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Universidad de Montemorelos Escuela de Químicos (QCB Y QA) Facultad de Ciencias de la Salud

Docente: QBC. Ricardo Lapizco Vázquez

Trabajo entregado en cumplimiento de la materia de: Bioquímica

Trabajo: 4to reporte: Venopunción

Estudiantes: Katherine Key Perez y Daniela Fonseca

4to semestre Montemorelos, Nuevo Leon

02/Marzo/2017


Escuela de  Químicos      

Reporte #3  de  Bioquímica   PREPARACIÓN  DE  UNA  SOLUCIÓN  BUFFER  

INTRODUCCIÓN   En  la  practica  #4  se  explicaran  los  métodos  para  la  extracción  de  sangre,  los  pasos  a  seguir   para   un   buen   desempeño   al   momento   de   venopunción,   el   correcto   manejo   de   las   muestras  biológicas,  los  desechos  y  la  explicación  del  porque  los  eritrocitos  se  comportan   diferente  con  soluciones  isotónicas,  hipertónicas  e  hipotónicas.     OBJETIVO    

1. Aprenderá la  técnica  de  toma  de  muestra  sanguínea  por  punción  venosa,  tomando   en  consideración  todos  los  cuidados  que  ésta  requiere  para  obtener  una  muestra   con  calidad  Analítica.   2. Determinará  la  importancia  clínica  que  tiene  la  toma  de  muestra  sanguínea  desde   el  punto  de  vista  calidad  de  los  resultados  obtenidos.   HIPÓTESIS    

Se espera  que  ambas  alumnas  puedan  extraer  sangre  sin  complicaciones.     ANTECEDENTES    

En la  práctica  de  rutina  médica,  se  tienden  a  realizar  distintos  estudios  de  laboratorio  para   los  cuales  se  necesita  la  extracción  de  una  muestra  sanguínea,  debido  a  que  en  la  sangre   se  muestran  las  primeras  alteraciones  de  las  distintas  enfermedades;  por  lo  tanto  se  debe   de  llevar  a  cabo  una  adecuada  punción  venosa.   La  punción  venosa  permite  extraer  una  mayor  cantidad  de  sangre  para  las  pruebas   necesarias  en  hematología.         Elección  de  la  zona  para  la  venopunción     La  elección  del  lugar  de  realización  de  la  punción  representa  una  parte  vital  del   diagnóstico.  Existen  diversos  lugares  que  pueden  ser  elegidos  para  la  venopunción.   La  zona  más  idónea  para  las  venopunciones  es  la  fosa  antecubital,  en  la  parte  anterior  del   brazo,  frente  y  bajo  el  codo,  donde  se  localiza  un  gran  número  de  venas,  relativamente   próximas  a  la  superficie  de  la  piel.     Las  venas  de  esta  zona  varían  de  persona  en  persona,  sin  embargo,  hay  dos  tipos  comunes   de  sistemas  de  distribución  venosa:  Uno  con  forma  de  H  y  otro  parecido  a  una  M.  El   patrón  H  se  denominó  de  este  modo  debido  a  las  venas  que  lo  componen  (cefálica,  cubital   mediana  y  basílica)  se  distribuyen  como  si  fuesen  una  H,  y  representa  alrededor  del  70%   de  los  casos.  En  el  patrón  M,  la  distribución  de  las  venas  más  prominentes  (cefálica,   cefálica  mediana,  basílica  mediana  y  basílica)  se  asemeja  a  la  letra  M.    


