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Bacterias coliformes y «Escherichia coli» (E.coli) según UNE EN ISO 9308-1:2000. La Norma describe la realización del análisis por filtración en membrana y comprende dos partes, la primera incluye un ensayo estándar de referencia y la segunda un ensayo rápido opcional. El ensayo estándar consiste en incubar la membrana en un medio selectivo y caracteriza con pruebas bioquímicas las colonias lactosa-positivas, lo que perite detectar y recontar bacterias coliformes y E.coli en 2-3 días. Como medio selectivo se utiliza Agar de Lactosa TTC con heptadecilsulfato de sodio. La oferta de Panreac para este medio incluye las siguientes preparaciones: Medio deshidratado 414955.1210 Chapman TTC (Tergitol 7), Agar (Medio Deshidratado) CULTIMED 414955.0914 Chapman TTC (Tergitol 7), Agar (Medio Deshidratado) CULTIMED

500 g 5 kg

Placa preparada para filtración de membrana 424955.0922 Tergitol 7, Agar (Chapman TTC modificado) (Placa Preparada (Ø 55 mm) y filtro) CULTIMED 444955.0922 Tergitol 7, Agar (Chapman TTC modificado) (Placa Preparada (Ø 55 mm)) CULTIMED

30 placas y filtros 30 placas

Placa preparada 90 mm 454955.0922 Tergitol 7, Agar (Chapman TTC modificado) (Placa Preparada (Ø 90 mm)) CULTIMED

20 placas

El ensayo rápido que consiste en 2 etapas de incubación , permite la detección y el recuento de E. Coli en 21 +/3 horas, se utilizan los siguientes medios: En primer lugar se incuba la membrana, a 36ºC±2ºC durante 4-5 horas en Agar triptonado de soja (TSA) Medio deshidratado 413819.1210 Soja Triptona (TSA), Agar (Medio Deshidratado) CULTIMED 413819.0914 Soja Triptona (TSA), Agar (Medio Deshidratado) CULTIMED Placa preparada 433819.0922 Soja Triptona (TSA), Agar (Placa de Contacto) CULTIMED 453819.0922 Soja Triptona (TSA), Agar (Placa Preparada (Ø 90 mm)) CULTIMED Frasco preparado 493819.0922 Soja Triptona (TSA), Agar (Frascos Preparados) CULTIMED

500 g 5 kg

30placas 20placas

10 x 100 ml

Posteriormente la misma membrana se incuba a 44ºC ± 0,5ºC durante 19 a 20 horas en el medio Agar triptonado de sales biliares (TBA). Este medio estará en breve disponible dentro de la oferta Cultimed de Panreac. Para la confirmación de E. Coli se realizan las pruebas de oxidasa y producción de indol. La resiembra de las colonias sobre agar no selectivo, TSA y en caldo de cultivo de triptófano, de próxima incorporación.


Para las pruebas bioquímicas establecidas en la norma ISO se recomiendan los siguientes reactivos: Reactivo de Kovacs para el ensayo del indol, ensayo estándar 252908.1608

Reactivo de Kovacs DC para detección de indol

100 ml Bot. Vidrio

Reactivo de indol, ensayo rápido Composición. p-dimetilaminobenzaldehido ...................................0,5g Acido clorhídrico, c(HCl)= 1mol/l ........................100 ml 131293.1606 181021.1211

4-(Dimetilamino)benzaldehído (Reag. Ph. Eur.) PA-ACS Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV

25g 1000 ml

Reactivo de la oxidasa Composición: Hidrocloruro de tetrametil-p-fenilendiamina...........0,1g Agua destilada.....................................................10 ml (Reactivo no estable que debe prepararse antes de usar) Se puede preparar a partir de (A15853 N,N,N’,N’-tetrametil-p-fenilendiamina 98%+10g) que habrá que acidificar con ácido clorhídrico para obtener el hidrocloruro.

Oficinas Centrales: C/ Garraf, 2 Polígono Pla de la Bruguera E-08211 Castellar del Vallès (Barcelona) España Tel. (+34) 937 489 400 Fax (+34) 937 489 401 e-mail: central@panreac.com www.panreac.com

Dpto. Ventas España y Portugal: Tel. (+34) 902 438 439 Fax (+34) 937 489 494 e-mail: iberia@panreac.com Export Dpt.: Tel. (+34) 902 438 439 Fax (+34) 937 489 495 e-mail: export@panreac.com

Delegación Centro Madrid C/ Sierra de Guadarrama, 36 E-28830 San Fernando de Henares (Madrid) España Tel. (+34) 916 566 412 Fax (+34) 916 764 750 e-mail: centro@panreac.com


Coliformes y E.coli