilului str., 030401 Bucharest; Tel/Fax:+40-799-763-670; +40-21-224 5281; +40-31-425 0893 E-mail: secretariat@proton.com.ro; Website: www.proton.com.ro

(în condiţiile achiziţionării kitului de mentenanţă anuală).

Preţ special: 65,000.00 Ron cu TVA inclus 55,000.00 Ron cu TVA inclus Condiții de plată: 13,000.00 Ron avans 3,500.00 Ron lunar, timp de 12 luni Livrare din stoc sau în maxim 30 de zile de la plată avans.

Stoc actual: 4 bucăţi.

Articole de specialitate

Figura 3: Epitopii de pe domenii de pe domeniile I- IV devin expuşi după interacţiunea D V cu o suprafaţă de fosfolipide (cardiolipina)

Din experienţa clinică: •• anticorpii LA se asociază mai mult cu trombozele venoase •• anticorpii aCL cu tromboze arteriale.

Există multe rapoarte în care manifestările clinice pot avea loc fără detectarea anticorpilor (APS negative/ APS probabil). În această situaţie opţiunile de tratament sunt controversate, nu există un consens. În prezent măsurarea ac. anti β-2 GP I este recomandat ca un test definit de diagnostic pentru APS. Criteriile de consens necesită persistenţa anomaliilor de laborator timp de cel puţin 12 saptamani.

•• se consideră pozitive aCL doar dacă depăşesc 40 unit GPL/MPL Clasele de anticorpi determină riscul: clasa IgG se corelează mai bine cu antecedente de tromboză decât IgM. Iniţial a fost luată în considerare asocierea pozitivării unui singur tip de anticorp (aCL/AL/anti β-2 GP I) cu tromboză / patologia de sarcină.

Ulterior evenimentele tromboembolice asociate -> clasificarea profilului de laborator pentru ca pacienţii sa fie clasificaţi în conformitate cu pozitivarea unuia sau mai multor teste APL. •• implică faptul că toate cele 3 teste vor fi efectuate şi confirmate după 12 săptămâni.

Anticorpii aCL : •• dependenţi de β-2 GP I -> corelaţi cu tromboza •• independenţi de β-2 GP I -> corelaţi cu boli infecţioase

16

Trusele Elisa pentru detectare anticorpi aCL trebuie să conţină β-2 GP I; cele care nu includ, detectează doar anticorpi aCL independenţi, iar cele care includ β-2 GP I, surprind anticorpii aCL–dependenti, dar şi ac. anti β-2 GP I Sunt teste sensibile, dar nu specifice -> pot fi detectaţi şi în alte boli autoimmune, însa prezenţa în plasma unui pacient semnifică un risc ridicat pentru evenimente trombotice.

Performanţa de bază a testelor pentru APL (ELISA) este determinată de diverşi factori: •• tipul de microplăci •• sursa de cardiolipin •• provenienţa adaosurilor de seruri: bovine/ umane •• sursa de calibratori (umani?) -> rezultate comparabile între laboratoare •• alegerea unui cut-off optim În prezent, testele APL nu îndeplinesc complet aceste criterii (neajunsuri metodologice). În criteriile actualizate (Miyakis şi colab. 2006) au considerat positive ACL doar dacă depăşesc 40 Unit GPL/MPL. Noi criterii actualizate pentru diagnosticul de laborator în APS ar trebui propuse şi anume: pentru subiecţii cu triplă pozitivitate să nu mai fie nevoie de confirmare la 12 săptămâni.

Se fac studii prin diferite abordări pentru ac. anti β-2 GP I în direcţia de risc de stratificare – risc predictiv pentru tromboze -> pentru luarea de decizii în ceea ce priveşte abordarea terapeutică.

•• Care sunt diferenţele între diferite tipuri de anticorpi?

•• Care este cel mai relevant?

Prevalenţa crescută în populaţia generală a persoanelor cu tromboze cât şi un număr semnificativ de personae cu test pozitiv pentru ac. anti β-2 GP I care nu dezvoltă tromboze -> s-a emis ipoteza că numai o anumită populaţie de ac. anti β-2 GP I se asociază cu episoade trombotice .

Perspective recente: •• În ultimul deceniu -> acumulat dovezi care sugerează prezenţa unui epitop dominant -> primul domeniu β-2 GP I (D I).

•• Mai multe studii au arătat că o anumită populaţie de anticorpi recunoaşte acest epitop criptic pe D I. •• Spre deosebire de alţi anticorpi care recunosc alte domenii de β-2 GP I, anti D I se asociază cu simptome critice.

Studii: ac. anti β-2 GP I - D I găsiţi asociaţi cu tromboze venoase la pacienţii cu APS - sensibilitate 85 % şi 99, 5% specificitate •• s-a dedus utilitatea determinării ac. anti β-2 GP I – D I

Concluzii •• ac. anti β-2 GP I – D I este un criteriu în plus faţă de criteriile serologice actuale •• ac. anti β-2 GP I – D I reprezintă un biomarker promiţător pentru evaluarea diagnosticului şi riscul pacienţilor cu APS de a dezvolta tromboze •• APS este încă un domeniu în evoluţie •• abordări pentru ac. anti β-2 GP I – D I în direcţia de risc de stratificare

www.revistamedicalmarket.ro

Șos București – Măgurele, nr. 70F, Sector 5, București, România E-mail: office@sanimed.ro • www.sanimed.ro Tel/Fax: 021 420 54 94 / 021 420 54 93

Cercetare

Producţie Dezvoltare

Marketing Reactivi de diagnostic in vitro şi reactivi pentru chimia clinică, serologie, imunologie, bacteriologie şi biologie moleculară

Articole de specialitate

T-SPOT.TB T-SPOT.TB Testarea latenteTBC TBC Testareainfecţiei infecţiei latente T - SPOT.TB este un test revoluţionar pentru diagnosticul infecţiei latente TBC prin standardizarea celulelor T activate de proteine specifice Mycobacterium tuberculosis. Infecţia latentă este reprezentată de prezenţa bacililor „dormanzi” la pacienţii nou infectaţi care nu au dezvoltat tuberculoza primară. După o perioadă de latenţă, în funcţie de diverşi factori (de ex. imunodeprimarea), pacienţii pot dezvolta tuberculoza post primară.