Aunque cualquier  vena  del  miembro  superior  que  esté  en  condiciones  de  ser  utilizada   para  la  extracción  puede  ser  punzada,  las  venas  cubital  mediana  y  cefálica  son  las   utilizadas  con  más  frecuencia.  Entre  ellas,  la  vena  cefálica  es  la  más  propensa  a  la   formación  de  hematomas  y  puede  doler  al  punzarla.     Técnicas  para  detectar  la  vena   • Observar  las  venas  de  mayor  calibre.     • Movimiento:  Pedir  al  paciente  que  baje  el  brazo  y  que  abra  y  cierre  la  mano.  Los   movimientos  de  apertura  de  las  manos  reducen  la  presión  venosa  y  relajan  los   músculos.     • Masajes:  Masajear  suavemente  el  brazo  del  paciente  (del  puño  hacia  el  codo).     • Palpación:  Realizada  con  el  dedo  índice  de  la  persona  que  extrae  la  sangre.  No   utilizar  el  dedo  pulgar  por  la  baja  sensibilidad  de  la  percepción  de  las  pulsaciones.   Ese  procedimiento  ayuda  a  distinguir  entre  venas  y  arterias  por  la  presencia  de   pulsaciones,  gracias  a  la  mayor  elasticidad  y  grosor  de  las  paredes  de  los  vasos   arteriales.     • Fijar  las  venas  con  los  dedos,  en  los  casos  de  flacidez.     Uso  adecuado  de  Torniquete   El  torniquete  se  utiliza  para  aumentar  la  presión  intravascular,  y  facilita  la  palpación  de  la   vena  y  que  los  tubos  de  recogida  o  la  jeringa  se  llenen.   Los  torniquetes  de  deben  descartar  inmediatamente  si  están  contaminados  con  sangre  u   otros  fluidos  corporales.     Es  posible  que  la  persona  que  extrae  la  sangre  no  pueda  hacer  visible  la  vena  antecubital   con  la  seguridad  requerida  sin  aplicación  del  torniquete.   Antisepsia  de  la  zona  de  Venopunción   El  procedimiento  de  venopunción  debe  estar  precedido  por  la  limpieza  de  la  zona  para   evitar  la  contaminación  microbiana  de  cada  paciente  o  muestra.   Se  recomienda  utilizar  una  gasa  humedecida  con  solución  de  alcohol  isopropílico  o  etílico   70%,  comercialmente  preparado.   • Limpiar  la  zona  con  un  movimiento  circular  desde  el  centro  hacia  fuera       • Dejar  secar  la  zona  durante  30  segundos  para  prevenir  la  hemólisis  de  la  muestra  y   reducir  la  sensación  de  ardor  en  la  venopunción.     • No  soplar,  no  abanicar  ni  colocar  nada  en  la  zona.     • No  tocar  la  zona  después  de  la  antisepsia.     • Si  la  venopunción  fuese  difícil  de  realizar  y  fuera  necesario  palpar  la  vena  de  nuevo   para  llevar  a  cabo  la  extracción,  se  debe  limpiar  la  zona  escogida  nuevamente.     Extracción  de  sangre  por  sistema  de  Vacío   La  extracción  de  sangre  por  vacío  es  la  técnica  de  extracción  de  sangre  venosa   recomendada  por  el  CLSI  en  la  actualidad.   En  la  actualidad  es  el  sistema  Vacutainer  es  el  más  utilizado,  este  consiste  en  extraer   sangre  intravenosa  al  vacío  y  específicamente  de  la  región  cubital  del  brazo.  


