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Centro de Biotecnología, Vol. 4 Nro. 1. 2015 Nishikawa et al. (2015); PRESENCIA O AUSENCIA DE MAÍZ MODIFICADO GENETICAMENTE EN LAS ESPECIES QUE SE CULTIVAN EN LOJA

fotografió con ENDURO Gel Documentation Systems (Labnet International Inc.).

Resultados y Discusión Primers

para la detección de maíz modificado

geneticamente

El volumen de reacción de 25 µl contenía 75 ng de ADN genómico, 0,3 µM de cada primer (Fw and Rv), 1,5 mM MgCl2, 0,2 mM dNTPs y 1,0 unidad de ADN polimerasa GoTaq (Promega). Las reacciones fueron amortiguadas por la adición del tampón GoTaq Flexi (Promega). La amplificación se realizó en un termociclador MultiGene (Labnet International Inc.) de acuerdo con el siguiente programa para la amplificación: Pre-incubación a 95 oC durante 5 minutos; 35 ciclos de denanaturalización a 95oC durante 30 segundos, hibridación a 60oC durante 30 segundos y extensión a 72oC durante 30 segundos; seguido de una extensión final a 72oC durante 10 minutos (Matsuoka et al., 2001). Electroforesis en gel de agarosa Del producto del PCR se tomaron de 3,5 - 4 µl de cada mezcla de reacción para la realziacion de la electroforesis a un voltaje constante de 120 V en un gel de agarose al 1,5 % suplementado con SyberSafe (Invitrogen) a una concentración recomendada por el fabricante de 0,5x TBE tampon (445 mM Tris base, 445 mM ácido bórico y 10 mM EDTA). El gel se Centro de Biotecnología pp 06 – 13

El objetivo principal de la modificación genética en plantas es (i) la simplificación del trabajo en el campo debido a la reducción de la tarea de deshierbe y desinfección y (ii) la reducción de la cantidad de insecticida y herbicida. En el primer caso se realiza la introducción del gen resistente a los herbicidas. Un método consiste en introducir una mutación puntual en 5-enolpiruvil-shikimato-3-fosfato sintasa (EPSPS), la proteína diana para la acción de los herbicidas, para producir la planta resistente a herbicidas. La enzima EPSPS sólo existe en la célula vegetal, y participa en la biosíntesis de aminoácidos aromáticos. Cuando la enzima es inactivada, la deficiencia de aminoácidos aromáticos se introduce en el cuerpo de la planta, y las plantas muestran eventualmente síntomas de transformación (Steinrucken and Amrhein, 1980) (Malik et al., 1989). La otra es la introducción de un gen (pat) para inactivar los herbicidas. El gen pat derivado de la bacteria del suelo, Streptomyces viridochromogenesis, expresa una enzima que inactiva el herbicida (Thompson et al., 1987) (Wehrmann et al., 1996) (Gonzalez-Moro et al., 2000). En el segundo caso, el gen se introduce para expresar la proteína Cry. Ya se sabe que Cry es la endotoxina de la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis, y tiene la actividad insecticida contra los parásitos y bacterias parasitarias de los cereales. Por lo tanto, Bacillus thuringiensis que expresan “toxina Cry”, comúnmente se ha utilizado como plaguicida biológico contra las polillas, etc en campos (Dinon et al., 2011). La tolerancia a herbicidas, resistencia a las plagas o los dos de ellos se han introducido en el maíz, así como legumens como la soja (Figura 3). Por ejemplo, en MON que es el maíz resistente a insectos, cryIA y hsp70 (exISSN: 1390-7573

Revista de Biotecnologia  

Revista científica sobre temas de biotencología de plantas, animales y microorganismos, cuyo objetivo es dar un enfoque multidisciplinario e...

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