T

estul poate fi util şi pentru depistarea infecţiilor active TBC, cu sprijinul medicului pneumolog care poate confirma boala.

Produsul a fost autorizat în Europa în iulie 2004, a primit aprobarea FDA în iulie 2008, a fost aprobat în China în 2010 şi în Japonia în 2012.

Este un test IGRA (Interferon

gamma realising assay) care dozează INFgamma eliberat „in vitro” prin stimularea limfocitelor pacientului cu antigene Mycobacterium tuberculosis. În cazul T-SPOT TB, celulele mononucleare ale sângelui sunt incubate cu antigenele de M. tuberculosis, iar numărul de celule T care au produs INF-gamma este determinat prin reacţia ELISPOT. Testul utilizează proteine specifice M. tuberculosis: ESAT6 şi CFP10. Rezultatele sunt evidenţiate prin formarea unor spoturi, numărul lor fiind important pentru rezultatul pozitiv/negativ.

Testul T - SPOT.TB stabileşte noi standarde clinice de sensibilitate (95%) şi de fiabilitate.

Studiile au demonstrat o excelentă sensibilitate şi specificitate a testului T - SPOT.TB, chiar şi la pacienţii imunodeprimaţi.

Pentru efectuarea testului T-SPOT. TB este nevoie doar de 2 ml sânge la copii / 6 ml sânge la adult recoltat într-o eprubetă cu anticoagulant litiu heparină (excepţie fac pacienţii imunodeprimaţi unde sunt necesare 2 eprubete). Sângele poate fi ţinut la temperatura camerei timp de 8 ore până la procesare sau până la 32 ore utilizând reactiv T-CELL EXTEND.

Dotarea minimă de aparatură necesară pentru efectuarea testului: • incubator cu aport 5% CO2 • centrifugă cu elongaţie • microscop binocular cu obiectiv de 10x

18

Avantaje: Avantaje: •• Prin standardizarea •• •• •• •• •• •• •• •• •• •• •• ••

•• ••

limfocitelor T creşte standardizarea Prin sensibilitatea testului limfocitelor la 95%; T creşte sensibilitatea Rezultate în 24 ore; testului la 95%; Rezultate Se reduc semnificativ în 24 ore; rezultatele fals Se reduc datorate pozitive semnificativ vaccinării rezultatele BCGfals şi pozitive datorate sensibilizării la micobacterii vaccinării BCG netuşi sensibilizării la micobacterii netuberculoase; berculoase; Poate fi utilzat şi pentru copiii peste 5 Poate ani, pentru fi utilzat a evita şi pentru rezultatele copiiifals peste po-5 ani, pentru zitive la testul a evita cutanat rezultatele cu tuberculina fals pozitive la testul (datorate vaccinării cutanat BCG); cu tuberculina Se poate vaccinării folosi la iniţierea (datorate BCG); terapiei Se poate (anti biologice folosiTNF-alfa), la iniţierea bolnavilor terapiei biologice cu boli autoimune; (anti TNF-alfa), bolnavilor cu pot Se boli utiliza autoimune; pentru pacienţi cu boli Se pot de colagen, utiliza la pentru care se pacienţi instituie cu o teraboli de colagen, pie imuno-supresoare la care se instituie (cu risc pentru o terapie imuno-supresoare dezvoltarea tuberculozei); (cu risc pentru dezvoltarea Se pot utilizatuberculozei); la diagnosticul infecţiei Se pot utiliza latente TB la lapacienţii diagnosticul transplantaţi infecţiei latenteprezintă (care TB la pacienţii riscul detransplantaţi a dezvolta (care prezintădatorită tuberculoza riscul de tratamentului a dezvolta tuberculoza post-transplant); administrat datorită tratamentului administrat Poate fi util în post-transplant); depistarea infecţiei acPoate tive extrapulmonare. fi util în depistarea infecţiei active extrapulmonare.

Distribuit de Global View Str. Ramuri Tei, Nr. de 10A,Global SectorView 2, Bucureşti Distribuit Tel/Fax: 004 021-230.54.24/ Str. Ramuri Tei, Nr. 10A, Sector 2, Bucureşti 004 004 021-230.54.26 Tel/Fax: 021-230.54.24/ Mobil: 004 0765.255.525 004 021-230.54.26 E-mail: office@globalview.com.ro; Mobil: 004 0765.255.525 www.globalview.com.ro E-mail: office@globalview.com.ro; www.globalview.com.ro

www.revistamedicalmarket.ro

Articole de specialitate

Diagnosticul molecular al unor pneumobacterii Infecţiile tractului respirator sunt o problemă de sănătate majoră la copii şi vârstnici, mai ales în sezonul rece, printre acestea pneumonia ocupând un loc fruntaş. Pneumoniile acute caracterizate prin debut brusc pot fi clasificate în două grupuri: pneumonii comunitare şi pneumonii nosocomiale (intraspitaliceşti). Un pas critic pentru tratamentul adecvat acordat pacientului este diagnosticul microbiologic corect, însă numeroase studii raportează dificultăţi. Agenţii patogeni incriminaţi cel mai frecvent sunt Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae şi Mycoplasma pneumoniae.

H

Ecaterina Tătaru Biolog medical specialist Doctor în Biologie

aemophilus influenzae colonizează nazofaringele şi poate fi implicat în otita medie acută, sinuzită, pneumonie, septicemie şi meningită.

