Preview Nghiên cứu chiết xuất naringin từ cùi bưởi (Citrus grandis L.)

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI

TRỊNH QUỐC TUẤN Mã sinh viên: 1201674

NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT NARINGIN TỪ CÙI BƢỞI (Citrus grandis L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ

HÀ NỘI - 2017

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI

TRỊNH QUỐC TUẤN Mã sinh viên: 1201674

NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT NARINGIN TỪ CÙI BƢỞI (Citrus grandis L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ

Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Văn Hân Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp dƣợc

HÀ NỘI - 2017

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Ơ

Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn trân trọng và sâu sắc tới TS. Nguyễn Văn

N

LỜI CẢM ƠN

TP

Em xin chân thành cảm ơn DS. Trần Trọng Biên và tập thể cán bộ, giảng viên

ẠO

của bộ môn Công nghiệp dược Trường đại học Dược Hà Nội đã nhiệt tình giúp đỡ

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

và tạo điều kiện giúp em hoàn thành đề tài này.

N

G

Trong quá trình học tập, triền khai làm đề tài và những gì đạt được hôm nay,

H Ư

em xin cảm ơn công lao giảng dạy và hướng dẫn của thầy cô giáo trường đại học

TR ẦN

Dược Hà Nội.

Và em cũng cũng xin cảm ơn gia đình, bạn bè, anh chị những người luôn bên

10 00

B

em, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em học tập, nghiên cứu, hoàn thành đề tài

A

tại Trường đại học Dược Hà Nội này.

H

Ó

Dù đã có nhiều cố gắng, song đề tài còn có thể có những thiếu sót. Kính mong

Í-

nhận được sự chia sẻ và nhận được những ý kiến đóng góp quý báu của các thầy cô

ÁN

-L

giáo.

Hà Nội, ngày 18 tháng 05 năm 2017 Sinh viên Trịnh Quốc Tuấn

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Em xin trân trọng cảm ơn.

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

U Y

tận tình hướng dẫn, chỉ bảo, giúp đỡ em trong suốt thời gian thực hiện đề tài.

N

H

Hân, tổ Chiết xuất- bộ môn Công nghiệp dược- Trường đại học Dược Hà Nội đã

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

ẠO

TP

.Q

U Y

N

H

Ơ

N

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC

Ơ

N

LỜI CẢM ƠN

N

H

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

TP

.Q

DANH MỤC HÌNH VẼ VÀ SƠ ĐỒ, BIỂU ĐỒ

ẠO

ĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................................. 1

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

CHƢƠNG I. TỔNG QUAN ............................................................................ 2

H Ư

N

G

1.1. Vài nét về cây Bưởi.................................................................................. 2

TR ẦN

1.1.1. Tên gọi, vị trí phân loại ...................................................................... 2 1.1.2. Đặc điểm thực vật .............................................................................. 2

10 00

B

1.1.3. Bộ phận dùng, trồng trọt -thu hái ..................................................... 2 1.1.4. Thành phần hóa học ......................................................................... 3

Ó

A

1.1.5. Công dụng ......................................................................................... 3

Í-

H

1.2. Đại cương về hoạt chất naringin ............................................................. 3

-L

1.2.1. Công thức, tên khoa học ................................................................... 3

ÁN

1.2.2. Tính chất vật lý ................................................................................. 4

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

1.2.3. Tính chất hóa học ............................................................................. 4

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

U Y

DANH MỤC CÁC BẢNG

1.2.4. Tác dụng dược lý............................................................................... 5

1.3. Một số nghiên cứu về chiết xuất naringin............................................... 5 CHƢƠNG II. NGUYÊN VẬT LIỆU, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 8 2.1. Nguyên vật liệu ....................................................................................... 8 2.1.1. Nguyên liệu ....................................................................................... 8

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

2.1.2. Hóa chất, thiết bị .............................................................................. 8

H

Ơ

2.3. Phương pháp nghiên cứu ........................................................................ 9

N

2.2. Nội dung nghiên cứu ............................................................................... 9

U Y

N

2.3.1. Phương pháp xác định hàm ẩm ...................................................... 9

TP

2.3.3. Phương pháp định lượng naringin ............................................... 10

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

ẠO

2.3.4. Phương pháp chiết xuất ................................................................. 13

G

Đ

2.3.5.Xác định cấu trúc sản phẩm ........................................................... 13

