DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
ANÁLISIS POR
CUALITATIVO
ESPECTROSCOPÍA
Y
CUANTITATIVO
INFRARROJA-USO
EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
PROCEDIMIENTO Se debe encender el aparato ~15 minutos antes de realizar cualquier medida y se conectará al ordenador cargado con el programa (si no se encuentra ya conectado).
Para el análisis se selecciona el programa MicroLab en el icono
,
donde se abre una ventana para introducir el usuario y contraseña Usuario: XXXX Contraseña: XXXX
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 2 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
!!!!!! Comprobar que el estado es: Listo Se escoge el tipo de método deseado según el tipo de análisis que queramos realizar (aparece siempre el último tipo de método utilizado) (Clic) Algún método ya guardado Cualitativo_biblioteca1: se utiliza para comparar el pico obtenido con los datos guardados en la biblioteca recoge_datos_abs: seleccionando este otro los picos salen hacia arriba r e c o g e _ d a t o s _ t r a n s m : seleccionando este método los picos s a l e n h a c i a a b a j o
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 3 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Imaginemos que se preparan 5 patrones de etanol de porcentajes entre el 10% y el 50% y que vamos a determinar el porcentaje de etanol en una muestra de aguardiente. El procedimiento sería idéntico para cualquier otra determinación. Seleccionar recoge_datos_abs
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 4 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
el análisis
con un algodón o hisopo de algodón empapado en un disolvente adecuado (acetona, metanol, etanol o alcohol isopropílico), en este caso con etanol absoluto
Seguir las instrucciones que vaya dando el programa y pulsar según completando
se
vayan
Observar que la prensa ha de estar en su posición más elevada si es un líquido. Sólo ha de estar en contacto con la muestra cuando se trate de sólidos
Perilla de la prensa de muestra
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 5 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
El programa verifica que el cristal está efectivamente limpio, si no es así, dará un aviso y habría que volver a limpiar para que la recopilación del espectro de fondo sea precisa
No es necsario preparar un blanco. El progrma recoge un fondo con CO2 ambiental y humedad (agua) que pueda haber en la cubeta de muestra, para posteriormente restarlo del espectro obtenido
Con una pequeña gota colocada en la cubeta es suficiente. Se puede depositar con la micropipeta
Se comenzará con el patrón de menor concentración (10%), y se irán midiendo de menor a mayor
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 6 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Se realiza un pre-‐espectro
Se le puede dar un nombre a la muestra para luego poder identificarla más fácilmente en la base de datos
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 7 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Se obtiene el espectro de absorbancia de la muestra
Desde aquí se puede ir al programa
(Resolutions Pro) que permite trabajar con los datos y calcular las áreas, necesarias para realizar la curva de calibrado de los patrones
Si no se le ha dado nombre a la muestra se le puede dar ahora
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 8 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Se abre la siguiente pantalla con el espectro de absorbancia de la muestra medida. Nota: Si no se ve ningún espectro es porque está fuera de escala, esto se soluciona pulsando
(Autoescalar XY)
Se selecciona el pico del que se desea conocer el área…
!
Buscar picos
…manteniendo la sensibilidad que aparece por defecto (1)
Pulsar ok. De esta forma aparece el área de los picos Pico del metanol (~1044)
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 9 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Una vez localizado el pico de interés -‐que para el caso del metanol estará entre 1010 y 1060-‐ se amplía el mismo seleccionado el área a ampliar con el ratón
"
Se lleva el cursor del ratón al ”pico” del pico hasta que aparece el símbolo de una “campana de Gauss”, y al clicar ya aparece el área seleccionada
El área seleccionada se amplía o reduce con el ratón hasta donde interese (normalmente ya viene marcada por defecto)
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 10 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Y se anota el dato obtenido del área para poder trazar posteriormente la recta patrón en Excel
Se minimiza o cierra la ventana de este programa para poder volver al MicroLab y continuar con el análisis de los siguientes patrones de etanol en orden creciente: 20% ! 30% ! 40% y ! 50% Las muestras problema se analizan de igual forma, haciendo 3 réplicas de cada una y anotando el área, para interpolarla en la recta patrón obtenida en Excel.
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 11 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Una vez medidos todos los patrones y las muestras, finalizar el programa
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 12 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
DETERMINACIÓN CUALITATIVA La determinación cualitativa es más sencilla operativamente que la cuantitativa, y como ya se ha visto, el programa va dando todas las instrucciones a seguir.
Se abre el programa
Se introduce el usuario y contraseña (Usuario: XXXX Contraseña: XXXX)
Se selecciona Cualitativo_biblioteca1
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 13 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
con un algodón empapado en etanol absoluto
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 14 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Si la muestra es líquida o una pasta, colocar una pequeña gota con la micropipeta
Perilla de la prensa de muestra Girar en el sentido de las agujas del reloj para bajarla, y al contrario para subirla Evitar su uso en muestras filosas o puntiagudas
Si la muestra es sólida, se deposita con la ayuda de una espátula una pequeña cantidad que sea suficiente para cubrir toda el área de superficie del cristal de diamante, y se cierra la prensa girando el tornillo hasta que la punta entre en contacto con la muestra y llegue a la posición de bloqueo (se oye un “clic”). En ese momento no conviene continuar apretando porque el mecanismo se puede pasar de rosca
Se le puede dar nombre a la muestra
Se realiza el espectro
Prensa elevada
Prensa en contacto con la muestra sólida
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 15 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
El programa compara el espectro obenido con los que hay guardados en la biblioteca para averiguar de qué sustancia se trata. Automáticamente ya hace la comparción y nos muestra los compuestos o sustancias en orden de mayor a menor concordancia.
Tras la medición y limpiar el cristal, se pueden seguir midiendo otras muestras o terminar, salir del programa y apagar el equipo
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 16 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
Una vez medidas todas las, finalizar el programa
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 17 de 18| P á g i n a
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE UN
COMPUESTO ORGÁNICO POR ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA
USO EQUIPO CARY 630 ATR-FTIR
BIBLIOGRAFÍA # http://centros.edu.xunta.es/iesasardineira/moodledata/2/personal/archivos/instrumental/ir.php # Guía del usuario del espectrómetro Agilent Cary 630 FTIR http://centros.edu.xunta.es/iesasardineira/moodledata/2/personal/archivos/instrumental/ir/cary630 _manual.pdf
# http://www.ecured.cu/index.php/Espectroscopia # http://www.espectrometria.com/espectrometra_infrarroja # http://es.wikibooks.org/wiki/Espectroscopia # http://www.sinorg.uji.es/Docencia/FUNDQO/TEMA9FQO.pdf # http://es.wikipedia.org/wiki/Radiaci%C3%B3n_infrarroja # http://www.ehu.es/imacris/PIE06/web/IR.htm # http://pq-‐311-‐organica.blogspot.com.es/2011/06/fundamentos-‐y-‐aplicaciones-‐de-‐la.html # http://erikrz.wordpress.com/2010/09/09/el-‐espectro-‐electromagnetico/ # http://www.uv.es/gammmm/Subsitio%20Operaciones/6%20Calibracion.htm # FDS Etanol http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Ficheros/0a100/ns pn0044.pdf
Begoña Castro Löehmann /Mariano Pazos Afonso 18 de 18| P á g i n a