Page 1

Autor Gabriel Álvarez Martín

Unidad 9: Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

Aguas de uso y consumo


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

I. INTRODUCCIÓN A LA DETERMINACIÓN DE LAS CARACTERÍSTICAS MICROBIOLÓGICAS DEL AGUA

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

2


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El riesgo biológico en un laboratorio de microbiología puede ser elevado o mínimo.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

3


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Teniendo mucho que ver el espécimen del que se trate, pero también la formación y motivación del técnico de laboratorio, la metodología de trabajo y la infraestructura.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

4


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

1. NORMAS DE TRABAJO Y SEGURIDAD BIOLÓGICA EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA 

No todos los microorganismos que se manipulan en el laboratorio son necesariamente infecciosos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

5


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

6


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Los virus, bacterias y hongos pueden ser causantes de enfermedades, por lo que se pueden originar riesgos para las personas que los manejan

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

7


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Para que se produzca una enfermedad infecciosa en el laboratorio tienen que coincidir una serie de circunstancias como son:  En el microorganismo: un número suficiente, virulencia adecuada.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

8


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 En

el individuo: susceptibilidad individual, vía de entrada, desarrollo del microorganismo.  En el desarrollo de la técnica: manipulación inadecuada de los microorganismos, mala limpieza y desinfección del material.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

9


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

La manipulación de las muestras de aguas, en especial de las residuales, o de las muestras biológicas potencialmente infecciosas. Hace que los técnicos se expongan a riesgos a la hora de desarrollar su trabajo en el entorno de un laboratorio de microbiología.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

10


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Algunos de los conceptos biológicos que se deben conocer son:

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

11


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Biopeligrosidad  Es la cualidad potencial de algunos agentes biológicos, sustancias y materiales que los contienen, para desarrollar enfermedades en los seres humanos, animales o plantas.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

12


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Microorganismo  Es todas entidad microbiológica, celular o no celular, con capacidad para reproducirse o transferir material genético, pudiendo desarrollar o no una enfermedad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

13


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Agente biológico  Son microorganismos, incluidos los modificados genéticamente, capaces de causar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

14


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Símbolo de biopeligrosidad  Icono que debe figurar en el acceso a todos los laboratorios de contención, así como cualquier recipiente que contenga material biológico potencialmente peligroso.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

15


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Vía de infección  Es el mecanismo por el cual un agente biológico penetra en el organismo humano, pudiendo afectar a la salud de la persona.  Los síntomas estarán relacionados con la gravedad de la infección.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

16


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Las vías de infección más frecuentes en el laboratorio son:  Digestiva: por vía oral, al llevarse las manos u objetos a la boca, o bien al aspirar las pipetas directamente con la boca.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

17


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

a través de la piel, al producirse heridas o abrasiones con objetos punzantes o cortantes.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Parenteral:

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

18


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

especialmente por vía ocular, debido a salpicaduras o tocarse los ojos con las manos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Cutánea:

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

19


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

al inhalar microorganismos en la formación de aerosoles.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Respiratoria:

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

20


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

1.1. CLASIFICACIÓN DE LOS AGENTES BIOLÓGICOS. GRUPOS DE RIESGO Autor Gabriel Álvarez Martín

El riesgo potencial de enfermar es mayor en las personas que trabajan directamente con los agentes biológicos, pero también existe para la población relacionada con los trabajadores o para la zona donde se ubica el laboratorio.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

21


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

En función de su patogenicidad, los agentes biológicos son clasificados por la Organización mundial de la Salud (OMS) en 4 grupos de riesgo en orden creciente de peligrosidad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

22


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Los grupos de riesgo de los agentes biológicos son: Grupo I  Agentes biológicos con bajo riesgo para el individuo y la colectividad. No se asocian en enfermedades en humanos y animales adultos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Ejemplos: hongos de la levadura de cerveza y el pan, cepas no patológicas de Escherichia coli.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

23


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Grupo II  Agentes biológicos que pueden causar enfermedades en el ser humano suponiendo un riesgo, pero con poca probabilidad que se propague a la colectividad, no suelen dar lugar a epidemias.