Descripción Se  trata  de  un  tubo  de  vidrio  y  de  plástico  PET  (polietilen  Ftalato)  al  vacío  con  un  tapón  de   plástico  blando,  que  permite  que  lo  atraviese  una  aguja  mediante  una  leve  presión.   Existen  varios  tipos  de  Vacutainer  que  se  diferencian  por  el  color  de  su  tapón.  Cada  color   de  tapón  indica  el  aditivo,  o  ausencia  del  mismo,  contenido  en  el  tubo.  Por  ejemplo,  los   tubos  de  tapón  color  lila  o  violeta  contienen  EDTA;  los  de  tapón  celeste  contienen  Citrato.     Ventajas   La  facilidad  en  la  manipulación  es  una  de  sus  ventajas,  dado  que  el  tubo  para  la  extracción   de  la  sangre  por  vacío  tiene  en  su  interior  vacío  calibrado  y  en  capacidad  proporcional  al   volumen  de  sangre  informado  en  su  etiqueta  externa,  lo  que  significa  que  cuando  la   sangre  deja  de  fluir  dentro  del  tubo,  la  persona  que  extrae  la  sangre  tendrá  la  certeza  de   que  se  extrajo  el  volumen  de  sangre  correcto.  La  cantidad  de  anticoagulante/  activador   del  coágulo  es  proporcional  al  volumen  de  sangre  que  tiene  que  ser  extraída,  generando,   al  final  de  la  extracción,  una  muestra  de  calidad  para  ser  procesada  o  analizada.     Los  pacientes  con  accesos  venosos  difíciles,  como  niños,  pacientes  en  tratamiento  médico,   sometidos  a  quimioterapia,  etc.,  también  se  benefician,  puesto  que  hay  productos  que   facilitan  estas  extracciones  (palomillas  para  extracción  múltiple  de  sangre  al  vacío  de   distintos  calibres  de  aguja  y  tubos  para  la  extracción  de  la  sangre  al  vacío  con  menores   volúmenes  de  aspiración).     Otro  aspecto  relevante  a  tener  en  cuenta  es  el  avance  de  la  tecnología  en  los  equipos  para   el  diagnóstico  y  equipos  con  mayor  especificidad  y  sensibilidad,  que  hoy  requieren  un   menor  volumen  de  muestra  del  paciente.     Seguridad  del  profesional  de  la  salud  y  del  paciente,  puesto  que  la  extracción  por  vacío  es   un  sistema  cerrado  de  extracción  de  sangre.  Al  punzar  la  vena  del  paciente,  la  sangre  fluye   directamente  de  su  vena  al  tubo  de  extracción  por  vacío.  Esto  proporciona  seguridad   biológica  a  la  persona  que  extrae  la  sangre,  puesto  que  no  hay  necesidad  de  manipulación   de  la  muestra  de  sangre.     Procedimiento   1. Desinfectarse  las  manos.   2. Pedir  al  paciente  que  se  siente.   3. Utilizar  guantes  desechables.   4. Colocar  la  extremidad  por  debajo  del  nivel  del  corazón  sobre  una  almohadilla   impermeable  desechable.   5. Colocar  el  torniquete  de  10  a  15  cm  por  encima  de  la  vi  conectada.  Tener  en   cuenta  que  una  pequeña  constricción  venosa  es  suficiente  para  resaltar  la  vena  (el   pulso  debe  ser  perceptible).   6. Puncionar  la  vena  seleccionada  y  aflojar  el  torniquete.  Las  venas  más  adecuadas   para  la  venopunción  son  fácilmente  palpables,  flexibles,  fácilmente  visibles  y,   preferiblemente,  bifurcadas  para  una  fijación  óptima.  


El liquido  celular  es  una  disolución  acuosa  altamente  concentrada  con  numerosas  solutos,   como  iones  inorgánicos,  pequeñas  moléculas  orgánicas  y  grandes  macromoléculas.  La   membrana  plasmática  que  lo  rodea  es  permeable  al  agua,  ósea,  que  el  H2O  puede  cruzar   esta  barrera  divisoria  mediante  la  difusión  directa.  Las  proteínas  que  forman  poros,  como   en  el  caso  de  la  aquaporina,  sirven  como  canales  de  agua  y  aceleran  el  “transito”  a  través   de  la  membrana.  La  mayoría  de  las  moléculas  citosolicas  no  pueden  cruzar  esta  barrera   hacia  el  mundo  exterior  sin  mas,  por  lo  que  hablamos  de  una  membrana  semipermeable.   Esto  tiene  importantes  consecuencias  físicas:  en  un  lado  de  la  membrana  plasmática  las   concentraciones  de  los  solutos  disueltos  es  superior  que  en  el  otro,  y  así  el  agua  “lucha   por  conseguir”  una  concentración  igual  creando  un  torrente  en  el  lado  con  la  disolución   mas  concentrada.  Este  flujo  de  agua,  denominado  ósmosis,  es  un  fenómeno  estático:  una   disolución  con  una  concentración  inferior  (una  disolución  hipotónica)  significa  que   requiere  de  una  concentración  elevada  del  disolvente  H2O.  La  posibilidad  de  que  el  H2O   se  coloque  en  vez  de  una  molécula  disuelta  en  el  poro  de  la  membrana  y  que  pueda  pasar   es,  por  tanto,  mayor  en  el  lado  de  la  concentración  hipotónica  en  el  lado  de  la  disolución   hipertónica  con  una  concentración  mayor  en  el  lado  de  la  concentración  hipotónica  que   en  el  lado  de  la  disolución  hipertónica  con  una  concentración  más  elevada  de  moléculas   disueltas.     Sin  un  impedimento  de  salida  de  masa,  en  un  medio  hipotónico  la  célula  se  hincharía  y   finalmente  explotaría.  Para  poder  mantenerse  contra  esta  presión  osmótica,  las  bacterias   y  las  células  de  las  plantas  cubren  su  membrana  plasmática  con  una  fuerte  pared  celular.   Las  células  animales  se  rodean  con  una  solución  isotónica,  es  decir,  la  actividad  osmótica   de  los  solutos  disueltos  en  el  fluido  extracelular  se  corresponde  en  gran  medida  con  la  del   flujo  intracelular.  Por  ello,  para  las  infusiones  intravenosas  se  usan  disoluciones  salinas   isotónicas,  cuya  concentración  de  sales  se  adapta  al  plasma  sanguíneo  y  con  ello  también   a  las  células  sanguíneas.     MATERIALES  Y  REACTIVOS    

 

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Jeringa Torniquete   Vacutainer   Torundas   Aguja   Guantes   Gradilla   Microscopio   Solución  isotónica   Solución  hipotónica  

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PROCEDIMIENTO

Solución hipertónica   3  tubos  de  ensayo   3  vasos  de  precipitado   Balanza   Agitador   NaCl   Sangre   Cubreobjetos   Portaobjetos   Microscopio


Procedimientos para  la  venopunción   Utilizando  Jeringa   1) Preparar   el   material   para   la   toma   de   muestra   como   son   ligadura,   torundas   con   alcohol,jeringa,  guantes,  tubos  con  los  aditivos  correspondientes.   2) Colocar  al  paciente  en  un  lugar  y  posición  cómoda  tanto  para  él  como  para  quién   tomará  la  muestra.   3) Localizar  la  vena  más  apta  para  la  extracción,   a. Esto  podrá  hacerse  mediante  palpación  solicitando  al  paciente  cierre  su  puño,   o   b. Colocando   momentáneamente   el   torniquete   para   hacer   más   palpables   las   venas,  una  vez  localizada  y  seleccionada  retirar  el  torniquete.   4) Limpiar  la  zona  de  punción  con  una  torunda  humedecida  con  alcohol  isopropílico  al   70%,o  yodopovidona  al  1%.  Se  comienza  en  el  punto  de  la  punción  y  se  prosigue  la   limpieza  hacia  afuera  siguiendo  un  movimiento  espiral.   5) Se   extrae   del   empaque   la   jeringa   y   asegurarse   de   eliminar   el   aire   que   pudiera   contener,  esto  se  logra  empujando  el  émbolo  hasta  el  fondo.   6) Colocar  el  torniquete  por  arriba  de  la  punción  unos  10  centímetros.   7) Quitar  el  protector  de  la  aguja  y  verificar  que  el  bisel  se  encuentre  hacia  arriba.   8) Se   fija   la   vena   por   debajo   del   lugar   de   punción,   con   ayuda   de   los   dedos   pulgar,   índice  y  medio.   9) Se   penetra   la   piel   con   la   aguja   formando   un   ángulo   de   15⁰   con   el   brazo   y   con   el   bisel  hacia  arriba  se  sigue  la  dirección  de  la  vena  considerando  introducir  la  aguja   con  suavidad  pero  con  rapidez.   10) Si  se  ha  realizado  una  buena  punción,  se  observará  la  sangre  en  la  base  de  la  aguja,   de   ser   así,   quitamos   el   torniquete   y   halamos   el   embolo   suave   y   continuamente,   hasta  tener  el  volumen  deseado.   11) Colocar  una  torunda  sobre  la  punción  sin  presionar,  y  extraer  la  aguja.   12) Tapar  la  aguja  y  quitarla  de  la  jeringa  para  proceder  a  vaciarla  a  los  tubos,  iniciando   con  aquél  que  no  tiene  anticoagulante  y  proseguir  con  los  demás.   13) Cuidar   de   vaciar   por   las   paredes   sin   ejercer   mucha   presión,   pues   ello   podrá   hemolizar  la  muestra.   14) Desechar  cada  residuo  como  lo  indica  la  norma.   Es  preferible  evitar  la  toma  de  muestra  con  jeringa,  ya  que  representa  más  inconvenientes   que   ventajas,   pero   de   hacerlo   no   olvidar   la   relación   que   debe   guardar   entre   el   anticoagulante  y  la  muestra,  de  tal  manera  que  no  haya  un  exceso  que  diluya  la  muestra   o,  por  el  contrario,  exista  tan  poco  que  se  formen  coágulos.     Utilizando  Sistemas  al  Vacío   1) Preparar   el   material   para   la   toma   de   muestra   como   son   ligadura,   torundas   con   alcohol,  agujas,  tubos  al  vacío,  soporte  para  tubos  y  guantes.   2) Colocar  al  paciente  en  un  lugar  y  posición  cómoda  tanto  para  él  como  para  quién   tomará  la  muestra.   3) Localizar  la  vena  más  apta  para  la  extracción,  


a. Esto podrá   hacerse   mediante   palpación   solicitando   al   paciente   cierre   su   puño,  o   b. Colocando  momentáneamente  el  torniquete  para  hacer  más  palpables  las   venas,  una  vez  localizada  y  seleccionada  retirar  el  torniquete.   4) Limpiar  la  zona  de  punción  con  una  torunda  humedecida  con  alcohol  isopropílico  al   70%,o  yodopovidona  al  1%.  Se  comienza  en  el  punto  de  la  punción  y  se  prosigue  la   limpieza  hacia  afuera  siguiendo  un  movimiento  espiral.   5) Colocar  la  aguja  en  el  soporte  del  sistema  al  vacío,  dejando  la  aguja  protegida  para   evitar  accidentes.   6) Colocar  el  torniquete  por  arriba  de  la  punción  unos  10  centímetros.   7) Quitar  el  protector  de  la  aguja  y  verificar  que  el  bisel  se  encuentre  hacia  arriba.   8) Se   fija   la   vena   por   debajo   del   lugar   de   punción,   con   ayuda   de   los   dedos   pulgar,   índice  y  medio.   9) Se   penetra   la   piel   con   la   aguja   formando   un   ángulo   de   15⁰   con   el   brazo   y   con   el   bisel  hacia  arriba  se  sigue  la  dirección  de  la  vena  considerando  introducir  la  aguja   con  suavidad  pero  con  rapidez.   10) Sujetar  firmemente  el  soporte  y  el  brazo  para  evitar  que  se  salga  o  lastimemos  al   paciente.   11) Quitamos   el   torniquete   y   procedemos   a   introducir   el   tubo   al   vacío   que   corresponda  según  el  tipo  de  estudio,  al  hacer  el  cambio  tener  cuidado  de  seguir   manteniendo  firme  el  soporte  y  brazo.   12) A   medida   que   vaya   ingresando   la   sangre   al   tubo,   girar   el   tubo   para   hacer   que   la   sangreentre  en  contacto  con  el  aditivo.   13) Colocar  una  torunda  sobre  la  punción  sin  presionar,  y  extraer  la  aguja.   14) Eliminar  la  aguja  en  el  contenedor  para  punzocortantes.   15) Desechar  cada  residuo  como  lo  indica  la  norma.  

Para  evitar  generar  más  residuos  de  lo  debido,  se  recomienda,  seleccionar  el  tubo  con  un   volumen  mínimo,  ya  que  existen  de  diversas  capacidades  como  son:  1,  1.8,  2,  2.5,  2.7,  3,   3.5,  4,  4.5,  5,  6,  7,  8,  8.5,  10  y  20  estas  capacidades  no  están  disponibles  para  todos  los   aditivos,   sin   embargo   los   tubos   más   comunes,   los   podemos   encontrar   para   volúmenes   pequeños.       RESULTADOS   Venopunción:   Solo  Castillejos  pudo  extraer  sangre  por  medio  de  vacutainer.     Soluciones:   Se  llevaron  a  cabo  3  observaciones  de  eritrocitos  en  el  microscopio.  Se  colocaron  5  ml  en  3   tubos  de  ensayo,  y  3  gotas  de  sangre  a  cada  uno  de  ellos.  Los  resultados  fueron  los   siguientes:      


DISCUSIÓN DE  RESULTADOS     En   la   práctica   realizada   se   enseñó   la   técnica   de   venopunción   con   el   sistema   Vacutainer,   además  de  que  se  explicó  las  medidas  de  seguridad  que  hay  que  tener  con  el  paciente  y  la   persona   que   hará   la   extracción   al   momento   de   manipular   las   agujas   y   las   muestras,   además  de  informar  donde  se  colocan  los  restos  de  desechos  biológicos  que  se  generan   durante  la  práctica.   Aparte  de  eso   se   prepararon  3  soluciones:  isotónica,  hipotónica  e  hipertónica,  a  las  cuales   se   les   agrego   unas   gotas   de   las   muestras   sanguíneas   recogidas   en   la   brevedad;   al   instante   se   mezclaron   y   se   observaron   en   el   microscopio   donde   se   observó   que   en   la   muestra   isotónica  los  eritrocitos  no  mostraban  ningún  tipo  de  alteración  o  cambio,  esto  se  debe  a   que  como  se  mencionó  antes  las  células  se  ven  rodeadas  de  la  solución  isotónica  dentro   del  cuerpo,  es  decir  la  actividad  osmótica  de  los  solutos  disueltos  en  el  fluido  extracelular   se   corresponde   a   flujo   intracelular;   al   observar   la   solución   hipertónica   se   encontró   a   los   eritrocitos  más  chicos  puesto  que  su  concentración  de  agua  es  más  baja  afuera  que  dentro   de   ella,   como   consecuencia   de   ello   se   ven   de   forma   más   pequeña,   y   por   último   en   la   solución   hipotónica,   se   observó   un   numero   de   eritrocitos   menor   que   en   todas   las   anteriores  esto  se  debe  a  que  la  concentración  de  agua  fuera  del  eritrocito  es  mayor  que   la  de  adentro  provocando  que  el  eritrocito  se  hinche  y  finalmente  se  rompa.     CONCLUSIÓN     Respecto   a   la   venopunción,   es   necesaria   mas   práctica   para   poder   tener   una   mejor   manipulación   tanto   con   el   torniquete,   como   con   el   vacutainer   y   la   aguja.   Es   un   poco   complejo   el   encontrar   las   venas   tanto   con   Fonseca   como   con   Castillejos,   puesto   que   se   llego   a   la   conclusión   que   ambas,   tienen   ¨venas   difíciles¨.   Aunque   de   ninguna   de   las   dos   se   pudo   extraer   sangre,   afortunadamente   ninguna   tuvo   efectos   secundarios,   tales   como   hematoma,   ni   ninguna   otra   alteración.   Puesto   que   ninguna   alumna   pudo   extraer,   fue   necesario  utilizar  la  sangre  del  maestro,  que  Castillejos  extrajo.  Posteriormente,  teniendo   las  soluciones  hipertónica,  hipotónica  e  isotónica,  colocamos  en  3  tubos  de  ensayo,  5  ml   de  cada  una  y  3  gotas  de  sangre  en  cada  uno  de  los  tubos.  Después  de  eso,  vimos  las  3  


reacciones de  los  eritrocitos  a  través  del  microscopio.  En  la  hipotónica  hubo  lisis,  puesto   que   se   reventaron   la   mayoría   de   los   eritrocitos   por   la   alta   concentración   de   agua,   en   la   isotónica   se   veian   igual   que   al   principio   y   en   la   hipertónica,   los   eritrocitos   eran   mas   pequeños.       BIBLIOGRAFIA   Deschka  Marc,  La  extracción  de  sangre  en  la  práctica   https://dafxbb5uxjcds.cloudfront.net/fileadmin/user_upload/99_Literatur/Spanisch/492_MarcDes chka_BE_ES_0114.pdf   Recomendaciones  de  la  sociedad  brasileña  de  patología  clínica  medicina  laboratorial  para  la   extracción  de  sangre  venosa-­‐  2°  edición-­‐2009.   Werner  Müller-­‐Esterl-­‐  Bioquimica.  Fundamentos  para  medicina  y  ciencias  de  la  vida.-­‐2008      

Practica no 4 BQ  
Practica no 4 BQ  
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