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FLORA NORMAL Y PATOGENA DE VIAS RESPIRATORIAS AUTORES DOCENTES MICROBIOLOGIA

CLAUDIA FAJARDO URIBE MARCELA GOMEZ GARZON ADRIANA JIMENEZ ROJAS PATRICIA TRUJILLO ROMAN


Práctica # 14

FLORA NORMAL Y PATOGENA DE LAS VIAS RESPIRATORIAS

OBJETIVO DE LA PRÁCTICA: Conocer los microorganismos que forman parte de la Flora normal y patógena de las Vías Respiratorias Identificar en el laboratorio las bacterias frecuentemente asociadas a patología en el tracto respiratorio. Reconocer los diferentes tipos de muestras para el diagnóstico de neumonía bacteriana. Aprender a solicitar e interpretar las pruebas de laboratorio que sirven de apoyo diagnostico en las infecciones respiratorias

INTRODUCCION Como en otras superficies del cuerpo, diversos microorganismos viven sin lesionar el tracto respiratorio superior ni la orofaringe. Colonizan la nariz, boca, faringe y cavidad oral, haciendo parte de la flora normal de las vías respiratorias: Streptococcus viridans, Staphylococcus epidermidis, Moraxella catharrallis, Corynebacterium sp, Neisseria, espiroquetas entre otros.


FLORA NORMAL DE VIAS RESPIRATORIAS ALTAS

VIA AEREA    

CONJUNTIVA

Streptococcus viridans group Streptococcus milleri group Mycoplasma sp Haemophilus influenzae (no capsulado)

          

    

Moraxella catarrhalis Eikenella corrodens Actinomyces sp Actinobacillus actinomycetemcomitans Haemophilus aphrophilus Kingella sp Corynebacterium sp Staphylococcus coagulasa negativo Spiroquetas Leptotrichia Roynia dentocarios

  

Staphylococcus epidermidis Lactobacillus sp Propionibacterium acnes

Wollinella Stomatococcus Campylobacter sp Neisseria sp Anaerobios: Veillonella, Prevotella, Porphyromonas, bacteroides fragilis group, Peptoestreptococcus, Fusobacterium, Actinomyces

OIDO

  

Staphylococcus aureus Propionibacterium acnes Enterobacterias


Actividades

Realizar cultivos a partir de muestras de cavidad nasal, faringe, oĂ­do y conjuntiva (Estudio de Flora Normal)

SECRECION OIDO

SECRECION NASAL

SECRECION FIEL

SECRECION FARINGEA


Las zonas de la tráquea, Bronquios y Pulmones normalmente suelen ser estériles, por ello la condición más importante en el diagnóstico de laboratorio de neumonía bacteriana, es la recolección de la muestra, debe provenir de una expectoración profunda a fin de evitar contaminación orofaringea. Las vías respiratorias bajas, como sabemos, se extienden desde la epiglotis hasta los alvéolos pulmonares. Los procesos infecciosos del tracto respiratorios inferior tienden a ser más graves que los del tracto respiratorio superior, por lo que la elección apropiada de una terapia antimicrobiana puede llegar a salvar la vida del paciente. Cuando el paciente no puede recoger la muestra por expectoración profunda, existen otros mecanismos como: esputo post-terapia respiratoria (inducido) y esputo post-nebulización de solución salina normal (inducido); la secreción endotraqueal está indicado en pacientes en la Unidad de Cuidados Intensivos, que están intubados y cuyas secreciones acumuladas son foco de procesos infecciosos a nivel pulmonar. Los pacientes con traqueostomia no logran producir esputo de forma normal, pero las secreciones del tracto respiratorio pueden obtenerse con facilidad realizando una aspiración con sonda; el laboratorio siempre trata las muestras de aspirados de traqueostomía como si fueran esputos. Las secreciones traqueo bronquiales son una mezcla inconstante de plasma, agua, electrolitos, Inmunoglobulinas, enzimas y lisozima, a medida que dichas secreciones atraviesan las vías respiratorias inferiores y superiores, se contaminan con exfoliaciones celulares, secreciones nasales y de las glándulas salivares y flora bacteriana normal de la cavidad oral. En condiciones patológicas se suman a esta mezcla polimorfonucleares (PMN), mononucleares (MN), fibrina proteínas inflamatorias y microorganismos patógenos; esta mezcla de secreciones y partículas recibe el nombre de esputo. Si clínicamente se sospecha una infección bacteriana, el examen de esputo con aumento de bajo poder, 10X, coloreado con Gram, constituye un medio rápido para determinar si la muestra de expectoración (esputo) es aceptable para cultivo. “Una muestra apropiada presenta menos de 10 celulas epiteliales y la presencia de más de 25 polimorfonucleares por campo de bajo poder.”