H Ư

N

CHƢƠNG III: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN ............... 14

TR ẦN

3.1. Kết quả xây dựng đường chuẩn biểu thị mối liên hệ giữa mật độ quang và nồng độ naringin...................................................................................... 14

10 00

B

3.2. Kết quả định tính và định lượng citroflavonoid trong nguyên liệu ...... 15 3.2.1. Kết quả định tính citroflavoid trong nguyên liệu ........................... 15

Ó

A

3.2.2. Kết quả định lượng citroflavonoid trong nguyên liệu .................... 16

Í-

H

3.3. Kết quả nghiên cứu chiết xuất citroflavonoid từ cùi bưởi ................... 17

-L

3.3.1. Lựa chọn dung môi chiết xuất......................................................... 17

TO

ÁN

3.3.2.Lựa chọn phương pháp chiết xuất ................................................... 18

ÀN

3.3.3. Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng tới quy trình chiết xuất ................. 19

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

2.3.2. Phương pháp định tính naringin trong nguyên liệu cùi bưởi ........ 9

D

IỄ N

Đ

3.4. Quy trình chiết xuất và tinh chế naringin từ cùi bưởi .......................... 24 3.5.1. Tiến hành chiết xuất........................................................................ 24 3.5.2. Tinh chế naringin từ sản phẩm chiết xuất. ..................................... 25 3.5. Xác định cấu trúc sản phẩm .................................................................. 26

CHƢƠNG IV: BÀN LUẬN………………………………………………..30

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

CHƢƠNG V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ……………………………..32

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

ẠO

TP

.Q

U Y

N

H

Ơ

N

TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………………………………………33

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

H

Phần viết đầy đủ

DĐVN IV

Dược Điển Việt Nam IV

EtOH 96%

Ethanol 96%

IR

Phổ hồng ngoại (Infra-red)

LDL

Lipoprotein tỷ trọng thấp

NMR

Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

STT

Số thứ tự

UV-VIS

Phổ tử ngoại - khả kiến (Ultraviolet Visible)

N

H Ư

TR ẦN

B 10 00 A Ó H Í-L ÁN TO

D

IỄ N

Đ

ÀN

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

Đ

ẠO

TP

.Q

U Y

N

Phần viết tắt

G

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

Ơ

N

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

8

14

.Q

Bảng 3.2. Kết quả định lượng citroflavonoid trong nguyên liệu cùi bưởi

18 20

Bảng 3.6. Kết quả ảnh hưởng của thời gian ngâm nguyên liệu

21

Bảng 3.7. Kết quả ảnh hưởng của số lần ngâm nguyên liệu

23

Bảng 3.8. Kết quả ảnh hưởng của pH tới quá trình kết tinh sản phẩm

24

Bảng 3.5. Kết quả ảnh hưởng của thể tích dung môi ngâm nguyên liệu

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

17

ẠO

Bảng 3.4. Kết quả ảnh hưởng của phương pháp chiết xuất

TP

Bảng 3.3. Kết quả ảnh hưởng của dung môi chiết xuất

16

Bảng 3.9. Phổ 1H-NMR

29

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

Bảng 3.10. Phổ 13C-NMR

28

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

U Y

N

Bảng 3.1. Mối liên quan giữa mật độ quang và nồng độ naringin (µg/ml)

H

Ơ

Bảng 2.1. Danh mục hóa chất sử dụng

N

DANH MỤC CÁC BẢNG

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ

N

Hình 1.1. Công thức naringin

TP

nồng độ naringin

15

ẠO

Hình 3.3. Kết quả định tính hóa học nguyên liệu

G

Đ

Hình 3.4. Sắc ký đồ của dịch chiết nguyên liệu

16 21

H Ư

N

Hình 3.5. Ảnh hưởng của thời gian ngâm tới khối lượng sản phẩm và

15

hiệu suất chiết

26

Hình 3.7. Sắc ký đồ của sản phẩm

26

Hình 3.8. Phổ UV-VIS của naringin sản phẩm nồng độ 12 µg/ml trong

27

10 00

B

TR ẦN

Hình 3.6. Sản phẩm chiết naringin từ cùi bưởi

ethanol 96%

27

Sơ đồ 3.1. Sơ đồ quy trình chiết naringin từ cùi bưởi bằng aceton

25

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

Hình 3.9. Cấu tạo của naringin

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

Hình 3.2. Đường chuẩn biếu thị mối liên quan giữa mật độ quang và

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

H

U Y

ethanol 96%

14

N

Hình 3.1. Phổ UV-VIS của naringin chuẩn nồng độ 11,71 µg/ml trong

Ơ

2

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

ĐẶT VẤN ĐỀ Chi Citrus là một chi lớn thuộc họ Cam. Các cây thuộc chi này phần lớn

