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UTMACH| PRÁCTICA DE TOXICOLOGÍA

“Calidad, Pertinencia y Calidez”

PRÁCTICA N° BF.5.09- 06 TEMA: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES. SINDROMES TOXICOS, TOXICOS ORGANICOS TITULO DE LA PRÁCTICA: INDENTIFICACION DE TOXICOS RODENTICIDAS (WARFARINA.) Animal De Experimentación: Rata Wistar

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Vía De Administración: Via oral Volumen Administrado: 186 mg/ kg de warfarina TIEMPOS: Inicio de la práctica:

8:20 am

Toma de muestra 1:

8:25 am

Toma de muestra 2:

9:55 am

Hora de disección:

10:00 am.

Hora finalización de la práctica:

10:15

1. DATOS INFORMATIVOS Docente: Alumnas:

BQF. García González Carlos Alberto MSc. Jimenez Pulla Lidia del Carmen Orellana Jaramillo Ana Marcela Carrera: Bioquímica y Farmacia Curso: Quinto Paralelo: “B” Grupo: 6 Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes, 08 de Agosto del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: 2.- FUNDAMENTO TEÓRICO: La warfarina: es un medicamento anticoagulante oral que se usa para prevenir la formación de trombos y émbolos. Inhibe la producción de factores de coagulación dependientes de la vitamina K y así reduce la capacidad de la sangre de coagular. Su método de acción más lenta hace que generalmente se requiera más de un día para notar su efecto después de la primera dosis.1 Hay algunos riesgos asociados con terapia con warfarina, incluyendo sangrado excesivo, interacciones con otros fármacos, y malformaciones congénitas, así que los pacientes que la toman deben ser vigilados con cuidado por sus médicos. 2Se pueden dar altas dosis de vitamina K para contrarrestar los efectos de la warfarina, aunque a menudo la inhibición completa ocurre solo hasta 12-24 horas después la administración. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“. PARACELSO

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Toxicidad aguda. DL50/CL50 oral (ratas): 186 mg/kg; inhalación (ratas): >0,005 mg/Dérmico (ratas): 40 mg/kg; dérmico (conejos): nd. Clasificación: IB. Altamente peligroso (OMS); I. Altamente tóxico (EPA). Acción tóxica y síntomas: síndrome tóxico por cumarínicos. Toxicidad tópica: capacidad irritativa: ocular no es claro; dérmica nd; capacidad alergénica: nd.

3.- OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA Determinar propiedades, sintomatología de tóxicos organicos y su intoxicación por warfarina. Observar mediante pruebas de coagulación la presencia de warfarina Realizar la necropsia en el animal de experimentación que haya sido expuesto a una sustancia toxica

4.- MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS,SUSTANCIAS E INSUMOS:

Sustancias:

Materiales de vidrio: Frascos de vidrio Tubos de ensayo anticoagulante

Estándares de warfarina con

Otros: Guantes de látex Mascarilla Mandil Gorro Aguja hipodérmica de 10ml Cronometro Estuche de disección Panema Pinzas Cocineta Espátula Gradilla Estetoscopio Termómetro

y

sin

Muestra: Sangre tomada del animal para las pruebas.

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5.- PROCEDIMIENTO: Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. Desinfectamos el área de trabajo y limpiamos los materiales que se emplean en la práctica. … 6.- GRÁFICOS: 7.- PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN:

LABORATORIO a) Hematológicos: anemia microcítica e hipocrómica, leucocitosis neutrófila, trombocitopenia, velocidad de sedimentación globular (VHS) aumentada. b) Bioquímicos: Hipoproteinemia, hipoalbuminemia, hiperglicemia, hiperbilirrubinemia, azoemia, aumento de la actividad de la alanina aminotransferasa (ALT), fosfatasa alcalina (FA) y gammaglutamiltransferasa (GGT) c) Hemostásicos y de coagulación: Se prolongan los tiempos de protrombina (TP), de tromboplastina parcial activado (TTPA), de trombina (TT), parcial de tromboplastina (TPT), de coagulación activado (ACT); aumento de los productos de degradación del fibrina (PDF), disminución de las concentraciones de los factores II, VII, IX y X, aumento del fibrinógeno y de los valores de la PIVKA (proteína inducida por el antagonismo o ausencia de la vitamina K), que es una prueba, específica para este tipo de intoxicación. d) Urinarios: proteinuria, hematuria. 8.- DETECCION DEL TOXICO: En primer lugar, en el caso de los cebos y de los contenidos gástricos, se realiza un examen visual de la muestra para detectar la presencia de formulados granulados u otro signo de presencia de fitosanitarios. En la Figura 2 se muestra de forma esquemática el protocolo seguido en diversos laboratorios toxicológicos en España. Mediante un método general de extracción, purificación y determinación se pueden identificar la mayoría de los tóxicos, pero en el caso de que existan evidencias de tóxicos concretos, o cuando se han descartado diversas posibilidades, puede ser necesario llevar a cabo métodos analíticos más concretos. Estos protocolos de análisis están