RECOGIDA DE LA MUESTRA Esta muestra pocas veces contiene solo secreciones de las vías respiratorias bajas, sino que con frecuencia se hallan contaminadas por la saliva, secreciones nasofaringeas, bacterias o restos de alimentos. METODO DE OBTENCION DEL ESPUTO ESPUTO EXPECTORADO EXPONTANEO: Es el que se obtiene cuando el paciente expulsa voluntariamente la secreción respiratoria. Como esta secreción pasa por la cavidad oral frecuentemente es contaminada con la flora propia de dicha localización; con el fin de minimizar esta contaminación se recomienda que el paciente realice un enjuague bucal previo a la recogida del esputo. La muestra apropiada es la primera de la mañana, abundante y acumulada durante toda la noche. ESPUTO INDUCIDO: Con este método se promueve un aumento en el flujo de secreción bronquial y una estimulación de la tos. Se realiza nebulización con NaCl al 10%.


LAVADO BRONQUIAL: Es la muestra más sensible pero requiere de un médico entrenado para el procedimiento así como de equipo especializado para la obtención de la muestra. Se realiza con la ayuda de un broncoscopio que permite la visualización directa de la mucosa bronquial. Se obtiene instilando una pequeña cantidad de solución salina estéril en el árbol bronquial y recolectando después el fluido. Estos especímenes pueden contaminarse con flora respiratoria superior pero menos que el esputo expectorado. LAVADO BRONCOALVEOLAR: Es una muestra muy sensible para detectar quistes de Pneumocystis y elementos fúngicos. En este procedimiento un volumen alto de solución salina entre 100 a 300 ml es instilado en un segmento pulmonar para obtener células y proteínas del intersticio y del espacio alveolar ASPIRADO SECRECION ENDOTRAQUEAL: Se utiliza en pacientes con traqueostomía o con intubación orotraqueal. Estos pacientes se colonizan rápidamente con bacilos gram negativos nosocomiales, estos microorganismos pueden ser aspirados hacia los pulmones y causar neumonía.

ASPIRADO GASTRICO: Se usa únicamente para el aislamiento de bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) y se utiliza más en niños que no son capaces de expectorar las secreciones respiratorias. Debe recogerse en horas de la mañana con ayuda de una sonda nasogástrica ya que se presume que las secreciones respiratorias son degluidas en la noche y se almacenan en el estómago. Los especímenes deben ser enviados al laboratorio en tubo estéril que contiene fosfato trisódico al 10% para neutralizar la acidez estomacal y preservar la vida del bacilo

¿Qué puede ordenar un médico en una muestra de esputo? R=

Gram y cultivo para gérmenes comunes Coloración de Zielh Neelsen (baciloscopia) y cultivo para micobacterias KOH y cultivo para hongos Cultivo para anaerobios Examen citológico (laboratorio de patología) ¿Qué hace el laboratorio con la muestra? R= EXAMEN MACROSCÓPICO Aspecto y consistencia: Líquido o seroso, mucoide, purulento, espumoso, sanguinolento Color: Amarillo (característico del pus), tinte verde (probable Pseudomonas), herrumbroso u óxido (probable neumococo), grosella (probable klebsiella), rojo brillante (hemorragia reciente, infrecuentemente una bacteria pigmentada como Serratia), rosado (edema pulmonar) Olor: La secreción respiratoria normal no tiene olor. Fétido: Producto de la descomposición bacteriana.