Ơ

N

là các cây ăn quả cung cấp các chất dinh dưỡng như vitamin C, acid citric

N

H

[3]...Ngoài ra, vỏ quả Citrus còn là nguyên liệu cho dược học cổ truyền với

U Y

các vị thuốc dân gian quen thuộc như: chỉ thực, chỉ xác, trần bì, thanh bì.

TP

dụng chữa bệnh của các flavonoid có trong vỏ quả Citrus. Các nghiên cứu đã

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

ẠO

tìm thấy sự có mặt của hơn 60 flavonoid trong vỏ của các loài trên, trong đó

Đ

có naringin [11]. Naringin là một flavonoid tìm thấy hàm lượng cao trong vỏ

N

G

quả loài bưởi với tác dụng như chống lão hóa, làm giảm cholesterol, ngăn

H Ư

ngừa cao huyết áp, giảm tai biến tim mạch, làm lành vết loét dạ dày, phòng

TR ẦN

chống ung thư và làm đẹp da [15], [20], [21] .

Hiện nay, nước ta vẫn phải nhập khẩu nhiều thuốc mà thành phần có chứa

10 00

B

naringin với giá cao. Với công nghệ trong nước hiện nay thì hoàn toàn có khả năng sản xuất được những thuốc đó từ nguồn nguyên liệu có sẵn. Như vậy,

A

nếu khai thác tốt nguồn nguyên liệu này, sẽ phục vụ tốt được nhu cầu trong

H

Ó

nước về thuốc có chứa hoạt chất naringin. Để cung cấp naringin nguyên liệu

Í-

đầu vào cho quá trình sản xuất thuốc đó, chúng tôi tiến hành đề tài “ Nghiên

-L

cứu chiết xuất naringin từ cùi bưởi (Citrus grandis L.)” với mục tiêu:

ÁN

1- Chiết xuất naringin từ cùi bưởi Citrus grandis L.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

2- Tinh chế, nhận dạng naringin có trong cùi bưởi.

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

Ngày nay, nhiều nghiên cứu trong nước và thế giới đã chứng minh tác

1

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

CHƢƠNG I. TỔNG QUAN 1.1. Vài nét về cây Bƣởi

Ơ

N

1.1.1. Tên gọi, vị trí phân loại

H

Citrus grandis (L.) Osbeck

.Q

Họ Cam (Rutacea), Chi Citrus [2], [3], [4].

TP

1.1.2. Đặc điểm thực vật

ẠO

Bưởi là loại cây ăn quả. Cây nhỡ cao từ 5-15 m, gai nhỏ mọc ở kẽ lá. Lá

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

có hình trứng hoặc bầu dục đấy tròn hoặc hình tim, mép lá nguyên hoặc xẻ

N

G

thùy nông, lấm tấm nhiều túi tinh dầu, cuống là có hình cánh tim ngược, rộng

H Ư

cỡ 7 cm.

TR ẦN

Hoa mọc đơn độc ở nách lá hoặc từng chùm vài bông hoa, hoa mẫu 5, cánh hoa trắng, nhị 25- 30, bầu noãn có 11-16 noãn. Quả mọng hình cầu hay

B

hình lê, đường kính 10-30 cm, màu vàng xanh nhiều túi tinh dầu, vỏ dày 1- 4

10 00

cm, múi to màu hồng hoặc vàng nhạt. Hạt vàng nhạt hoặc trắng, dẹt và có 1

A

phôi.

H

Ó

Bưởi được trồng ở khu vực Đông Nam Á, Trung Quốc, Nhật Bản, Ấn Độ,

Í-

các nước vùng Địa Trung Hải. Ở Việt Nam bưởi được trồng ở hầu hết các

-L

tỉnh. Những nơi nổi tiếng bưởi ngon: Đoan Hùng (Phú Thọ), Mê Linh (Vĩnh

ÁN

Phúc), Phúc Trạch, Hương Khê (Hà Tĩnh), Thanh Trà (Huế), Biên Hòa (Đồng

TO

Nai), Diễn (Hà Nội) [3], [4].

