Issuu on Google+

ERAUZKETA ESKEMA MATERIALAK: ● Ur epela ● Zentrifugadora ● Pipetak ● Praktika ontziak ● Etanola ● Alkohola ● Lysis soluzioa ● Gatz kontzentratu soluzioa ● Buffer resuspension ● Hondarra ● PAUSOAK: 1. Zelulak jaso 2. Zelulak hautsi hauek ikusteko 3. DNA eta proteinak banatu 4. DNA isolatu 1. Ahoaren muestra bat hartu. Honi eker ahoan dauden zelula txiki batzuk lortuko ditugu, eta praktika ontzi batean sartuko ditugu. 2.

Isys soluzia gehituko diogu, eta ondoren ur epelan sartuko dugu ontzia. Botatako Isys soluzioa bi gauza garrantzitsu ditu: detergentea eta K proteinak deitzen diren entzimak. Detergentea zelulak eta nukleoa aztoratzen ditu, eta hauek irekitzen dira ADN-a agerian utziz. ADN-a “histones” proteinekin bilduta daude eta K proteinak “histones” mozten dituzte ADN-a aske utziz.

3. Ontzia ur epeletik ateratzen dugu eta gatzaren soluzio kontzentratua gehitzen diogu. Horren ondorioz proteinak eta zelulak beraien artean elkartzen dira. Ondoren, ontzia zentrifugadoran sartzen dugu. Han ontzia birak abiadura oso handian emango ditu. Proteinak eta zelulak ontziaren behealdera prezipitatuko dira eta ADN-a likidoan nahastuta egongo da oraindik. Gerora, pipeta erabiliko dugu ontzian ADN-a dagoen likidoan hartzeko eta beste ontzi berri batera pasako dugu, horrela proteinak etra zelulak ontziaren behealdean utziko ditugu. 4. Ontzi berri honi alkola gehituko diogu eta pixka bat mugituko dugu. Horrela ADN-a alkolarekin nahastuko da. ADN-a alkolarekin disolbagarria ez denez, ADN-a prezipitatuko da. Ondorioz, ADN-a begi bistan egongo da. Berriro zentrifugadoran sartuko dugu, eta birak emango ditu abiadura handian. Horren emaitza, ADN-a ontziaren behealdean prezipitatzea izango da. Ontzian dagoen likidoa kenduko dugu ontzitik bakarrik ADN-a geratu dezan. ADN-a izanda nahi duzun soluzioan erabili ahal izango duzu, ozkailuan gorde urte askotan edo hurrengo hurrengo praktika batean erabiltzeko.


Unai iñakirauzketa eskema