Estructuras diversas: Caseum, gránulos de azufre, moldes bronquiales, broncolitos, parásitos (larvas de Ascaris lumbricoides, Echinochoccus, huevo de Paragonimus westermani) R= EXAMEN MICROSCOPICO Se colorea la muestra con diferentes tinciones según la orden médica: Coloración de Gram Coloración de Zielh Neelsen Coloración de Papnicolaou Examen directo con KOH al 10% Inmunofluorescencia directa: Para Legionella, Chlamydophila, adenovirus, VSR, Virus de la Influenzae, citomegalovirus Observando el número y tipo de células presentes es posible determinar si la muestra es adecuada para cultivo.

La presencia de muchas células epiteliales escamosas (>25 xc. de bajo poder), indica que el espécimen consiste principalmente en saliva y contiene una abundante microflora orofaringe. Es aconsejable no cultivar este tipo de muestras sino tratar de conseguir otras. Si encuentran pocas células escamosas (<25 xc. de bajo poder), el extendido debe ser observado bajo inmersión: 100 X, para detectar la presencia de ciertas bacterias con morfología características. (neumococos, estafilococos) en cuyo caso la muestra debe ser cultivada. La presencia de macrófagos alveolares constituye el mejor indicio de que el material que se está examinando proviene de la vía respiratoria inferior ya que en la vía respiratoria superior no hay este tipo de células


III. Observe las siguientes láminas de esputo con coloración de Gram:

CARACTERISTICAS

MUESTRA REPRESENTATIVA

NO REPRESENTATIVACOMPATIBLE CON SALIVA

(Caso II)

(Caso I)

CONTAMINADA CON SALIVA

(Caso

III)

CELULAS EPITELIALES

LEUCOCITOS

Menos de 10 xc

Más de 25 xc

Más de 25 xc

Más 25 xc

Menos de 10 xc.

Más de 25 xc

OBJETIVO 10X

REALIZA CULTIVO?

SI

SI

NO


IV.

Identifique morfol贸gicamente cada uno de los microorganismos asociados a patolog铆a del tracto respiratorio y su respectiva prueba confirmatoria.

Streptococcus pneumoniae: Gram y Optoquina

Streptococcus pyogenes: Gram y Bacitracina

Moraxella catharralis: Gram y Fermentaci贸n de Carbohidratos


Haemopilus influenzae: Gram y Satelitismo

Staphylococcus aureus : Gram y Coagulasa

Nocardia sp. : Gram y Ziehl-Neelsen


PRINCIPALES AGENTES CAUSANTES DE PATOLOGIAS EN EL TRACTO RESPIRATORIO RESFRIADO COMUN  Rhinovirus  Coronavirus  Virus de la Influenza  Adenovirus  Virus de la parainfluenza  VSR

SINUSITIS

BRONQUITIS

VIRUS 15%  Rhinovirus  Virus Influenza  Virus de la parainfluenza  Adenovirus BACTERIAS  Streptococcus pneumoni-

VIRUS  Rhinovirus  Coronavirus  Virus de la parainfluenza  VSR  Virus de la Influenza  Adenovirus  Virus del sarampión

  

 

FARINGITIS

VIRAL  Rhinovirus  Coronavirus  Adenovirus  HSV  Virus Coxsackie A  Virus de la parainfluenza  Virus de la Influenza  EBV  CMV  HIV

ae 31% Haemophilus influenzae 21% Moraxella catarrhalis 2% Anaerobios: Bacteroides, Peptostreptococcus, Fusobacterium 6% Staphylococcus aureus 4% Streptococcus pyogenes 2% Enterobacterias.

 HONGOS  Aspergillus fumigatus  Pseudoallesqueria boydi  Sporothrix schenckii  Mucor  Rhizopus

   

    HONGOS  Candida

BACTERIAS  Mycoplasma pneumoniae S.pneumoniae  Legionella sp. H.influenzae (Cepas no  Chlamydia pneumoniae capsuladas)  Chlamydia psittaci Corynebacterium pseudo Coxiella burnetti diphtericum  Chlamydia trachomatis M.catarrhalis

BRONQUITIS CRONICA      

 

CRUP VIRAL  Virus de la parainfluenza

   