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

U Y

N

Tên gọi khác: Citrus maxima ( Burm.) và Citrus decumana L.

D

IỄ N

Đ

ÀN

1.1.3. Bộ phận dùng, trồng trọt -thu hái Hầu hết các bộ phận của cây bưởi ( quả, hoa, lá) đều có nhiều ứng dụng

trong thực phẩm, y học...Trong đề tài này sẽ tiến hành nhiên cứu với cùi bưởi ( phần trắng của vỏ bưởi) – chứa lượng lớn hoạt chất naringin.

Bưởi được nhân giống bằng hạt, ghép mắt và chiết cành. Ở Đông Nam Á và Việt Nam chủ yếu là phương pháp chiết cành [4].

2

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

1.1.4. Thành phần hóa học Trong phần ăn được (các tép bưởi) có chứa: nước (89%), protein(0,5%),

Ơ

N

lipid (0,4%), đường (9,3%), vitamin B1 (0,07%), viatmin B2 (0,01%) và

H

vitamin C (44%).

ẠO

Tinh dầu vỏ quả bưởi là chất lỏng màu vàng nhạt, mùi thơm, có hằng số:

N

%), terpenalcol (2,5%), sesquiterpenalcol (3%).

G

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

d30: 0,8417, aD30: +103,62o, nD30: 1,4702. Thành phần chính là limonen (90

H Ư

Tinh dầu vỏ bưởi Việt Nam có thành phần chính là limonen (41,45 - 84,62

TR ẦN

%), myrcen (8,28 - 50,66%). Các thành phần terpenalcol và aldehyd tồn tại ở hàm lượng rất thấp (<1%).

B

Hoa bưởi Việt Nam điều chế bằng phương pháp cất kéo hơi nước có thành

10 00

phần chính là nerolidol (30,91 - 40,04%), farnesol (14,30 - 23,47%), linalol

Ó

H

1.1.5. Công dụng

A

(9,22 - 23,76%) [4].

Í-

Ngoài công dụng là quả dùng để ăn tươi, vỏ quả và hạt bưởi là nguyên

-L

liệu để điều chế pectin, các hợp chất flavonoid.

ÁN

Hoa là nguồn khai thác tinh dầu đáng lưu ý ở Việt Nam, tinh dầu hoa bưởi

TO

dùng làm thơm bánh kẹo, nước giải khát, dùng trong kỹ nghệ sản xuất mỹ

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

TP

.Q

U Y

N

Vỏ có chứa tinh dầu 15%, pectin và các hợp chất flavonoid (4,67%). Trong đó naringin có hàm lượng cao. Flavonoid : Naringin (2,39%), hesperidin (0,03%), neohesperindin (0,03%), diosmin (0,01%),rutin (0,02%).

Hạt có chứa pectin. Hoa có chứa tinh dầu (0,01%).

1.2. Đại cƣơng về hoạt chất naringin 1.2.1. Công thức, tên khoa học

D

IỄ N

Đ

ÀN

phẩm. Lá bưởi dùng làm thuốc xông, nước thơm gội đầu [4].

3

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

OH

OH

HO O

O

O

N

HO

OH

O

OH

Tên

khoa

học:

7-((2-O-(6-Deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-

TP



.Q

Hình 1.1. Công thức cấu tạo của naringin

U Y

OH

HO

N

H

O

ẠO

glucopyranosyl)oxy)-2,3- dihydro-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-

Đ



Phân tử gam: 580,54 g/mol

TR ẦN

1.2.2. Tính chất vật lý

G

Công thức phân tử: C27H32O14

N



H Ư

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

1-benzopyran-4-on

Bột kết tinh không màu hoặc hơi vàng, không mùi, vị rất đắng.



Nhiệt độ nóng chảy: 171℃ [11], [14], [15].



Độ tan: Naringin không tan trong ether, benzen, cloroform. Tan

10 00

B



A

tốt trong các dung môi phân cực như ethanol, ethylacetat, aceton, nước

H

Ó

nóng, nhưng chỉ tan rất ít trong nước lạnh (1/2000 ở nhiệt độ 20 ℃ )

Í-

[10], [14], [16].

