Roteiro de Aula Prática Carla Joseane Sorge - Bolsista do PIBIDCiências Professora da Escola e Supervisora do PIBID – Prof.ª Marisa Both Professor Coordenador do Sub-Projeto – Prof° MSc. Roque Ismael da Costa Güllich 1. 2. 3.
Título da Aula: Extração de DNA da banana Objetivo: Extrair o DNA da banana que pode ser visualizada a olho nu. Materiais: - 1 banana. - Água filtrada - Copo de medidas (500mL) - Álcool etílico gelado (100ml) - Almofariz - Peneira - Cloreto de sódio (sal de cozinha, 10g) - Detergente de cozinha neutro (20ml) - Espátula de madeira - Copo de plástico
4.Procedimentos: a) Macerar a banana com o socador até formar uma pasta; b) No copo de medidas, adicionar a água, o sal e o detergente e misturar; c) Acrescentar à solução a pasta de banana; d) Coar toda a mistura com a peneira, mexendo com a espátula de madeira; e) Retirar a peneira e adicionar o álcool lentamente pela parede do copo; f) Após isso, as moléculas de DNA se agruparão, permitindo a sua visualização a olho nu como um emaranhado de fios esbranquiçados; 5. Observações: - Adicionado na etapa 2, o detergente tem a função de romper a bicamada lipídica que está na membrana celular. Com a destruição dessa camada pelo detergente, o citoplasma é liberado e permanece no suco diluído. - A adição do sal (NaCl) no início da experiência proporciona um ambiente favorável para a extração, pois o sal, depois de dissolvido na água, se dissocia e contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do grupo fosfato do DNA. As moléculas de DNA passam a não sofrer repulsão de cargas entre si, o que favorece sua aglomeração. - O álcool gelado, além de proporcionar uma mistura heterogênea (duas fases), em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada. 6. Atividade proposta: - Após o experimento, seria proposta a escrita de um relatório, no qual deveria conter as observações dos alunos e suas conclusões a respeito do mesmo. 7. Anexos
Figura 1: Extração de DNA da banana (filamentos esbranquiçados).
Figura 2: Realização do experimento com os alunos.