Streptococcus pneumoniae (pneumococcul) poate coloniza tractul respirator superior (nazofaringele). Astfel, un procent semnificativ de copii sunt purtători asimptomatici ai acestei bacterii (10-85% dintre copiii sub 5 ani).

Este principalul agent cauzator al pneumoniei tipice, responsabil de aproximativ două treimi din pneumoniile bacteriene diagnosticate. De asemenea, poate cauza meningita bacteriană, otita medie, sinuzita, artrita septică, osteomielita, peritonita şi endocardita. În ciuda reputaţiei sale nefavorabile, acest microorganism de obicei stabileşte o asociere obligat asimptomatică în interiorul nazofaringelui.

Cunoaşterea stării de purtător este de mare importanţă atâta timp cât purtătorul asimptomatic constituie un rezervor pentru transmiterea bacteriei de la un om la altul, subliniind importanţa nişei nazofaringiene în supravieţuirea pneumococcului. Datele epidemiologice arată că statusul de purtător este tranzitoriu la majoritatea persoanelor, de obicei durând între 4-12 săptămâni.

Numeroase studii arată faptul că detecţia pneumococcului prin culturi bacteriene convenţionale, clasice, subestimează cu mult nivelul real al purtătorilor asimptomatici ai acestei bacterii. În schimb, tehnicile

20

de biologie moleculară se apropie mult mai mult de procentul real.

Tehnica PCR (reacţia de polimerizare în lanţ) realizează amplificarea ADN, fiind înalt sensibilă şi mult mai specifică comparativ cu tehnicile de microbiologie. Se poate realiza o variantă a PCR, denumită multiplex PCR, în care sunt amplificate simultan mai multe secvenţe ţintă, folosind primeri specifici şi detectate în acelaşi timp mai multe bacterii. Spre exemplu, există kituri de PCR care pot detecta simultan câteva pneumobacterii, ca de exemplu Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, Legionella pneumophila şi Bordetella pertussis, în diverse produse biologice: aspirat nazofaringian, exsudat nazofaringian, lavaj bronhoalveolar etc.

Utilitatea testului rezidă din faptul că este o tehnică neinvazivă, putând fi aplicată cu usurinţă la toate vârstele, inclusiv la nounăscuţi. Limitările analizei se referă la primii doi patogeni enumeraţi – S. pneumoniae şi H. influenzae – în cazul cărora studii recente au semnalat rate crescute de pacienţi pozitivi, atunci când se foloseşte ca probă biologică exsudatul nazofaringian. Explicaţia ar putea reieşi din faptul că tehnicile de PCR clasice nu fac distincţia între pneumonia pneumococcică, de exemplu şi colonizarea nazofaringelui, adesea asimptomatică. Totuşi, oferă informaţii utile despre statusul de purtător şi este important ca rezultatul analizei să fie interpretat în contextul clinic. Mai concludentă ar fi în acest caz testarea probelor de spută sau lavaj bronhoalveolar, în loc de exsudat nazofaringian.

De asemenea, pentru a depăşi aceste limitări a fost introdusă tehnica Real-Time PCR (PCR cantitativ), cu amplificarea unor gene ţintă mai specifice.

Un alt avantaj al tehnicilor de biologie moleculară îl reprezintă faptul că pot detecta anumite bacterii care de obicei nu sunt detectate prin tehnici microbiologice clasice.

Astfel, unele pneumobacterii, precum Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, Legionella pneumophila (dobândită exclusiv din mediul extern) şi Bordetella pertussis (agentul patogen al tusei convulsive) sunt dificil de cultivat în laborator, necesită medii speciale de cultură, sunt laborioase, consumatoare de timp şi mai puţin sensibile.

Mycoplasma pneumoniae este un patogen important care afectează tractul respirator în diferite grade, de la infecţii inaparente până la pneumonii interstiţiale. Cea mai obişnuită manifestare clinică a infecţiei cu M. pneumoniae este traheobronşita. Epidemiile apar cel mai frecvent în colectivităţi la sfârşitul verii şi toamna. Diagnosticul de laborator al infecţiei se face în mod uzual prin teste serologice, bazate pe determinarea combinată a anticorpilor specifici IgG, IgM şi IgA. Există situaţii însă în care rezultatul este echivoc, fiind necesară retestarea după un anumit interval. Testele comerciale de biologie moleculară pot detecta acest patogen mult mai specific, dar sensibilitatea testului variază mult în funcţie de tipul de PCR, genele ţintă alese, standardele folosite şi vârsta pacientului.

Studiile arată superioritatea testelor bazate pe PCR în diagnosticul M.pneumoniae, dar încă nu pot înlocui complet testele serologice, fiind recomandată folosirea ambelor tipuri de testare pentru un screening corect şi precis.

Simptomele infecţiei cu C. pneumoniae sunt imposibil de distins clinic de alte cauze ale pneumoniei. Chiar şi în cazurile uşoare, recuperarea completă este lentă, adesea pacienţii care au avut în antecedente infecţii respiratorii cu C. pneumoniae având probabilitate mai mare de a dezvolta bronşite astmatiforme. Mai multe boli cronice au fost asociate cu infecţia cu acest patogen. Testele moleculare pot depista rapid ADN-ul pentru C.pneumoniae, permiţând aplicarea rapidă a tratamentului adecvat. În concluzie, în ultima perioadă tehnicile de biologie moleculară s-au dezvoltat foarte mult şi au început să completeze cu succes alte tehnici utilizate în diagnosticul pneumobacteriilor, devansându-le adesea prin acurateţe, specificitate şi sensibilitate.

www.revistamedicalmarket.ro

Aleea Pacala 11-13, Sector 3, Bucuresti, cod 031883, Mobil: 0722.456.206; 0726.750.780; 0726.750.775 Tel/ Fax: 031.405.42.09; 031.405.42.10; e-mail: avenacomenzi@yahoo.com, www.avena-medica.com • www.avena.ro