-L

1.2.3. Tính chất hóa học Tính acid yếu: Trong dung dịch kiềm loãng, naringin tạo muối phenolat

ÁN







Phản ứng với muối diazo: Phản ứng của hydro linh động với muối diazo tạo sản phẩm azoic màu đỏ.

D

IỄ N

Phản ứng cyanidin: Phản ứng khử nhóm carbonyl của nhân ɣ-pyron tạo anthocyan có màu.

Đ

ÀN

TO

tan trong nước.

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

H3C

Ơ

O



Phản ứng tạo phức: Phản ứng tạo phức chelat với muối kim loại nặng của nhóm carbonyl ở C4 và hydroxy ở C5 .

4

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn



www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Dễ bị oxy hóa: dễ bị oxy hóa bởi các tác nhân khử do có chứa 2 nhóm –OH gắn với nhân thơm [1].

Ơ

Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng naringin có tác dụng làm giảm

H



N

1.2.4. Tác dụng dược lý



Ức chế virus Sindbis neurovirulent .



Được sử dụng trong điều trị các tổn thương dạ dày.



Giảm độc tế bào.



Tăng cường quá trình trao đổi chất ethanol, giảm tác động tiêu cực của



ẠO

Đ

G N

TR ẦN

ethanol, tăng cường chuyển hóa lipid.

Là một chất ức chế aldose reductase có nghĩa là nó có thể giúp chống

B

bệnh võng mạc liên quan đến bệnh nhân tiểu đường.

Naringin có thể gây trở ngại cho một số loại thuốc như thuốc chẹn kênh

10 00



A

canxi, thuốc an thần, thuốc làm giảm cholesterol và estrogen [15], [20],

H

Ó

[21].

Í-

1.3. Một số nghiên cứu về chiết xuất naringin

-L

Vỏ bưởi được chiết bằng ethanol 96% theo phương pháp ngấm kiệt , dịch

ÁN

chiết bao gồm cả chất phân cực và ít phân cực, sau đó được cô tới cao đặc và

TO

loại tạp chất béo và chất ít phân cực bằng ether hoặc xăng vài lần, sau đó sản

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

Chống oxy hóa, chống ung thư ác tính.

TP



H Ư

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

cholesterol máu, làm giảm nguy cơ xơ vữa động mạch.

U Y

N

cholesterol, làm giảm LDL oxidation và có thể giúp ngăn ngừa tăng

D

IỄ N

Đ

ÀN

phẩm điều chỉnh pH trong môi trường nước acid chlohydric tới pH = 1 - 2, kết tinh lại trong dung môi ethanol, sấy và kiểm nghiệm thành phẩm. Hiệu suất 2,3%. Với quy trình này thì có sử dụng tới ether hoặc xăng là dung môi hữu cơ độc với môi trường nên gặp vấn đề kiểm soát dung môi hữu cơ khi áp dụng qui mô lớn [6], [7 ], [14].

5

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Với quy trình chiết xuất bằng nước nóng. Nguyên liệu sau khi chia nhỏ tới kích thước xác định, được ngâm với nước nóng, chiết 2 lần mỗi lần trong 30

Ơ

N

phút, vắt và ép dịch chiết qua vải lọc, dịch chiết được gộp lại sau đó đem cô

H

tới dịch. Hòa tan dịch thu được với ethanol 96% để sản phẩm pectin, dịch còn

U Y

N

lại đem cô tới cắn, sau đó hòa tan trong dung môi ethanol 96% - nước (1: 3),

TP

dung môi rẻ tiền, không độc hại nhưng có nhược điểm là dịch chiết rất nhớt,

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

cần có lượng nhiệt lớn khá tốn kém [7], [9], [12].

ẠO

rất khó lọc để thu sản phẩm pectin, bên cạnh đó để bay hơi hết dung môi nước

N

G

Với phương pháp chiết bằng methanol. Nguyên liệu đã chia nhỏ tới kích

H Ư

thước xác định được ngâm trong methanol sau đó thu lấy dịch chiết. Dịch

TR ẦN

chiết được cô tới cắn sệt, sau đó đem hòa tan trong nước nóng, đun cách thủy 15 phút , lắc với diclomethan gạn lấy lớp nước, cuối cùng để lạnh kết tinh, lọc

B

và thu sản phẩm. Hiệu suất 2,4%. Quy trình này cho sản phẩm sạch,hiệu suất

10 00

cao, tuy nhiên trong quy trình sử dụng nhiều dung môi độc hại, dễ cháy nổ,

A

khả năng bay hơi rất cao nên khó áp dụng trong quy mô lớn, chủ yếu sử dụng

H

Ó

trong quy mô phòng thí nghiệm [23].