RD 664/1997 exposición a agente

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

24


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

asocian a enfermedades en humanos y animales generalmente leves para las que se dispone de medidas de tratamiento y prevención eficaces.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Se

Ejemplos: Escherichia coli, Hepatitis B, virus de la gripe

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

25


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Grupo III  Son agentes biológicos que pueden causar graves enfermedades en el ser humano y provocar epidemias porque existe la probabilidad de que se propaguen a la colectividad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

26


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Están asociados a enfermedades humanas graves para las que generalmente existen medidas de profilaxis o tratamiento que limitan la propagación de la enfermedad

Autor Gabriel Álvarez Martín

Ejemplos: Salmonella, Shigella, VIH, encefalopatía espongiforme transmisible, etc.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

27


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Grupo IV  Se trata de agentes biológicos con alto riesgo para el individuo y la comunidad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

28


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Se

asocian a enfermedades humanas graves con altas probabilidades de provocar epidemias y sin que exista, generalmente, medidas preventivas o terapéuticas que limiten la propagación de la enfermedad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

29


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

todos los casos es necesario el uso de cabinas de seguridad y filtración de aire.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 En

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

30


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

31


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

1.2. NORMAS DE TRABAJO Y SEGURIDAD Autor Gabriel Álvarez Martín

Las normas básicas que hay que tener en cuenta para que sea seguro el trabajo de un laboratorio de microbiología, se pueden resumir en dos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

32


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

A saber, garantizar la seguridad del técnico y su entorno y garantizar la integridad del material objeto de estudio.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

33


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Todo el material utilizado que haya estado en contacto con productos potencialmente contaminantes debe ser descontaminado antes de reutilizarlo o desecharlo.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

34


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El material que se vaya a reutilizar se colocará en recipientes o soportes adecuados y se someterá al proceso de esterilización en autoclave.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

35


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autoclave  Consiste en un recipiente con cierre hermético en cuyo interior se consigue una atmósfera húmeda, alta temperatura y presión elevada, con la intención de destruir todos los microorganismos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

36


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

II. CULTIVO DE MICROORGANISMOS 1. COMPOSICIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

37


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Los medios de cultivo ponen al alcance de los microorganismos una serie de elementos nutritivos, que junto con las condiciones ambientales adecuadas, favorecen su desarrollo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

38


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Las necesidades nutritivas de los microorganismos son muy variadas, pero en general para su desarrollo precisan: Carbono y nitrógeno, sales minerales, factores de crecimiento, factores de arranque y agua.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

39


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

La mayor parte de los estudios microbiológicos que se realizan en el análisis de aguas incluyen el cultivo del microorganismo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

40


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Un medio de cultivo debe estar constituida en cantidad suficiente por todos los elementos nutritivos necesarios para las necesidades concretas de los microorganismos objeto de estudio.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

41


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Además de estos nutrientes pueden llevar otros ingredientes que lo hagan adecuado para el fin a que se destina, por ejemplo, inhibidores del crecimiento de ciertos microorganismos que no nos interese cultivar, o indicadores de pH, etc.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

42


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

La composición básica de un medio de cultivo la constituye el agua y un compuesto mineral que aporte todos los nutriente que puede necesitar cualquier microorganismo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

43


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

2. PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO Autor Gabriel Álvarez Martín

Siempre hay que leer en el envase del producto la forma de reconstituirlo, ya que algunos medios tienen ciertas particularidades que no se deben obviar.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

44


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Consultar los guiones y las memorias de prácticas para ampliar información.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

45


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

2.1. DISTRIBUCIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO EN PLACAS 2.1.1. Material necesario  Matraz Erlenmeyer con medio de cultivo hidratado.  Algodón graso.  Papel de Aluminio.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

46


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

    

Placas Petri estériles. Pipeta. Rotulador. Mechero. Frigorífico.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

47


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

2.1.2. Procedimiento  Esterilizar en autoclave el medio de cultivo ya preparado y contenido en el Erlenmeyer, tapado con algodón graso y cubierto con papel de aluminio.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

48


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

La mayoría de los medios de cultivo se esterilizan en el autoclave a 121 °C, 1 atmósfera de presión, durante 15 minutos (condiciones estándar).