„Furnizor intelegator în laborator“

APARATURA, CONSUMABILE şi REACTIVI Reprezentant Snibe, Boditech, Himedia Lab., Vacutest Kima, Caretium, Dirui, Mindray, etc

AVANS + RATE 3 ANI Analizor automat Chemiluminescenta Maglumi M600 Snibe 16.500 €

- Sistem special automat de imunologie - Metoda: CLIA Chemiluminescenta - 180 teste/ora - 110 teste in meniu - cel mai mic pret/test - controale disponibile

1200 teste/h constant Analizor automat biochimie (biochimie 600 teste/h, ISE 600teste/h) Compatibil cu sistemele modulare IVD + ISE BC1200 Snibe Sistem deschis de reactivi Cel mai mic pret/reactivi

30.000 €

*poate utilize statia de apa din laborator

NOUL Sistem Special Imunologie iCHROMA II LANSAT MAI 2016 2.200 €

Analizor automat VSH 1.600 €

HiMedia Laboratories Pvt. Limited Cel mai amplu furnizor de microbiologie din lume

Cel mai economic sistem de imunologie Eficient la un nr. foarte mic de teste/zi Ideal pentru urgente 24 cele mai solicitate teste de imunologie Metoda: IFA - Imunofluorescenta

30 pozitii pentru eprubete 30 de probe scanate simultan Capacitate: 60 de probe / ora Punctaj maxim CAS Scuteste 1 om de laborator Ideal si in dotarea punctelor de recoltare Medii de cultura deshidratate Medii de cultura gata preparate Discuri de antibiograma, Fungigrama MIC - Concentratie minima inhibitorie Oxidaza, Indol, ONPG, Optochin, etc Baloane hemocultura, Teste sanitatie suprafete, Galerii manuale tip API, Peptone, TBC, Indicatori si coloratii

VACUTEST KIMA ITALIA

Vacutainere speciale Plastice de calitate

REACTIVI DIVERSI

Grupe sanguine, latex aglutinare, truse strept., stafilo, ecoli, teste rapide

Biochimie, urina, hematologie, elisa, IFA, CLIA, QC, etc

Chimie Clinică

BM 100

BM 200

BM 500

Electroforeză

Sistem EP LINE 1.1 Ioni / Electroliţi

Modele: K+ / Na+ K+ / Na+ / ClK+ / Na+ / Cl- / Ca2+ / pH BM ISE Urini

BM URI 30

BM URI 200

BM URI 500

Hematologie BM HEM 5+

BM HEM 5

Medii de cultură Discuri antibiograma

Medii in tuburi

Medii in placi

Medii de cultură preparate

Medii de cultură în sticlă

Medii de cultură deshidratate

Suplimente

Teste rapide

www.rocosistem.ro Str. Mohorului, nr. 6, Bl 17, Sc 6, Et 2, Ap 88, Sector 6, 062154 Bucureşti, România, Tel/Fax: +4 021 43 42 042, office@rocosistem.ro

Articole de specialitate

Particulele LDL „small-dense” (sdLDL) – factor de risc independent pentru ateroscleroză

Colesterolul LDL (Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C) este considerat a fi unul dintre cei mai importanţi factori de risc pentru bolile cardiovasculare. Cu toate acestea, multe persoane cu nivel de LDL-C în intervalul de referinţă dezvoltă afecţiuni cardiovasculare1.

Asist. univ. Dr. Antoanela Curici

Dimensiunea şi numărul particulelor LDL reprezintă un marker predictiv important pentru evenimentele cardiovasculare

Medic Şef Laborator Central SYNEVO România

L

DL variază în dimensiune, densitate, sarcină electrică şi compoziţie chimică (lipide şi apoproteine). Heterogenitatea particulelor LDL a fost identificată pentru prima dată în anii‚ 40 prin ultracentrifugare analitică şi, mai târziu, prin ultracentrifugare în gradient de densitate şi electroforeză în gel cu gradient. Aplicarea combinată a acestor tehnici a stabilit că în plasmă există mai multe subclase de LDL ce pot fi clasificate pe baza densităţii şi dimensiunii particulelor în 3 fracţiuni majore, denumite LDL I-III (LDL-I cu intervalul de densitate: 1.022-1.032 Kg/L, LDL-II: 1.032-1.038 kg/L şi LDL-III: 1.0381.050 kg/L) şi o fracţiune minoră, LDL-IV (1.050-1.063 kg/L). În funcţie de predominanţa unei anumite subclase LDL au fost definite următoarele fenotipuri: feniotipul A, în care predomină particulele LDL mari, uşoare (LDL-I şi LDL-2, „large buoyant”, lbLDL), fenotipul B caracterizat prin predominanţa particulelor LDL mici, dense (LDL-III, „small dense” LDL, sdLDL >50%) şi un fenotip intermediar A/B (40-50% LDL-III)2.

Tipuri particule LDL

Sursa foto: http://drjockers.com/11-steps-to-beat-heart-disease

Dimensiunea particulelor LDL reprezintă un marker predictiv important pentru evenimentele cardiovasculare şi progresia bolii coronariene iar predominanţa particulelor sdLDL a fost acceptată de National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III ca un factor de risc cardiovascular emergent3.

26

Sursa foto: www.onewellnessplace.com/blog/particlesize

Pentru a explica aterogenitatea crescută a sdLDL comparativ cu lbLDL au fost propuse o serie de mecanisme: o afinitate mai scăzută pentru receptorul LDL; un grad de penetrare mai mare în peretele arterial; interacţiune crescută cu componentele matricei extracelulare (retenţie arterială crescută datorită legării la proteoglicani) şi o mai mare sensibilitate la oxidare. Deoarece particulele sdLDL sunt mai mici şi conţin mai puţin colesterol, nivelurile crescute de sdLDL reprezintă, de asemenea, un număr mai mare de particule aterogene, care nu pot să nu fie reflectate de nivelul de LDL-C1.