Í-

Quy trình chiết vỏ bưởi bằng dung môi kiềm. Nguyên liệu sau khi xử lý,

-L

được ngâm với vôi sữa (CaO trong nước), hoạt chất có tính acid yếu nên dễ

ÁN

tan trong kiềm. Thu dịch chiết điều chỉnh về pH tới 2 bằng acid chlohydric,

TO

khi pH acid thì hoạt chất sẽ nằm dạng phân tử khó tan nên dễ kết tinh. Sau đó

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

sản phẩm sau đó kết tinh đem lọc và sấy khô. Hiệu suất 1,7%. Quy trình này

D

IỄ N

Đ

ÀN

sản phẩm được lọc và tiếp tục hòa tan trong dung dịch ethanol 96% ( tỷ lệ ethanol: nước= 1: 3) để kết tinh và thu sản phẩm.Hiệu suất 0,6%. Quy trình này, có ưu điểm không dung dung môi hữu cơ độc hại, dung môi rẻ tiền, tuy nhiên quy trình này cho hiệu suất chiết rất thấp [5], [13].

Một số sản phẩm chứa naringin trên thị trường kết hợp với vitamin C và hesperidin như: Swanson Naringin 500 mg, Hi-Potency Vitamin C &

6

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Bioflavonoids Complex, NOW Citrus Bioflavonoid, Vitamin C and Bioflavonoid Hypoallergenic Dietary Supplement… Các sản phẩm trong 1

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

ẠO

TP

.Q

U Y

N

H

Ơ

N

viên chứa ≤ 150 mg naringin.

7

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

CHƢƠNG II. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Ơ

N

2.1. Nguyên vật liệu

H

2.1.1. Nguyên liệu

U Y

N

Vỏ Bưởi được thu gom tại khu vực Bắc Từ Liêm - Hà Nội, vào tháng 12.

TP

ngoài), sấy ở nhiệt độ 60 – 70℃ trong 24 giờ, xay thành bột thô. Đóng túi kín

G

Naringin chuẩn (Viện nguyên liệu): Số lô 77162, số kiểm soát VDL-

Hóa chất

TR ẦN



H Ư

CC-Naringin-11, hàm lượng: 95%.

N



Đ

2.1.2. Hóa chất, thiết bị

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

Nơi sản xuất

Tiêu chuẩn

n-butanol

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

2

Acid acetic

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

3

Nước cất

Việt Nam

DĐVN IV

4

Dung dịch sắt (III) chlorid

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

5

Ethanol 96%

Việt Nam

DĐVN IV

6

Aceton

Việt Nam

DĐVN IV

TO

ảng 2.1. Danh mục hóa chất sử dụng

7

Acid chlohydric

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

8

Ethyl acetat

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

9

Than hoạt

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

10

Chloroform

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

11

Acid sunfuric đậm đặc

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

12

Natri hidroxyd

Trung Quốc

Tinh khiết hóa học

Tên hóa chất

1

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

STT

ÀN Đ IỄ N D

ẠO

bảo quản ở điều kiện phòng để nghiên cứu.

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

Vỏ quả Bưởi sau khi mua về được loại bỏ mốc, bỏ phần chứa tinh dầu (vỏ

8

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Thiết bị:



Cân phân tích Sartorius TE 214S (Anh)



Máy xác định hàm ẩm Sartorius, MA – 45 (Anh)



Tủ sấy Memmert (Đức)



Máy quang phổ UV-VIS Hitachi (Nhật Bản)



Máy đo nhiệt độ nóng chảy



Máy cô quay chân không Buchi (Thụy Sĩ)



Máy đo phổ hồng ngoại Impact 410 nicolet



Máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân: Avance 500 - Bruker



Máy soi UV Speccord 40 (Đức)



Máy đo pH Mettler Toledo (Thụy Sỹ)



Các dụng cụ phòng thí nghiệm khác.

Ơ H N

B

Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng tới quy trình chiết xuất citroflavoid từ cùi

10 00

bưởi: dung môi chiết xuất, phương pháp chiết xuất, thể tích dung môi

A

chiết, thời gian chiết, số lần chiết, pH của dung dịch kết tinh.