Autor Gabriel Álvarez Martín

Como funciona el autoclave

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

49


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Identificar las placas en su cara inferior por el lado externo con un rotulador, identificando el medio de cultivo, la fecha de preparación y el técnico que lo elaboró.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

50


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Distribuir el medio, una vez esterilizado, en placas de Petri estériles cuando se encuentre a una temperatura aproximada de 45°C.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

51


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Las manipulaciones de vertido en placa se harán alrededor de la llama del mechero. Antes de echar el medio de cultivo a las placas conviene homogeneizar el contenido del matraz.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

52


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Dejar reposar las placas en una superficie horizontal estable, donde pueda solidificar correctamente el medio. Una vez dispensado, las placas no deben moverse hasta su total solidificación.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

53


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Almacenar las placas que contienen el medio de cultivo en el frigorífico, en posición invertida, con la superficie del medio de cultivo mirado hacia abajo, a una temperatura entre 4 y 7 °C.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

54


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

En estas condiciones el medio puede mantenerse en buenas condiciones entre 4 y 6 semanas. Hay que evitar que el medio se congele, ya que habría que desechar las placas.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

55


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Efectuar el control de calidad. Se efectúa incubando una placa en las mismas condiciones que vamos a emplear, pero sin realizar inóculo alguno.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

56


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Atemperar los medios de cultivo almacenados en el frigorífico antes de utilizarlos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

57


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

3. TÉCNICAS DE SIEMBRA

Autor Gabriel Álvarez Martín

En microbiología, el término sembrar significa introducir de modo artificial una mínima parte de una muestra, en un medio de cultivo apropiado, con el objetivo de averiguar si los microorganismos son capaces de reproducirse.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

58


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Sembrar o inocular son términos equivalentes. Un inóculo es la porción de muestra que se pone en contacto con el medio de cultivo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

59


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El término resiembra alude a la transferencia de una muestra microbiológica (inóculo) desde un medio de cultivo a otro.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

60


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Para sembrar se precisa una muestra, que puede ser líquida o sólida, un medio de cultivo, ya sea sólido, semisólido o líquido y un instrumento para sembrar (asa de siembra, asa de picadura, pipeta graduada o pipeta Pasteur).

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

61


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

3.1. NORMAS GENERALES DE MANIPULACIÓN DE CULTIVOS  La manipulación de cultivos y muestras se harán en condiciones de asepsia, utilizando material estéril y trabajando alrededor de la llama de un mechero a una distancia máxima de 15 cm.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

62


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Las pipetas utilizadas con material biológico se dejarán en disolución germicida, y luego se esterilizarán en autoclave.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

63


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Al abrir frascos, tubos o matraces, se debe flamear siempre la boca del tubo de vidrio, antes y después de tomar la muestra.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

64


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Las placas Petri inoculadas se incuban en posición invertida.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

65


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

4. AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS. MÉTODO DE ESTRÍA Autor Gabriel Álvarez Martín

Los métodos de siembra son dos: por estría única o por estría múltiple.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

66


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

4.1. MÉTODO DE SIEMBRA EN PLACA POR ESTRÍA ÚNICA Y AGOTAMIENTO  Consiste en cargar el asa de siembra y depositarla en un extremo de la placa de Petri, haciendo una estría única y aplicando un movimiento de zigzag a lo ancho de la placa, de arriba abajo…

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

67


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Espaciando cada vez más el trazo, hasta el final de la placa, con la esperanza de haber descargado de microorganismos la carga inicial (agotamiento del inóculo) y obtener colonias aisladas en el tramo final del trazo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

68


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

4.2. MÉTODO DE SIEMBRA EN PLACA POR ESTRÍA MÚLTIPLE Y AGOTAMIENTO  Este método en esencia es el mismo que se utiliza en la estría única pero realizando varias estrías o trazos sobre la placa.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

69


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

La primera estría se extiende por un extremo de la placa ocupando aproximadamente una cuarta parte de la superficie total, adoptando líneas paralelas.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

70


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

A continuación se pasa adoptando un giro de unos 120°, ocupando otra cuarta parte de la superficie de la placa y así hasta la última estría, que la dirigiremos hacia el centro de la placa espaciando el trazo progresivamente. Normalmente se realizan de tres a cinco estrías.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