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“. PARACELSO

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UTMACH| PRÁCTICA DE TOXICOLOGÍA basados en métodos publicados por los laboratorios de toxicología que han preparado este texto, y de hecho están basados en gran media el procedimiento utilizado por la Wildlife Incident Investigation Scheme del Central Science Laboratory de Reino Unido (Brown et al., 2005). Dependiendo de las disponibilidades técnicas de los laboratorios, existen diferentes alternativas a los métodos aquí descritos que pueden ser también aceptables. De forma genérica, y para garantizar la correcta identificación del tóxico, los compuestos orgánicos deben ser analizados mediante detector de masas acoplado a cromatografía de gases o líquidos. Cuando esto no pueda ser llevado a cabo por no disponer de esta técnica analítica se procurará confirmar el resultado, si es posible, mediante dos técnicas analíticas distintas (ej.: colorimetría y cromatografía en capa fina para estricnina)

Rodenticidas anticoagulantes: El hígado o el cebo se homogeniza con sulfato sódico anhidro, se extrae con diclorometano u otras mezclas de solventes, se realiza una purificación mediante SPE (puede variar en función del tipo rodenticidas a analizar, indandiona o cumarina) y finalmente se analiza por cromatografía de líquidos acoplada a espectrometría de masas 9.- OBSERVACIONES: En la realización de ésta práctica si se hubiera administrado nitrato de mercurio di hidratado (toxico) por vía peritoneal al animal en experimentación, se hubiera observado la sintomatología que sería: El signo más consistente es el sangrado. Aparecen derrames en la conjuntiva ocular. Sangrados por la nariz. Hay vómito color café o rojo, y las heces contienen sangre fresca o digerida (melena). Hay sangre en la orina, así como otros signos menos evidentes de sangrado. Conforme continúa la pérdida interna de sangre, se añade fiebre, taquicardia, dificultad respiratoria, signos de asfixia y convulsiones en la fase terminal. 10.-CONCLUSIONES …….

11.- RECOMENDACIONES 

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, especialmente la mascarilla, para evitar intoxicaciones.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Para que la muerte del animal sea de forma rápida debemos de asegurarnos de la pureza de la sustancia, cloroformo, evitaremos que la muerta sea lenta y dolorosa para el animal.

CUESTIONARIO 1.-

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2.-

Glosario: BIBLIOGRAFÍA ECURED (2011).warfarina. Índice de Guías Seminarios. [Citado: 17 de Agosto del 2016] Disponible en: http://www.ecured.cu/Intoxicaci%C3%B3n_por_WARFARINA VENENO.(2011).GUÍA TÉCNICA DE ACTUACIÓN EN CASOS DE ENVENENAMIENTO DE LOS CENTROS DE RECUPERACIÓN Y LOS LABORATORIOS TOXICOLÓGICOS. (EN LINEA) 17- 08-2016. DISPONIBLE EN: http://www.venenono.org/wp-

content/uploads/2011/12/Guia_Toxicologia.pdf WEBGRAFÍA http://www.hiperactivos.com/warfarina.shtml https://es.wikipedia.org/wiki/Warfarina AUTORIA: BQF. GARCIA GONZÁLEZ CARLOS ALBERTO MSc FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:

JIMENEZ P. LIDIA DEL CARMEN C.I. 070470220-8

ORELLANA J. ANA M. C.I. …………….

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ANEXOS

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Guia de practica 6 de warfarina  
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