Xây dựng quy trình chiết naringin từ cùi bưởi mẻ 100 g.



Kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm.

Í-

H

Ó



-L

2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu

ÁN

2.3.1. Phương pháp xác định hàm ẩm

TO

Xác định bằng máy xác định hàm ẩm

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

U Y .Q TP ẠO

Đ

G N

H Ư

2.2. Nội dung nghiên cứu 

N



TR ẦN

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

D

IỄ N

Đ

ÀN

Chuẩn bị khoảng 1 g mẫu thử xác định hàm ẩm.

2.3.2. Phương pháp định tính naringin trong nguyên liệu cùi bưởi Định tính naringin trong nguyên liệu cùi bưởi sơ bộ bằng phản ứng hóa học và sắc ký lớp mỏng.

9

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn



www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

Phản ứng hóa học:

Tiến hành: cân 1 g nguyên liệu, đun cách thủy với 5 ml ethanol 96% trong

Ơ

Phản ứng cyanidin: thêm ít bột Mg vào, sau đó tiếp tục thêm 2 ml

H

U Y

Phản ứng với FeCl3: cho thêm vào ống nghiệm vài giọt FeCl 3. Quan

.Q



N

acid HCl 5% vào. Quan sát hiện tượng.

Phán ứng H2SO4 đậm đặc: thêm vào ống nhiệm vài giọt H 2SO4 đậm

ẠO



TP

sát hiện tượng.

Đ

Phản ứng với NaOH: thêm vào ống nghiệm vài giọt NaOH 1N. Quan

G



N

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

đặc. Quan sát hiện tượng.

TR ẦN

Sắc ký lớp mỏng:

Pha động: n-butanol: acid acetic: nước = 4: 1: 5 (tl/tl).



Pha tĩnh: Bản mỏng silica gel 60 F254 hoạt hóa ở 1100C trong 30 phút.



Dung dịch đối chiếu: Dung dịch chuẩn naringin có nồng độ khoảng

B



10 00



H Ư

sát hiện tượng [2], [22].

Ó

Dung dịch mẫu thử: lấy khoảng 0,5 g mẫu thử đun với 4ml ethanol

H



A

0,2 mg/ml pha trong ethanol 96%.

Chấm riêng biệt lên bản mỏng khoảng 10 µl dịch chiết dịch chiết mỗi

-L



Í-

96% trong 15 phút, lọc, thu được dung dịch chấm sắc ký.

ÁN

mẫu. Tiến hành triển khai sắc ký, lấy bản mỏng ra khi chạy 8cm, để

TO

khô. Soi bằng đèn tử ngoại ở bước sóng 254 nm [5], [8], [16].

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú



N

15 phút, lọc dịch chiết chia vào 5 ống nghiệm để làm các phản ứng sau.

D

IỄ N

Đ

ÀN

2.3.3. Phương pháp định lượng naringin Định lượng bằng phương pháp đo quang phổ UV-VIS, xác định sơ bộ

hàm lượng citroflavonoid có trong mẫu thử [8]. 

Nguyên tắc: Naringin hấp thụ mạnh ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 283-284 nm [2].

Do vậy, có thể xác định hàm lượng của citroflavonoid toàn phần trong

10

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

nguyên liệu và sản phẩm tính theo chất chuẩn naringin bằng phương pháp đo quang phổ UV-VIS. Tiến hành:



Chuẩn bị mẫu chuẩn

H

Ơ

N



U Y

N

Cân chính xác khoảng 15 mg naringin đối chiếu vào bình định mức 25

TP

vừa đủ tới vạch thu được dung dịch chuẩn gốc.

ẠO

Từ dung dịch chuẩn gốc pha dung dịch có nồng độ tương ứng 8, 10, 12,

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

16, 20, 24 (µg/ml) xây dựng đường chuẩn. Đo độ hấp thụ tại bước sóng 283

N

Chuẩn bị mẫu thử

H Ư



G

nm, mẫu trắng là ethanol 96%.