Distribuţia subclaselor de LDL este determinată atât genetic cât şi de factorii de mediu.

Mai mult, concentraţia de sdLDL este puternic corelată cu nivelul trigliceridelor şi este crescută la persoanele cu diabet sau sindrom metabolic1.

Studii clinice au demonstrat că acumularea particulelor sdLDL în plasmă este asociată cu un risc crescut de boli cardiovasculare şi sindrom metabolic. Măsurarea concentraţiei colesterolului sdLDL (sdLDL-C) este utilă în evaluarea prezenţei şi severităţii bolilor cardiovasculare. Un studiu efectuat de Arai et al. a demonstrat utilitatea sdLDL-C ca marker predictiv pentru incidenţa afecţiunilor cardiace4.

Prezenţa unor concentraţii crescute de sdLDL este un predictor negativ în evoluţia pacienţilor cu angioplastie periferică. Măsurarea acestui parametru trebuie luată în considerare la pacienţii care vor suferi acest tip de interven-

ţie. Pentru a îmbunătăţi rezultatele clinice după o astfel de intervenţie vasculară trebuie aplicate terapiile de reducere a concentraţiei de sdLDL5. În patologia neurologică, un studiu recent a arătat că prezenţa sdLDL ar putea fi independent asociată cu un prognostic nefavorabil după un accident vascular ischemic acut6.

Recomandări pentru efectuarea testului:

•• Hiperlipemie familială combinată •• Diabet zaharat tip II, rezistenţă la insulină, sindrom metabolic •• Sindromul ovarelor polichistice •• Hipertrigliceridemie postprandială marcată •• Pacienţi dializaţi •• Boală renală cronică •• Pacienţi cu profil lipidic clasic normal dar cu istoric familial pozitiv de afecţiuni cardiovasculare •• Monitorizarea terapiei hipolipemiante.

Condiţii de recoltare, transport şi stocare a probelor: este obligatoriu ca probele de sânge să fie recoltate à jeun (după 12 ore de la ultima masă) în vacutainer fără anticoagulant, cu/fără gel separator; serul obţinut în urma centrifugării va fi transportat şi stocat la (-15)-(-25)°C până în momentul efectuării testului. În laboratoarele Synevo sdLDL este determinat printr-o metodă fotometrică automată şi este raportat la LDL-C total. Valorile procentuale < 35% sunt considerate fiziologice, în timp ce valorile > 50% sunt critice din punct de vedere fiziopatologic.

Nivelul de sdLDL poate fi redus prin dietă, activitate fizică7 şi administrarea de statine8.

Referinţe

1. Hoogeveen RC1, Gaubatz JW, Sun W, Dodge RC, Crosby JR, Jiang J, Couper D, Virani SS, Kathiresan S, Boerwinkle E, Ballantyne CM. Small dense low-density lipoprotein-cholesterol concentrations predict risk for coronary heart disease: the Atherosclerosis Risk In Communities (ARIC) study. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2014 May;34(5):1069-77.

2. Davies IG, Graham JM, Griffin BA. Rapid separation of LDL subclasses by iodixanol gradient ultracentrifugation. Clin Chem. 2003 Nov;49(11):1865-72.

3. Rizzo M, Berneis K. Low-density lipoprotein size and cardiovascular risk assessment. QJM. 2006 Jan;99(1):1-4. 4. Cho Y, Lee SG, Jee SH, Kim JH. Hypertriglyceridemia is a major factor associated with elevated levels of small dense LDL cholesterol in patients with metabolic syndrome. Ann Lab Med. 2015 Nov;35(6):586-94.

5. Jacomella V, Gerber PA, Mosimann K, Husmann M, Thalhammer C, Wilkinson I, Berneis K, Amann-Vesti BR. Small dense low density lipoprotein particles are associated with poor outcome after angioplasty in peripheral artery disease. PLoS One. 2014 29;9(9):e108813.

6. Manabe Y, Morihara R, Matsuzono K, Nakano Y, Takahashi Y, Narai H, Omori N, Abe K. Estimation of the Presence of Small Dense Lipoprotein Cholesterol in Acute Ischemic Stroke. Neurol Int. 2015 Jun 3;7(1):5973.

7. Dutheil F, Walther G, Chapier R, Mnatzaganian G, Lesourd B, Naughton G, Verney J, Fogli A, Sapin V, Duclos M, Vinet A, Obert P, Courteix D, Lac G. Atherogenic subfractions of lipoproteins in the treatment of metabolic syndrome by physical activity and diet - the RESOLVE trial. Lipids Health Dis. 2014 Jul 11;13:112.

8. Ai M, Otokozawa S, Asztalos BF, Nakajima K, Stein E, Jones PH, Schaefer EJ. Effects of maximal doses of atorvastatin versus rosuvastatin on small dense low-density lipoprotein cholesterol levels. Am J Cardiol. 2008 Feb 1;101(3):315-8.

www.revistamedicalmarket.ro

Human diagnostics

Nowadays it is increasingly important to be able to identify human pathogens quickly and clearly. For this purpose, we have developed CE-IVD certified ready-to-use kits specially designed for the highly sensitive detection of various microorganisms.

The Kits of the product group rapidSTRIPE and RoboGene® convince through accurate and reliable results even at lowest detection limits.

Isolation kits for detection with RoboGene® Assays • INSTANT Virus RNA Kit • INSTANT Virus RNA/DNA Kit Quantitative real-time assays • RoboGene® HBV DNA Quantification Kit 2.0 • RoboGene® HCV RNA Quantification Kit • RoboGene® HDV RNA Quantification Kit 2.0 • RoboGene® HIV-1 RNA Quantification Kit • RoboGene® HCMV DNA Quantification Kit • RoboGene® EBV DNA Quantification Kit • RoboGene® PVB19 DNA Quantification Kit • Kits for „Minimal Residual Disease“

Articole de specialitate parameters simultaneously •• Custom setup of samples and reagents •• Highly convenient solution to urgent samples and/or low volume parameters •• Affordable instrumentation •• Most extensive panel for infectious diseases in the market

VirClia® Automation VirClia has been specially designed to be used in the ThunderBolt® automatic system, which has customized software for Vircell’s exclusive monotest format.