71


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

5. TÉCNICAS DE INCUBACIÓN Autor Gabriel Álvarez Martín

Tras la inoculación de una muestra en un medio de cultivo, es preciso mantener unas condiciones óptimas para garantizar el desarrollo de los microorganismos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

72


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Algunas de estas condiciones son la temperatura, la disponibilidad de oxígeno y la ausencia de microorganismos ajenos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

73


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Temperatura  Una temperatura adecuada favorece que el microorganismo se desarrolle, de tal modo que cuando ésta no es la indicada se pueden obtener resultados dispares.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

74


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

La temperatura de incubación dependerá del microorganismo a estudiar, siendo frecuente utilizar temperaturas próximas a los 37 grados centígrados por ser la temperatura óptima de incubación para la mayoría de los microorganismos patógenos para el hombre.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

75


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Existen procedimientos en análisis de aguas que requieren otras temperaturas, como el estudio de las bacterias coliformes fecales (44,5 grados centígrados).

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

76


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Para mantener la temperatura adecuada se utilizan las estufas de cultivo o incubadoras. La incubación en estos casos asegura la presencia de oxígeno para condiciones de aerobiosis.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

77


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Estas estufas posibilitan una temperatura constante y uniforme en toda la estufa, admitiendo en todo caso pequeñas oscilaciones de temperatura de 0,5 grados sobre la temperatura fijada.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

78


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Humedad  El agua, y por tanto la humedad, es esencial para el desarrollo de los microorganismos y aunque va incorporada en el medio de cultivo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

79


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Es conveniente comprobar el espesor del medio en las placas de Petri, así como su fecha de caducidad en el caso de los medios comerciales. Todos los medios caducados, los que tengan una capa delgada, o sean dudosos, hay que desecharlos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

80


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Oxígeno  La disponibilidad de oxígeno es importante para los microorganismos, ya que unos son aerobios y otros anaerobios.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

81


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6. EL MICROSCOPIO Autor Gabriel Álvarez Martín

Un microscopio es un instrumento capaz de amplificar la imagen de objetos y seres muy pequeños, incluso los que no se pueden observar a simple vista.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

82


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Según la fuente de energía empleada para ampliar la imagen, los microscopios se pueden clasificar en microscopios ópticos y microscopios electrónicos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

83


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

La microscopia óptica se basa en la amplificación de la luz (fotones), mediante lentes o grupos de lentes, mientras que la microscopia electrónica se fundamenta en la amplificación de un haz de electrones que son desviados por campos electromagnéticos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

84


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El microscopio óptico es el que se utiliza de forma habitual en los laboratorios de microbiología, relegando la microscopia electrónica para otro tipo de estudios.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

85


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.1. PROPIEDADES ÓPTICAS DEL MICROSCOPIO  Las propiedades fundamentales son: el aumento total, el poder de resolución y el contraste.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

86


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.1.1. Aumento total  Es la relación que existe entre el tamaño de la imagen observada en el microscopio y la que obtenemos al observar a simple vista sin ningún instrumento.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

87


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

El aumento total de un microscopio óptico depende de la capacidad de amplificación del ocular y del objetivo. Se halla multiplicando el número de aumentos del objetivo por el número de aumentos del ocular.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

88


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Por ejemplo, la combinación de un objetivo de 40 aumentos (40x) y un ocular de 10 aumentos (10x) dará un aumento total de 400 aumentos (400x).

