ANVISA - Guia de Controle de Qualidade

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2.7.2.1.2. Princípio O Rf (fator de retenção, fator de retardamento ou frente relativa) da amostra é comparado ao Rf do padrão na cromatografia em camada delgada.

2.7.2.1.3. Descrição do Método Eluente 1: tolueno - acetato de etila (93:7 v/v) Eluente 2: propanol - ácido acético glacial (95:5 v/v) Eluente 3: acetato de etila - metanol - solução aquosa de hidróxido de amônio a 28% (p/p) (65:30:5 v/v/v) Revelador 1: dissolver 1 g de vanilina em ácido sulfúrico concentrado para 100 ml. Revelador 2: dissolver 1,5 g de anisaldeído em 50 ml de ácido acético e adicionar 2 ml de ácido sulfúrico concentrado.

a) Preparo da solução padrão Pesar 1 g do padrão de cada filtro em um balão volumétrico de 100 ml e completar com metanol. b) Preparo da amostra Pesar 1 g da amostra a ser analisada em um balão volumétrico de 10 ml e completar o volume com metanol. Colocar a amostra em banho de ultra-som por dez minutos para a sua dissolução. Filtrar através de papel de filtro contendo 0,25 g de sulfato de sódio anidro. c) Procedimento Aplicar 10 μl de cada solução padrão e 5 µL de cada amostra preparada em uma placa de sílica gel G 25 com indicador fluorescente F254 com espessura de 0,25 mm e dimensão de 20 x 20 cm. Para eluir, colocar em uma cuba previamente preenchida com nitrogênio e saturada com o eluente 1, eluente 2 ou eluente 3 (ver tabela do item d). Aguardar até que a fase móvel percorra 15 cm da linha base em temperatura ambiente e ao abrigo da luz. Remover a placa e secar sob nitrogênio em temperatura ambiente.

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PARTE 2


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