VirClia® MONOTEST Indirect chemiluminescent immunoassay (CLIA) to test antibodies against different microorganisms in human serum or plasma.

Microwell-based assay: every test consists of 3 reaction wells + 5 reagent wells.

Fundamentals The CLIA method is based upon the reaction between the antibodies present in the tested samples and the antigen adsorbed on a polystyrene surface.

Unbound immunoglobulins are washed off. An enzyme‐labelled anti‐human globulin binds the antigen-antibody complex in a second step. After a new washing step, bound conjugate is developed adding a chemiluminescent substrate solution that

generates a glow-type luminescence that can be read with a luminometer.

VirClia® Test principle Product features:

ThunderBolt® specifications •• Fully automated – load and walk away.

•• High capacity – 192 samples or 24 monotest.

•• System Architecture – Open, fully cus-

•• Monotest format and ready-to-use reagents •• Simple and automated protocol with fast results (50 minutes) •• Work directly from the primary sample tube •• Each monodose includes a calibrator and a negative control •• Validation and interpretation of results based on each sample, not on stored curves •• Barcode identification of samples and reagents

Main benefits •• Extraordinary sensitivity and accuracy in the results •• Facilitates the automation of infectious serology to any kind of laboratory •• Extensive infectious serology diagnostic panel •• Ability to perform 24 tests of different

•• •• •• •• •• •• •• •• ••

38

tomizable. Program any EIA or CLIA protocol.

Intelligent Racks – Automatic sample location management. Reduces errors.

High Precision Micro-Syringe – Aspirate 1μl with less than 3% CV. Forced Convection Incubator – Evenly heats using forced air to eliminate „Edge Effect”.

Orbital MTP Shaker – Better adherence to assay protocols, no splash.

Built-in Reader – ultra-compact and fully automated reader On-board Camera – Probe-mounted camera allows remote troubleshooting.

Built-in Barcode Reader – Streamline loading and decrease sample tracking errors.

Small Footprint – Fits on a 60 cm deep standard laboratory bench.

The device meets the European directive on in vitro diagnosis and the FDA.

www.revistamedicalmarket.ro

Articole de specialitate

Polimorfismele receptorului de FSH Ovulaţia reprezintă un proces complex, controlat de axa hipotalamo- hipofizo- ovariană şi care implică modificări hormonale şi celulare, în urma cărora se va expulza din ovar un ovocit pregătit de o posibilă „întalnire“ cu un spermatozoid.

Orice alterare cât de mică aparută în cursul acestui proces poate avea efecte clinice semnificative, precum amenoree, ciclu menstrual neregulat, hirsutism, putându-se ajunge până la infertilitate.

Ecaterina Tătaru

Biolog medical specialist Doctor în Biologie

H

ipotalamusul secretă un hormon trop, denumit GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone), care ajunge la glanda hipofiză pe calea sistemului port, stimulând secreţia de FSH şi LH de către aceasta. FSH (hormonul foliculinostimulant) are la femei rolul de a induce creşterea şi maturarea foliculilor ovarieni şi stimulează producerea de estrogen.

Patogeneza anovulaţiei cronice este puţin înţeleasă până în prezent, deşi este frecvent întalnită la femeile având vârsta reproductivă. Totuşi, o incidenţă crescută a unor fenotipuri similare în cadrul aceleiaşi familii a sugerat o cauză de natură genetică. Astfel, s-a ajuns la studierea polimorfismelor genelor care codifică hormonii sexuali şi receptorii acestora, dar rezultatele sunt momentan contradictorii (mai ales în grupuri etnice diferite).

Efectele FSH sunt mediate de receptorul pentru FSH (notat şi FSHR). Gena

40

pentru receptorul de FSH este localizată în cromozomul 2, pe braţul scurt al acestuia. Numeroase studii au arătat că mutaţiile şi polimorfismele acestei gene pot afecta capacitatea reproductivă. Adesea noţiunile de “mutaţie” şi “polimorfism” creează confuzii, deoarece graniţa dintre ele este fin delimitată. În cazul genei receptorului de FSH, mutaţiile pot fi activatoare sau inactivatoare, acestea din urmă blocând efectul FSH şi putând duce la oprirea completă a dezvoltarii foliculilor ovarieni, deci la infertilitate.

Totuşi, persoanele heterozigote pentru aceste mutaţii inactivatoare sunt fertile, ceea ce arată că o singură genă receptor de FSH funcţională este suficientă pentru o funcţie reproductivă normală.

Pe de altă parte, un polimorfism desemnează prezenţa într-o populaţie a cel puţin două variante alelice la nivelul unui locus genetic. Au fost identificate un număr mare de polimorfisme în gena receptorului de FSH. Majoritatea se găsesc în regiunile necodificatoare (introni), doar 5 fiind localizate în regiunea codificatoare şi una în promotorul genei. Dintre acestea, cele mai studiate polimorfisme sunt N680S si T307A, despre care studiile arată că pot avea efecte fenotipice semnificative.

În cazul N680S, în poziţia 680 se poate regăsi fie alela S, care codifică pentru serină (Ser), fie alela A, pentru asparagină (Asn). Astfel, cele două alele posibile în această poziţie sunt S şi N. Rezultă de aici trei combinaţii alelice posibile: homozigot N/N, heterozigot N/S şi homozigot S/S. În cel de-al doilea caz, codonul 307 este ocupat fie de alela T care codifică aminoacidul treonină (Thr), fie de A pentru alanină (Ala).