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

89


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.1.2. Poder de resolución  La resolución se suele confundir con la amplificación.  En general, a mayor amplificación le corresponde mayor resolución de la imagen. Aunque hay lentes de baja calidad donde no se corresponde.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

90


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

El poder de resolución es la capacidad de una lente o grupo de lentes para distinguir dos objetos que están muy juntos, como distintos y separados. O también es la capacidad de distinguir como tal un objeto de diámetro muy pequeño.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

91


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

La resolución es una de las principales características de una lente o grupo de lentes; va ligada al diseño y al proceso de fabricación.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

92


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.1.3. El contraste  En el espectro visible (longitud de onda 400-700 nm) y empleando luz normal, es difícil observar preparaciones transparentes por la falta de contraste.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

93


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Generalmente, los objetos o seres transparentes o incoloros que no presentan contraste, se suelen observar mediante tinciones.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

94


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

6.2. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

95


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.2.1. Elementos de sustentación (parte mecánica) El pie o base  Es la parte del microscopio que descansa sobre la superficie de trabajo. Tiene una base amplia y una masa suficiente para darle estabilidad.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

96


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

La columna o brazo  Es una pieza robusta que une la base con el tubo óptico. Soporta la platina y puede ser recta o en ángulo. El microscopio se transporta tomándolo por la columna.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

97


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

El tubo óptico  Es la estructura en cuyos extremos se sitúan los oculares y objetivos.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El revolver porta-objetivos  Está situado en la parte inferior del tubo óptico.  Consiste en una pieza giratoria que aloja los objetivos, generalmente de 3 a 5.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

99


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

La platina  Es una superficie horizontal plana que va unida a la columna.  Sirve para colocar las preparaciones.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

100


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.2.2. Parte óptica del microscopio Los objetivos  Están constituidos por grupos de lentes de pequeño diámetro, montadas en el interior de un cilindro, que se acoplan mediante rosca al revolver.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

101


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Proporcionan una imagen aumentada del objeto, real e invertida, siendo los objetivos más utilizados de 4, 10, 40 y 100 aumentos. Se puede seleccionar el que interese girando el revólver y centrándolo en el eje óptico.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

102


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Los oculares  Están constituidos por un cilindro en cuyo interior hay un sistema óptico formado por 2 o más lentes, que se coloca dentro del tubo óptico.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

103


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Es la parte del microscopio más cercana al ojo del observador y tiene la función de captar la imagen formada por el objetivo y amplificarla. El aumento habitual es de 10x.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

104


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Para hacer las observaciones más cómodas se utilizan habitualmente los objetivos binoculares, pudiendo observar con los dos ojos.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

105


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

El condensador  Se halla situado entre la fuente de iluminación y la platina.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

106


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Está constituido por una serie de lentes cuya misión es concentrar los rayos luminosos en el área de observación de la preparación.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

107


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Dispone de un tornillo de ajuste con desplazamiento vertical, para aproximarlo o alejarlo de la preparación.

Autor Gabriel Álvarez Martín

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

108


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

El diafragma  Es un sistema que regula el cono de luz que llega a la muestra.  Está situado en la parte inferior del condensador

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

109


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Determina la profundidad de campo, es decir, el espesor de la muestra que se verá nítido sin variar el enfoque. Cuanto más cerrado esté, mayor será la profundidad de campo y mejor será el contraste, pero empeorará la resolución.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

110


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

6.2.3. Sistema de iluminación La fuente de iluminación  Suele ser una lámpara situada en la base del microscopio, que se acciona mediante un interruptor y un dispositivo que regula la intensidad luminosa.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

111


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

7. MANEJO DEL MICROSCOPIO 7.1. PARA EL ENFOQUE INICIAL  Hay que proceder del siguiente modo:  Enchufar a la red eléctrica.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

112


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Seleccionar

el objetivo deseado. Se suele empezar por el de menos aumento, girando el anillo del revolver sin tocar los objetivos. hasta oír un clic, que indicará que el objetivo está centrado en el eje óptico.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

113


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Alejar

al máxima la platina del objetivo, girando el tornillo macrométrico sin mirar por el ocular.  Colocar una preparación en la platina, con la muestra en la parte superior del portaobjetos. La preparación se sujeta con la pinza.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

114


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Centrar

la preparación, moviendo los tornillos de desplazamiento de la platina y haciendo coincidir la abertura de la platina con el eje óptico del objetivo, todo ello sin mirar por el ocular.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

115


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

el interruptor de iluminación.  Situar el condensador en una situación baja.  Regular el diafragma a media abertura. Autor Gabriel Álvarez Martín

 Accionar

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

116


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Acercar

la preparación al objetivo, girando el tornillo macrométrico y observando el movimiento, sin mirar por el ocular. Se aproximará al máximo, pero cuidado de que no haga contacto el objetivo con la preparación.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

117


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

la distancia interpupilar, de modo que se observe un único campo visual al mirar por los dos oculares al mismo tiempo.

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Ajustar

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

118


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Mirando

por ambos oculares, alejar la preparación del objetivo mediante el tornillo macrométrico, que se accionará con ambas manos de modo suave hasta que se observe la imagen.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

119


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

el enfoque con el tornillo micrométrico.  Corregir la diferencia de visión de los ojos. Autor Gabriel Álvarez Martín

 Ajustar

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

120


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Una

vez enfocada la preparación debemos conseguir las condiciones óptimas para la observación, ajustando la iluminación con el regulador de intensidad luminosa, el condensador y el diafragma.

Microscopio John Marshall, 1700, Inglaterra

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

121


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 Seleccionar

la zona de observación mediante movimientos en el plano horizontal de la platina con los tornillos de desplazamiento. Se mueven con una sola mano.  Mantener el enfoque con el tornillo micrométrico mediante la otra mano.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

122


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

7.2. PARA EL MANEJO DE LOS OBJETIVOS DE INMERSIÓN  Hay que seguir los pasos descritos antes para el enfoque inicial, pero teniendo en cuenta que se utiliza un aceite de inmersión.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

123


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

7.3. NORMAS DE USO DEL MICROSCOPIO  Evitar subir la platina mientras se está mirando a través de los oculares.  Mantener la platina limpia y seca.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

124


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

No tocar las lentes con los dedos. Limpiar las lentes suavemente con papel de limpieza especial para óptica.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

125


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Limpiar el objetivo de inmersión, inmediatamente después de usarlo. La fuente luminosa del microscopio debe permanecer encendida sólo durante la observación microscópica.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

126


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Los objetivos de inmersión no deben utilizarse en seco. No mover el microscopio con la lámpara encendida.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

127


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Una vez terminada la observación  Apagar el microscopio.  Descender la platina al máximo.  Guardar o desechar la preparación.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

128


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

  Autor Gabriel Álvarez Martín

Colocar el objetivo de menor aumento. Limpiar el objetivo de inmersión, si se ha utilizado. Limpiar la platina si es necesario.

Salmonella

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

129


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Mantener la platina en posición central. Colocar sobre el microscopio una funda protectora, para mantener al abrigo del polvo.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

130


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

8. OBSERVACIONES DE MICROORGANISMOS AL MICROSCOPIO Morfología bacteriana  Cocos (esféricos).  Bacilos (bastones).

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

131


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

 

Vibrios (forma de coma). Espiroquetas (forma de espiral). Fusiformes (forma de hueso).

Imagen de microscopio electrónico de bacteria fusiforme

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

132


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

133


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Agrupación bacteriana  En cadenas de dos (diplococos).  En cadenas largas (estreptococos).

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

134


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

  Autor Gabriel Álvarez Martín

En racimos o masas irregulares (estafilococos). En paquetes cúbicos de 8 células (sarcinas). En empalizada (Corynebacterium diphteriae).

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

135


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

136


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

8.1. OBSERVACIÓN EN FRESCO DE MICROORGANISMOS  El objetivo de este procedimiento es observar a los microorganismos vivos y estudiar la movilidad bacteriana.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

137


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

8.2. OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS TEÑIDOS  El objetivo que se pretende con la tinción es aumentar el contraste de los microorganismos frente al campo microscópico y poder visualizar la morfología, la agrupación y algunas estructuras internas de los mismos

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

138


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

Fases de una tinción:  Extensión.  Desecación.  Fijación.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

139


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

 Tinción.  Desecación. Autor Gabriel Álvarez Martín

 Observación.

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

140


Autor Gabriel Álvarez Martín

CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

FIN Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

141


CFGS SALUD AMBIENTAL: Módulo Aguas de uso y consumo

Autor Gabriel Álvarez Martín

VÍDEOS

Métodos analíticos de determinación de los caracteres microbiológicos de las aguas

142

AUC Muestra teoria  

AUC Muestra teoria

Read more
Read more
Similar to
Popular now
Just for you