TR ẦN

* Chuẩn bị mẫu thử chiết từ nguyên liệu cùi bưởi Cân 2,5 g bột nguyên liệu cho vào giấy lọc, gấp lại, rồi cho vào bình

B

Soxhlet. Chiết với n-hexan trong 3 giờ, lấy túi lọc nguyên liệu ra để bay hơi

10 00

hết n-hexan ở nhiệt độ phòng rồi cho vào bình Shoxlet chiết tiếp với ethanol

A

96% trong 3 giờ. Dịch chiết thu được chuyển vào bình cất quay và đem cô

H

Ó

dưới áp suất giảm đến cắn. Hòa cắn trong 50 ml ethanol 96% rồi chuyển

Í-

sang bình định mức 100 ml. Rửa bình cầu 2-3 lần, mỗi lần khoảng 10 ml

-L

ethanol 96%, sau đó thêm vừa đủ ethanol 96% tới vạch. Hút chính xác

ÁN

khoảng 1ml dịch thu được cho vào bình định mức 50 ml. Thêm ethanol 96%

TO

vừa đủ tới vạch và lắc đều thu được dung dịch thử. Đo độ hấp thụ tại bước

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

ml, thêm khoảng 15 ml ethanol 96% hòa tan, sau đó bổ sung ethanol 96%

D

IỄ N

Đ

ÀN

sóng 283 nm, mẫu trắng là ethannol 96%. * Chuẩn bị mẫu thử từ sản phẩm của quá trình chiết xuất Cân chính xác 1 lượng sản phẩm tương đương khoảng 15 mg naringin vào bình định mức 25 ml, thêm khoảng 15 ml ethanol 96% để hòa tan, sau đó thêm ethanol 96% vừa đủ tới vạch. Hút chính xác khoảng 2 ml dung dịch

11

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

thu được vào bình định mức 100 ml, thêm ethanol 96% vừa đủ tới vạch, lắc đều. Đo độ hấp thụ tại bước sóng 283 nm, mẫu trắng ethanol 96%.

Ơ H

Hàm lượng citroflavonoid toàn phần trong mẫu thử:

TP

Trong đó:

ẠO

X%: hàm lượng phần trăm citroflavonoid toàn phần trong mẫu thử.

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

CT: nồng độ mẫu thử tính theo phương trình đường chuẩn (µg/ml).

N

TR ẦN

mT: khối lượng mẫu thử (g).

H Ư

b: hàm ẩm của mẫu thử (%).

G

a: hàm lượng naringin chuẩn (%).

VT: thể tích của dung dịch thử (ml).

B

AT: mật độ quang của dung dịch thử và chuẩn.

Hiệu suất chiết citroflavonoid toàn phần

-L

Trong đó:

Í-

H

Ó

A



10 00

fT: hệ số pha loãng của dung dịch thử và chuẩn.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

C: nồng độ mẫu thử tính theo phương trình đường chuẩn (µg/ml). a: hàm lượng chuẩn naringin (%).

V: thể tích dung dịch mẫu thử (ml).

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

.Q

U Y

N



N

- Công thức tính toán:

f: độ pha loãng mẫu thử. m: khối lượng vỏ bưởi đem chiết (g) c: hàm ẩm nguyên liệu khi đem chiết (%).

X: hàm lượng citroflavonoid toàn phần (%).

12

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com

2.3.4. Phương pháp chiết xuất Cân khoảng 50 g nguyên liệu, cho vào bình chiết, thêm dung môi. Sau

Ơ

N

thời gian thu dịch chiết, sau đó cô thu hồi dung môi đến cắn, hòa tan cắn

H

trong 50 ml ethanol 96%, lọc. Dịch lọc ethanol tiếp tục cô đến cắn, hòa tan

.Q

lọc, sấy được sản phẩm.

TP

2.3.5. Xác định cấu trúc sản phẩm

ẠO

 Phản ứng định tính hóa học: xác định sự có mặt của flavonoid trong sản

Đ

www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com

phẩm thu được sau khi chiết xuất (tương tự phần định tính trong

N

G

nguyên liệu 2.3.1).

H Ư

 Sắc ký lớp mỏng: xác định sơ bộ tính tinh khiết của flavonoid thu được,

TR ẦN

kết luận sơ bộ về flavonoid có thể là naringin hay không so với vết chuẩn naringin về Rf (tương tự phần định tính nguyên liệu 2.3.1).

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

 Đo phổ UV-VIS, IR, NMR để chứng minh cấu trúc naringin.

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú

U Y

N

cắn trong 30 ml nước nóng, lọc, thêm 10 ml ethanol 96% . Để kết tinh lạnh,

13

Giới thiệu trích đoạn bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial