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SISTEMA DE GRUPO SANGUINEO ABO


A principios del siglo XX se llevo a cabo un descubrimiento crucial en medicina transfucional. Karl Landasteiner demostró al combinar muestras de sangre reacciones de aglutinación en unos casos y en otros no


Introducción 

 

El ABO es el sistema mas importante en el humano son los de expresión mas amplia y con gran cantidad de determinantes antigénicos. Son generadores de anticuerpos de origen natural. Los antígenos del sistema ABO son azucares porque son productos secundarios de un gen, los productos primarios de un gen son proteínas


La proteína denominada N-acetil galactosaminiltransferasa que transporta un azúcar llamado N-acetilgalactosamina que al unirse a la sustancia H de la membrana de los glóbulos rojos origina al grupo sanguíneo A. La proteína galactosiltransferasa transporta una enzima denominada D-galactosa que al unirse a la sustancia H de la membrana de los glóbulos rojos origina al grupo B. Los subgrupos se originan a partir de pequeñas mutaciones genéticas


El gen O es producto de una mutación genética donde se pierde una guanina en la posición 261 del gen produciendo cambios en la secuencia proteica, originando una proteína inactiva que no transporta ningún azúcar, por lo tanto la sustancia H permanece libre en los individuos O


Grupo A Sustancia H N-acetil galactosaminiltransferasa

A

N-acetilgalactosamina


Grupo B Sustancia H B

Galactosiltransferasa

D-galactosa


Grupo O Sustancia H

L-Fucosa


Desarrollo de los Antígenos Eritrocitarios  

La potencia de los Ag: A y B aumenta desde los comienzos de la vida fetal hasta la adolescencia. Al nacer son mas débiles que en el adulto y las reaccionan con los antisueros ANTI-A y ANTI-B son menos intensas. Al principio los antisueros anti-a y anti-b son débiles y solo pueden detectarse cuando el lactante llegue a los 3 meses. En conclusión cuando se determina grupo sanguíneo en muestras de RN del cordón umbilical, es necesario evaluar solo grupos sanguíneos


Anticuerpos del sistema ABO 

Aparecen en el torrente sanguíneo es ausencia de un estimulo antigénico conocido

Llamados Anticuerpos naturales

Son inmunoglobulinas M inducidas por bacterias, alimentos en el RN

Como de sedarrollan


Anticuerpos Naturales

    

IgM: constituyen el 8% de las inmunoglobulinas. Pesan 900.000 UD No atraviesan placenta fácilmente En la reacción Ag-Ac activan el complemento y causan hemolisis y no aglutinación Promedio de vida es de 10 días


Anticuerpos Irregulares

     

Constituyen el 8% de las inmunoglobulinas. Pesan 150.000 UD Atraviesan la placenta Se asocia con la EHRN No aglutina a los glóbulos rojos en suspensión con solución salina solo los recubre y los sensibiliza Vida promedio de 60 a 70 días


C O N T A C T O

Ig G

Ig M

TIEMPO


Demostración de los grupos sanguíneos ABO   

Por definición los anticuerpos Anti-A reaccionan con los antígenos A. Los anticuerpos Anti-B reaccionan con los antígenos B. La verificación del grupo ABO se lo realiza con la prueba inversa, analizando el suero con globos rojos A y B.


Distribución de los Antígenos y Anticuerpos del sistema ABO    

Genes: A-B-H Antígenos: A-B-H Grupos sanguíneos: A-B-AB- O-(H Bombay) Subgrupos: mutaciones de los azucares


Actividad

ď‚ž

Realizar ejercicios del Modulo de grupos sanguĂ­neos directo e inverso


Demostración In Vitro de los Grupos ABO Se demuestra los grupos sanguíneos ABO

Técnicas

Métodos

Tubo Placa Microplaca Gel

Directo: Ag Inverso: Ac

Complementarios


Utilización de los reactivos Directo Antisuero: ANTI-A, ANTI-B, ANTI-AB, ANTI-H

ANTI-AB: utilizada para no pasar por alto Ag: a y b débiles

ANTI-A: mezcla de ANTI-A: A1-A2-A1B-A2B y ANTI-A1: A1-A1B

Inverso

Células Conocidas: Grupo A1, B, O

Lavadas y suspendidas


TĂŠcnicas para determinar los grupos sanguĂ­neos


Técnica: Placa

 

Es una técnica rápida para determinar antígenos o anticuerpos. Los Ac débiles no aglutinan a los glóbulos rojos y no se aconseja utilizarlos como procedimiento de rutina. Es importante confirmar los resultados mediante una técnica en tubo, microplaca o gel.


       

Materiales: Placas Set: Anti-A, Anti-B, Anti-AB, Anti-D Lámpara de luz Blanca Palillos Suero Sangre: suspensión

 

  

 

Usar los extremos de la placas Rotular los sectores para identificar las muestras con los reactivos Colocar las placas en la lámpara de luz blanca Agregar una gota de sangre o suero Mezclar con un aplicador de madera en un área de 2cm de diámetro Inclinar las placas de atrás adelante y observar los resultados Registrar los resultados antes de que transcurra los 2 minutos


A

B A

A

B

A

B

B


Limitaciones

   

Poca sensibilidad a los antígenos o anticuerpos débiles. Poca estabilidad de los resultados Resultados: Grupo: Factor RhD: Actividad: realizar una practica con diversidad de muestras tanto en suero y hematíes suspendidos y otros no


Lavado y Suspensi贸n de Gl贸bulos Rojos


  

Tubos de ensayo de 75 x 12 Muestras de sangre Solución salina 0.9%


Método         

Centrifugar la muestra para separar el suero o plasma de los glóbulos rojos Con una pipeta (pasteur) colocar 0,5 ml de sangre en un tubo de ensayo. Completar con solución salina hasta 1 cm del borde. Centrifugar por 1 minuto 2500 a 3000 rpm Decantar la solución salina sobrenadante. Agitar el tubo para la resupensión Repetir los lavados dos veces mas En muestras de Rn se puede lavar hasta un número de 6 veces. Suspender los hematíes colocando un volumen de hematíes lavados en 29 de solución salina.


SSI

0.5 ml (GR)


30 volumen de SSI

+

1 volumen de hematĂ­es


TECNICA EN TUBO


           

Materiales Tubos Glóbulos rojos reactivos o en estudio Antisueros: Anti-A, Anti-B, Anti-AB- Anti-D Método. Identificar tubos con las letras A-B-AB-D. Clocar 50 ul o una gota de células en suspensión en cada tubo rotulado. Agregar una gota de antisueros a cada tubo correspondiente. Centrifugar por 20 segundos Observar la aglutinación y la intensidad de los mismos valiéndose de una lámpara de luz blanca. Anotar los resultados.


Intensidad de la Reacci贸n


Reactivos


Relación Muestra – Reactivo 1a 1


No introducir el gotero


Centrifugar 15 a 20 segundos


Agitar suavemente los tubos


Grupo A


Grupo B


GRUPO “O” - BOMBAY


GRUPO “AB”


Subgrupos del “A” y ”B”

Son el resultado de mutaciones genéticas que se diferencian por la capacidad del transporte del azúcar


Grupo A 1 Sustancia H N-acetil galactosaminiltransferasa

A

N-acetilgalactosamina 800.000 a 900.000


Grupo A 2 Sustancia H N-acetil galactosaminiltransferasa

A

N-acetilgalactosamina 160.000 a 440.000


Grupo A 3 Sustancia H N-acetil galactosaminiltransferasa

A

N-acetilgalactosamina 35.000 a 100.000


Caso Clínico Ig. M anti - a Grupo O anti - a anti - b Grupo A anti - b

•Coombs Directo negativo o débil positivo •El Ag A en útero tiene bajos sitios antigénicos 800.000 – 900.000


Método Inverso - Tubo Materiales  Tubos  Suero o plasma reactivos o en estudio  Celulas lavadas y suspendidas del grupo A-B-O: 

       

Método. Identificar tubos con las letras A-B-O Clocar 100 ul o dos gotas de suero o plasma en estudio en cada tubo rotulado. Agregar una gota de células lavadas y suspendidas a cada tubo identificado. Centrifugar por 20 segundos Observar la aglutinación y la intensidad de los mismos valiéndose de una lámpara de luz blanca. Anotar los resultados.


Reactivos - CĂŠlulas Caceras


Anticuerpos anti - a


Anticuerpos anti - b


Anticuerpos anti–a y antib


NingĂşn anticuerpo


TĂŠcnica en Gel


Reactivos Comerciales


Discrepancia de Resultados


Evaluaci贸n del Sistema ABO

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