Page 38

TECHNOLOGY

Rapid Detection of White Spot Syndrome Virus

Author info ดร. กิชูร์ เอ็ม พัคนิการ์ ซาฮูล ฮามีด Dr. Kishore M Paknikar Sahul Hameed Researcher, Nanobioscience Group, Agharkar Research Institute, Pune, India Researcher, OIE Reference Laboratory for WTD kpaknikar@gmail.com cah_sahul@hotmail.com โรคจุดขาว (WSD) เกิดจากไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) เป็นหนึง ่ ในโรคทีท ่ �ำ ให้เกิดความเสียหายต่ออุตสาหกรรมกุง ้ ทัว ่ โลกมากทีส ่ ด ุ ตัง ้ แต่เกิดการระบาดของโรคนีค ้ รัง ้ แรกในปี 2535 ไวรัสแพร่กระจายจากจีนและญีป ่ น ุ่ มาถึงไทย อินโดนีเซีย และอินเดีย หลังจากนัน ้ ได้แพร่กระจายไปยังประเทศผู้เลีย ้ งกุง ้ อืน ่ ๆ เช่น สหรัฐอเมริกา ไวรัสยังคงมีผลกระทบอย่างยิง ่ ต่อการเลีย ้ งกุง ้ จนกระทัง ่ ปัจจุบน ั การติดเชื้อไวรัสโรคจุดขาวจะทำ�ให้เกิดจุดกลมสีขาวขนาดเล็ก ซึ่งมักพบว่านิวเคลียสของเซลล์เอคโทเดิร์มและเมโซเดิร์มใหญ่จน เกือบเต็มเซลล์ (hypertrophied nuclei) กุ้งในฟาร์มกุ้งที่มีการระบาดของโรคจะมีอัตราการตาย 100% ภายใน 3-10 วัน หลัง การติดเชื้อ เนื่องจากยังไม่มีวิธีการรักษา การป้องกันการติดเชื้อจึงเป็นขั้นตอนหลักในการกักโรค การวินิจฉัยโรคที่ถูกต้อง ตั้งแต่มีการติดเชื้อช่วงแรกเป็นหนึ่งในวิธีที่มีประสิทธิภาพในการติดตามการแพร่ระบาดของไวรัสโรคจุดขาวในอุตสาหกรรมกุ้ง วิธีการตรวจวิเคราะห์

วิธีการวินิจฉัยโรคจุดขาวแบบดั้งเดิม และได้รับการยอมรับมากที่สุด เช่น การ สังเกตอาการของโรคและวิธีทางจุลพยาธิ วิทยา ถูกแทนที่ด้วยเทคนิคการตรวจ วิเคราะห์สมัยใหม่ เช่น วิธีพีซีอาร์และวิธี ทางอิมมูโนวิทยา วิธีการเหล่านี้มีความไว สูง มีความจำ�เพาะ และให้ผลการวินิจฉัย ทีถ่ กู ต้อง อย่างไรก็ตาม วิธเี หล่านีม้ ตี น้ ทุน สูง ใช้เวลานาน ต้องใช้อุปกรณ์จำ�เพาะ และผู้วิเคราะห์ต้องมีทักษะ และจึงทำ�ให้ ไม่สามารถใช้ตรวจภาคสนามได้ นอกจากนั้น ความไวของเทคนิค พีซอี าร์จะมีความแตกต่างกัน ขึน้ กับวิธกี าร สกัดดีเอ็นเอ ความเข้มข้นของเทมเพลต และขนาดของแอมพลิคอน ส่วนผลการ ทดสอบด้วยวิธพี ซี อี าร์เป็นการตรวจวิเคราะห์ 38

www.innolabmagazine.com

ชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ซึ่งตรวจวัดไวรัสที่มีชีวิต ได้ไม่ดี วิธี ELISA ซึ่งเป็นวิธีตรวจดั้งเดิม อีกวิธีหนึ่งก็ไม่สามารถใช้ตรวจภาคสนาม ได้ ในทางตรงกันข้าม วิธีด็อตบล็อตและ แถบตรวจวัดด้วยวิธอี มิ มูโนโครมาโทกราฟีที่ พัฒนาเพือ่ การตรวจสอบไวรัสโรคจุดขาวมี ความรวดเร็ว และสามารถใช้งานภาคสนาม เพื่อตรวจคัดกรองกุ้งทั้งตัวอย่างเดี่ยวและ ตัวอย่างรวมที่มีปริมาณไวรัสที่มากพอ วิธีอิมมูโนแอสเสย์แบบการไหล เลเทอรอล (LFIA)

วิ ธี อิ ม มู โ นแอสเสย์ แ บบการไหล เลเทอรอล (LFIA) ใช้อนุภาคระดับนาโน ของโลหะในการตรวจสอบตัวอย่างเป้าหมาย เป็นวิธที งี่ า่ ย รวดเร็ว ต้นทุนต่�ำ และสะดวก ต่อการใช้งานภาคสนาม อนุภาคทองคำ�

นาโน (AuNPs) นิยมใช้เป็นตัวติดฉลาก สำ�หรับการตรวจสอบด้วยสายตาในวิธี LFIA ที่พัฒนาเพื่อการตรวจสอบโปรตีน อิออน โลหะ ฮอร์โมน แบคทีเรีย ไวรัส เป็นต้น อุตสาหกรรมสัตว์น้ำ�ใช้เทคนิคการวินิจฉัย โดยตรวจซีรมั หลายแบบในการตรวจวินจิ ฉัย ไวรัสโรคจุดขาวด้วย มีความต้องการวิธีการวิเคราะห์แบบ รวดเร็วและสามารถใช้ภาคสนามได้ จึง เน้นการพัฒนา LFIA เป็นหลัก ความเป็น ไปได้ในการลดความไวลง (เมื่อเทียบกับ วิธี ELISA) เป็นปัจจัยในการเลือกวิธีการ ทดสอบ LFIA จะมีประโยชน์แก่เกษตรกร และผู้บฏิบัติงานในโรงเพาะกุ้ง ในการ รักษาให้พ่อแม่พันธุ์กุ้งแข็งแรง ให้ลูกกุ้งที่ มีคณ ุ ภาพสูงสุดและหยุดยัง้ การสูญเสียทาง เศรษฐกิจครั้งใหญ่นี้

INNOLAB magazine #9.50