1,2,3 Virus de la Influenza A yB VSR Adenovirus Rinovirus Virus del sarampión

CRUP BACTERIANO  Mycoplasma pneumoniae  Enterovirus  Haemophilus influenzae

tipo b

BACTERIAS  Streptococcus pneumoniae  Haemophilus influenzae  Staphylococcus aureus  Klebsiella pneumoniae  Pseudomonas aeruginosa  Moraxella catarrhalis  Enterococcus faecalis  Yersina pestis  Bacillus anthracis  Franciselal tularensis  Treponema pallidum (congénita) PNEUMONIA ATIPICA

B.pertusis Virus respiratorios

BRONQUIOLITIS

BACTERIAS  Streptococcus pyogenes

Grupo A, C, G Arcanobacterium haemolyticus Anaerobios mixtos Neisseria gonorrhoeae Corynebacterium diphtheriae Corynebacterium ulcerans Yersinia enterocolitica Treponema pallidum Chlamydia pneumoniae Mycoplasma pneumoniae

BACTERIAS  Bordetella pertussis  Mycoplasma pneumoniae  Chlamydia pneumoniae (Agente TWAR)

NEUMONIA AGUDA

  

VSR Virus de la parainfluenza 1,3 Adenovirus Rhinovirus Mycoplasma pneumoniae

VIRUS  Virus de la Influenza  Adenovirus 3,4,7  Virus de la parainfluenza  VSR  Enterovirus  EBV  CMV  VVZ  Virus del sarampión  HSV  Hantavirus  Virus del Herpes 6


PNEUMONIA POR ASPIRACION

SINDROME PULMONAR CON EOSINOFILIA

BACTERIAS ANAEROBIAS  Porphyromonas  Prevotella  Sutterella  Bacteroides  Fusobacterium  Peptococcus  Clostridium

  

   

perfringens Clostridium ramosum Actynomices Propionibacterium propionicum Bifidobacterium

AEROBIOS  S.aureus  S.pyogenes  Nocardia  Klebsiella pneumoniae  Pseudomonas  Moraxella  Eikenella

 

         

Ascaris Strongyloides Paragonimus westermani Echinococcus Larva migrans cutánea (Ancylostoma brasiliensis) Shistosoma Dirofilaria immitis Ancylostoma duodenalis Necator americanus Mycobacterium tuberculosis Brucella sp. Chlamydia psitaci Coccidioides inmitis Histoplasma Pneumocistis carinii

PNEUMONIA CRONICA

OIDO

BACTERIAS ANAEROBIAS  Actynomices  Propionibacterium propi-

OTITIS EXTERNA

onicum

  BACTERIAS AEROBIAS   Nocardia   Rhodococcus   Burkholderia pseudomallei   Mycobacterium tubercu 

losis Mycobacterium kansasii Mycobacterium avium

           

Absceso pulmonar Mycobacterium tuberculosis Burkholderia pseudomallei Rhodococcus Histoplasmosis Coccidioidomicosis Sporothirix Aspergillus Actynomices Nocardia Paragonimus Echinococcus

NEUMONIA NOSOCOMIAL    

  

Pseudomonas Burkholderia Acinetobacter Enterobacterias:Klebsiella, Serratia Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Anaerobios:Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium Legionella.

(Miringitis bullosa)

OTITIS MEDIA

HONGOS  Aspergillus  Blastomyces  Coccidiodes  Cryptococcus neoformans  Histoplasma  Sporothrix  Paracoccidioides  Pneumocystis carinii

BACTERIAS  S.pneumoniae  H.influenzae  Moraxella catarrhalis  S.pyogenes  S.aureus  Alloiococcus otitis  Anaerobios  Mycobacterium chelonae

PARASITOS  Entamoeba histolytica  Echinococcus granulosa  Schistosoma  Paragonimus westermani

PARASITOS  Ascaris lumbricoides

VIRUS  CMV

CAVITARIAS

Pseudomonas aeruginosa S.aureus Aspergillus Fusarium Candida Mycoplasma pneumoniae