Studiile au indicat o asociere a polimorfismului Ser680 (femei homozigote S/S) cu amenoreea sau anovulaţia. Totodată, unele femei cu anovulaţie cronică au nivele crescute de hormoni androgeni sau sindromul ovarelor polichistice. S-a descoperit şi faptul că varianta Ser680 este corelată frecvent cu nivelul de FSH crescut şi valorile inhibinei A, estradiolului şi progesteronului scăzute, iar în acest caz durata ciclului menstrual este mai mare. În fertilizarea in vitro (FIV), un prim pas critic care vizează obţinerea unor oocite de calitate, esenţial pentru succesul FIV, este hiperstimularea ovariană controlată cu FSH recombinant (rFSH). Există câţiva factori incriminaţi pentru prezicerea răspunsului ovarian la acest tratament, precum vârsta, statusul hormonal, fumatul, rezerva ovariană. În afara acestor factori, recent au fost investigate polimorfismele câtorva gene, printre care şi gena receptorului de FSH. Cele două polimorfisme descrise sunt în dezechilibru de linkage, cele mai frecvente combinaţii alelice T307/N680 şi A307/S680 fiind aproape egal distribuite în populaţia caucaziană, după cum arată articolele de specialitate. Din acest motiv, numeroase studii clinice au investigat în special polimorfismul N680S, arătând că acesta influenţează răspunsul ovarian la pacienţi aflaţi sub tratamentul pentru FIV. Astfel, la femeile care prezintă alela S în poziţia 680 a genei, cantitatea de FSH necesară pentru stimularea ovariană în FIV este mai mare, sugerând că această variantă alelică codifică pentru un receptor de FSH mai puţin activ decât în cazul femeilor cu alela N. Stadiul actual al cercetărilor este încă departe de a fi lămurit controversele în acest domeniu, ceea ce lasă deschisă poarta spre noi cercetări.

www.revistamedicalmarket.ro

TEG® 5000 – trombelastograf computerizat

•• Trombelastograf pentru analiza elasticităţii cheagului de sânge, sensibil la toate interacţiunile între componentele celulare şi plasmatice, măsurând dezvoltarea şi liza cheagului de sânge.

•• Permite analiza simultană a 2 probe de sânge în condiţii termice diferite (de ex. studierea hemostazei la un pacient hipotermic şi a altuia în situaţie de temperatură normală).

•• Stochează şi analizează testele efectuate. Curba obţinută, poate fi comparată cu curbele din baza de date a analizorului.

•• Permite exportarea rezultatelor în format PDF şi transmiterea pe e-mail.

•• Efectueză analiza întregului proces al hemostazei cu un singur test fără a fi necesare alte instrumente!

•• Are 2 canale de analiză simultane, cu posibilitate de extindere la 8 canale.

•• Sistemul de măsură este prevăzut cu fir de torsiune, fără lagăre suplimentare.

•• Funcţionarea este verificată prin controale cu 2 nivele (normal şi patologic).

•• Efectuează şi teste de tip “platelet mapping” – mapare plachetară.

•• Măsoară şi efectul asupra hemostazei al medicamentelor anticoagulante.

•• Permite terapia personalizată a bolnavului.

•• Are implementat un protocol VAD (Ventricular Assist Device), permite lucrul şi în secţiile de chirurgie cardiovasculară.

•• Încalzeşte direct proba de sânge, nefiind nevoie de încălzire ambientală, permiţând analiza probelor de la pacienţi în hipotermie sau hipertermie.

•• Determină eficacitatea trombocitelor, indiferent de numărul acestora.

•• Face distinctia între cauzele sângerării: exces de heparină, deficienţă de factori, activitate plachetară deficitară, fibrinoliza primară/secundară sau cauze chirurgicale.

•• Determină taria cheagului în 5-10 minute, iar nivelul Fibrinogenului funcţional în 15-20 de minute.

•• Identifică existenţa condiţiilor protrombotice (enzimatice sau plachetare).

•• Datorită analizei complexe şi rezultatelor obţinute este util în mai multe departamente ale centrelor medicale sau spitale.

Pentru mai multe detalii, vă rugăm să ne contactaţi!

BALMED S.R.L. B-dul Burebista nr. 1, Bl. D15, Sc. 4, Ap. 126, Sector 3, 031106, Bucuresti, Tel: 0722 677 660, 0724 204 606, 0785 433 588, Tel/Fax: 021 - 327 52 69, E-mail: office@balmed.ro

Articole de specialitate

Valoarea clinică a determinării numărului de eritroblaşti prezenţi în sângele periferic Eritroblaştii, precursori nucleaţi de linie eritrocitară, apar în mod normal la adulţii sănătoşi şi copii doar în măduva osoasă hematogenă. Apariţia acestora în sângele periferic este rezultatul unei eritropoieze extramedulare sau a întreruperii barierei sânge periferic-maduvă hematogenă. Ambele scenarii indică existenţa unei boli severe. În mod fiziologic eritroblaştii apar în sângele periferic doar la nou-născuţi şi prematuri.

Dr. Monica Ioaniţescu, Director Marketing, Top Diagnostics Semnificaţia numărătorii eritroblaştilor la nou-născut Este bine cunoscută necesitatea numărării eritroblaştilor la nou-născut pentru a obţine numărătoarea corectă a numărului total de leucocite – prin corecția formulei leucocitare. Încă din anul 1924 au fost publicate valorile de referinţă pentru eritroblaşti la nou-născut în prima zi de viaţă (Lippman HS. (1924): Morphologic and quantitative study of blood corpuscles in the newborn period.Am J Dis Child 27: 473-515).