VIRUS  VSR  Virus de la Influenza  Enterovirus  Rinovirus


OJO Y TEJIDOS PERIORBITALES

INFECCIONES PERIOCULARES

ORZUELO-CHALAZION  S.aureus  Pseudomonas  Proteus  Demodex follicularis CANALICULITIS  Propionibacterium acnes  Actinomyces  Malassezi pachidermatia  HSV  VVZ DACRIOCISTITIS  S. pneumoniae  S.aureus  Pseudomonas  H.influenzae DACRIOADENITIS  S.aureus  S.pneumoniae  Virus de la parotiditis  EBV(Mononucleosis in-

fecciosa)

CONJUNTIVITIS RECIEN NACIDOS  Chlamydia trachomatis  Neisseria gonorrhoeae  Neisserea cinerea  Moraxella  S.aureus  S.pneumoniae

NIÑOS MAYORES DE 3 MESES  H.influenzae no capsulado  H.influenzae serotipo b  H. Influenzae biogrupo    

aegyptius S.pneumoniae S.aureus Pseudomonas aeruginosa Neisseria meningitidis

ADULTO JOVEN SEXUALMENTE ACTIVO  C. trachomatis  N.gonorrhoeae ADULTOS  S.pneumoniae  S.aureus  S.epidermidis  Moraxella  Mycobacterium tuberculo 

sis Chlamydia trachomatis (Tracoma) Leptospira .

CONJUNTIVITIS NOSOCOMIAL    

Serratia marcescens S.pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Moraxella

HONGOS  Candida.  Rinosporidium seeberi PARASITOS  Leishmania donovani  Filarias: Loa-loa, Oncho 

cerca volvolus Toxocara canis Encephalitozoon

VIRUS  Adenovirus  Enterovirus  Caxsackie A24  HSV  Influenza  Sarampión.

QUERATITIS BACTERIAS  S. aureus  Bacillus cereus  Micrococcus  S.pneumoniae  Pseudomonas sp.  Enterobacterias (Citrobacter, Klebsie-

           

CONJUNTIVITIS CRONICA

Chlamydia psitaci Chlamydia pneumoniae.

 

lla, Enterobacter, Serratia, Proteus) Moraxella N.gonorrhoeae N.meningitidis Corynebacterium diphtheriae Listeria Shigella Acinetobacter Mycobacterium fortuitum Mycobacterium chelonae Aeromonas hydrophila Pasterella multocida Peptococcus, Peptostreptococcus Chlamydia trachomatis (Tracoma) Treponema pallidum (congénita tardia). Francisella tularensis

HONGOS  Fusarium solanae  Aspergillus  Alternaria  Curvularia  Penicillium marnefeii  Candida sp.


QUERATITIS

ENDOFTALMITIS

ENDOFTALMITIS

PARASITOS

POSTQUIRURGICA

ENDOGENA (DISEMINACION HEMATOGENA)

Onchocerca Loa-loa Leishmania. Acanthamoeba

Microsporidios (Nosema, Encephalitozoon) VIRUS

Herpes virus Herpes zoster Sarampión Virus de la Rubeola EBV.

S. epidermidis S. aureus Propionibacterium acnes Mycobacterium sp. Corynebacterium sp. POST TRAUMA PENETRANTE

S. epidermidis Bacillus cereus Aspergillus Fusarium

H. influenzae N.meningitidis S.pneumoniae

Egentes etiológicos de endocarditis (Manchas de Roth)

Treponema pallidum

(Coriorretinitis congénita)

Candida Aspergillus

Agentes etiológicos de micosis sistémicas

Mucor

PARASITOS

Toxoplasma gondhi Toxocara canis Cisticercus cellulosae VIRUS Retinopatias necrotizantes (HSV, VVZ, CMV) Coriorretinitis CMV Virus del sarampión (asociado a PESA)

CELULITIS PRE-SEPTAL

S.aureus H.influenzae serotipo b (No inmunizados)

H.influenzae no capsulado S.pneumoniae S.pyogenes Pseudomonas Moraxella catharralis

CELULITIS SEPTAL (CELULITIS ORBITARIA)

S.aureus S.pyogenes S.pneumoniae Clostridium perfringens. Mucor Aspergillus Trichinella spiralis.


Flora normal y patogena vias respiratorias