La nou-născuţii prematuri precum şi în cazul celor născuţi la termen, valoarea exactă a numărului de eritroblaşti este un element important în evaluarea stării de sănătate. Astfel, un număr cresut al eritroblaştilor faţă de valorile normale poate indica: hipoxie postnatală sau cronică, anemie, diabet al mamei, o stare de stres acut. Valori extrem de mari, de ex. 500 eritroblaşti/100 leucocite, pot fi un semn de infecţie, cum ar fi sifilis congenital. Deşi în 1-2% din cazuri creşterea extremă a numărului eritroblaştilor în sângele periferic este idiopatică (Hanlon-Lundberg KM, Kirby RS, Gandhi S, Broekhuizen FF. (1997): Nucleated red blood cells in cord blood of singleton term neonates. Am J ObstetGynecol 176:1149 -56), aceşti pacienţi necesită investigare de urgenţă pentru a stabili cu rapiditate începerea tratamentului adecvat.

Semnificaţia numărătorii eritroblaştilor la copii şi adulţi Atât la pacienţii adulţi cât şi la copii, apariţia eritroblaştilor în sângele periferic

42

este întotdeauna un semn patologic. Prezenţa eritroblaştilor poate însoţi practic orice tip de anemie severă. În plus, aceştia apar frecvent în anemiile hemolitice, talasemii, sindroame mielodisplazice, leucemii, hemoragii severe, dar pot apărea şi în stări critice (de ex. marile traume).

Articolul de Constantino BT, Cogionis B. (2000): Nucleated RBCs - Significance in the peripheral blood film. Lab Med 31: 223 -229, conţine lista detaliată a bolilor asociate cu apariţia eritroblaştilor în sângele periferic şi explică mecanismele adiacente de apariţie a acestora. De asemenea, apariţia eritroblaştilor în sangele periferic la adulţi se corelează cu o mortalitate crescută.

Metode utilizate pentru determinarea numărului eritroblaştilor Metoda manuală - Numărătoarea la microscop se realizează în mod uzual examinând 100-200 celule, iar exprimarea rezultatului se face în număr de eritroblaşti la 100 leucocite. Metoda manuală poate avea diferenţe de numătoare între operatori diferiţi.

Metoda citometriei în flux cu fluorescenţă - Odată cu introducerea seriei de analizoare automate de hematologie Sysmex XN a devenit posibilă măsurarea automată a eritroblaştilor în fiecare hemogramă. Datorită funcţiei de auto-corecţie inclusă, numărul total al leucocitelor măsurat de analizor este din start cel real.

Studii referitoare la semnificaţia clinică a determinării numărului de eritroblaşti efectuate între 2011-2015 Monteiro Junior JG et al. (2015): Nucleated red blood cells as marker for an increased risk of unfavorable outcome and mortality in very low birth weight infants.

Early Hum Dev. 2015; 91(10):559-563 De reţinut: Prezenţa eritroblaştilor se asociază cu o mortalitate crescută la pacienţii internaţi în secţiile ATI (49.4% vs 21.7%, P<0.001) precum şi cu o mortalitate generală crescută la pacienţii spitalizaţi (61.4% vs 33.3%, p = 0.001).

Cremer M et al. (2015): Nucleated red blood cells as marker for an increased risk of unfavorable outcome and mortality in very low birth weight infants. Early Hum Dev.; 91(10):559-563 De reţinut: Acest studiu realizat pe 483 nou-născuţi cu greutate mică la naştere arată că determinarea numărului eritroblaştilor cu 24 -12h. înainte de naştere se poate utiliza ca marker surogat de morbiditate şi mortalitate severe. Valoarea prag optimă a fost stabilită la 2x109/L având o sensibilitate de 83% şi o specificitate de 75%.

Gasparović V et al. (2012): Nucleated red blood cells count as first prognostic marker for adverse neonatal outcome in severe preeclampticpregnancies.Coll. Antropol 36: 853–857.

De reţinut: Un număr crescut al eritroblaştilor la prematuri născuţi din sarcini cu preeclampsie severă pare să reprezinte primul marker semnificativ pentru o evoluţie nefavorabilă a nou-născutului Kuert S et al. (2011): Association of nucleated red blood cells in blood and arterial oxygen partial tension. ClinChem Lab Med 49: 257–263.

De reţinut: Numărul eritroblaştilor este un factor de risc independent pentru prognosticul defavorabil şi mortalitate, astfel încât pacienţii cu eritroblaşti în sânge periferic au necesitat o spitalizare mai îndelungată în secţia de terapie intensivă.

www.revistamedicalmarket.ro

Furnizor de reactivi, echipamente, consumabile şi service pentru laboratoarele de biologie moleculară şi imunologie, aplicând o politică bazată pe calitatea înaltă a produselor şi serviciilor precum şi flexibilitatea în întâmpinarea nevoilor clienţilor.

Distribuitor exclusiv în România pentru: ELDON CARD 2521 can easily be divided into two single cards ELDON ID CARD with your photo. The card can be folded to the format of a credit card.

Lifecodes Fluoroanalyzer BIO SUPPLY Adresa: Str. Vlaicu Vodă, Nr.4, Bl. C14, Ap.14, Sector 3, Bucureşti, România, P.O.4 Box 31 Telefon: +40 21 322 85 98; +40 31 40 85 191 Mobil: +40 721 62 64 21 Fax: +40 21 322 85 98

e-mail: office@biosupply.ro

BIO SUPPLY oferă o gamă variată de kit-uri şi consumabile pentru HLA, secvenţiere, RT-PCR pentru detecţia patogenilor (virusuri, bacterii, fungi şi paraziţi) şi tehnologia Hi-Res Melting (teste pentru scanarea genelor pentru: cancer, metabolism, markeri cardiaci, hemostază, enzime de transport metabolizante de medicamente, flavine conţinând monooxygenaze, glutathioneS-transferaze, neuronale, familia „solute carrier”.

De asemenea comercializează teste pentru monitorizarea gradului de curăţenie în spitale (săli de operaţie, ATI, saloane) cu ajutorul testelor bazate pe tehnologia ATP (Hygiena International-UK).