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Órgano

del

Colegio

de

Bioquímicos

de

S a n ta F e 2 d a . C i r c u n s c r i p c i ó n

Tiempo Bioquímico

S a n ta F e 1 8 2 8 - 2 0 0 0 R o s a r i o - ( 0 3 4 1 ) 4 2 5 8 1 8 7 / 4 2 4 1 0 1 2 Ley 3950 y Modif. 4105 - 4583 w w w. c o l e b l o q s f 2 . o r g - c o l e g i o @ c o l e b l o q s f 2 . o r g

Año 19 Agosto de 2016 Nº 72


Editorial

¿Necesitamos un nuevo código de ética? Cuando se crea nuestro colegio, a comienzos de la década del cincuenta del siglo pasado, los smartphones sólo existen en libros de ciencia ficción y los textos que nuestros primeros matriculados han usado en su formación se limitan a mencionar que en 1860 el químico suizo Johann Miescher aisló de los leucocitos una sustancia a la que denominó “nucleína” y en 1910 el alemán Albrecht Kossel mereció el premio Nobel de química por identificar sus componentes. El profesional de 1950 es un caballero de barba blanca que usa un guardapolvo almidonado encima de su traje y ejerce su arte rodeado de matraces humeantes, capaz de explicar a sus pacientes el significado de las inscripciones en latín en sus frascos color caramelo pero que los miraría estupefacto si aquellos mencionaran palabras como bioseguridad. Confidencialidad, trazabilidad y gestión ambiental. A nuestro venerable doctor jamás se le ocurriría hacer promociones de mercachifle tipo “derivame la alta complejidad y la rutina es gratis”, inundar el barrio de volantes ofreciendo estacionamientos y desayunos sin cargo, concurrir a tomar muestras en consultorios sin habilitar o retribuir a los colegas que trabajan para él con los mismos honorarios que abona a la persona que lo asiste en sus tareas domésticas. La necesidad de un Código de Etica acorde a los tiempos es, por consiguiente, tan o más importante como la de actualizar conocimientos y equipamientos.

cada una que trata la ley existe otra que no contempla y debe ser resuelta con un código de la época de la nucleína. ¿Qué publicidad es admisible? ¿Tiene sentido enviar análisis de rutina fuera de la provincia por una cuestión de costos (tema tratado en el anterior número de TIEMPO BIOQUIMICO)? ¿Cómo debe proceder un colega que tiene empleado a otro colega? ¿Que injerencia tiene el Colegio en los conflictos entre colegas y otros actores del sistema de salud? Para brindar un marco de referencia que permita trabajar en estas y otras cuestiones, nuestro Colegio y el de la primera circunscripción se encuentran abocados a la reforma del Código de Etica, en base tanto a la experiencia cotidiana d la gestión como al reconocimiento de los cambios tanto demográficos como sociales, tecnológicos y legislativos producidos desde 1950. Los invitamos, como siempre hacemos, a acercarse a la institución para conocer los anteproyectos, enriquecerlo con sus comentarios y aportar su visión para continuar enriqueciendo esta profesión que fue tan apasionante para el doctor del guardapolvo almidonado como lo es para nosotros.

Es oportuno recordar que la misión de los Colegios del Arte de Curar, tanto en el mundo de los guardapolvos almidonados como en el de los smartphones, sigue siendo la protección de la salud pública, tanto de gestión estatal como privada, por medio de la autorregulación de los profesionales, que obviamente, no puede ser dejada a la conciencia (o inconsciencia, dirían algunos…) individual, sino que necesita normas claras, concretas y concisas de lo que puede y no puede hacerse. Así la ética, definida en el diccionario como la rama de la filosofía que se ocupa de la moral, se convierte en la pieza central de nuestras relaciones con la sociedad, el equipo de salud y nuestros colegas. No nos cansaremos de recalcar la importancia que ha tenido la ley 13.236 de Ejercicio de la Profesión Bioquímica para muchas de las cuestiones que mencionamos en el párrafo anterior, pero por 3


SUMARIO Nº 72 Año 19 - Agosto 2016

Presidente: Dra. Patricia Faucetta

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Editorial Muchos motivos para

Actualidad 14 Expo

encontrarnos

9 y 10 de junio en el RosTower

Vicepresidente: Dr. Horacio Gianni Secretaria: Dra. Lidia Mannino Pro Secretaria: Dra. Liliana Cachero

el

Tesorero: Dr. Federico Contreras

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Pro Tesorero: Dr. Germán Perez

Colegio

Vocal titular: Dra. Norma Mogues

Curso Control de Calidad 6

Científica

Vocal Suplente: Dra. Sandra Álvarez

16 Congreso

Trabajos Científicos

Tribunal de Ética Titulares: Dr. Enzo Peralta Dr. José Berta Tribunal de Ética Suplentes: Dr. José Moreno Dr. Juan José Rodríguez Revisores de Cuentas Titulares: Dr. Juan José Rodríguez Dr. Roberto Baldarenas Revisores de Cuentas Suplentes: Dr. Rubén De Lisio Comisión de Formación Profesional Dr. Germán Pérez Dra. Nadia Gerhardt

18 Cena

Comisión de Certificaciones Dra. María Susana Galetto Dra. Sandra Álvarez Comisión de Problemática Profesional Dra. Florencia Facciuto Comisión de Extensión y Difusión Dra. Nadia Gerhardt Dra. Verónica Gallardo

www.colebioqsf2.org colegio@colebioqsf2.org

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Colegio

Curso Control de Calidad

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Científica

Trabajos Científicos 2016 CARACTERIZACIÓN DE UNA POBLACIÓN VIH POSITIVA Y SU INGRESO AL PROGRAMA NACIONAL VIH-SIDA Y ETS DURANTE LOS AÑOS 2013-2014 Romina Huanca 1. Juan Marcelo Riera 1. Natalia Lebensohn 1. Liliana Di Tullio 1. Miryam Pires 1.2. Oscar Di Paolo 1. Nora Quaglia 1. 1 Área Tecnología en Salud Pública. Centro de Tecnología en Salud Pública. 2 Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR E-mail: rhuanca@fbioyf.unr.edu.ar Palabras claves: Programa Nacional, diagnóstico VIH, VIH Positivo Introducción: En Argentina, una vez diagnosticados los individuos VIH positivo (VIHp) sin cobertura social tienen acceso al Programa Nacional de VIH-SIDA y ETS (PN). El Hospital Provincial del Centenario (HPC), Rosario, Santa Fe, cuenta con el Centro de Tecnología en Salud Pública (CTSP) en donde se efectúan los algoritmos diagnósticos para la detección y seguimiento de pacientes VIHp. Objetivo: caracterizar la población de pacientes diagnosticados VIHp en el CTSP y estimar la proporción de estos pacientes -algoritmo tradicional-, que ingresó al PN durante los años 2013-2014. METODOLOGÍA: estudio de corte transversal, a partir de la base de datos del CTSP (Datatech) perteneciente a los años 2013 y 2014. Se realizó le estadística descriptiva y las asociaciones de interés se testearon con las pruebas correspondientes. Se consideró en todos los casos significativo un valor de p<0,05. RESULTADOS: En el período 2013-2014 se diagnosticaron 215 pacientes como VIHp, estos fueron derivados de los Consultorios Externos y del Servicio de VIH del HPC (1): 74,4% (68,0%-80,1%), de diferentes organizaciones no gubernamentales (ONGs) (2):14,0% (9,6%-19,3%), y de las salas de internación del HPC (3): 11,6% (7,7%-17,7%). De los pacientes diagnosticados VIHp, el 69,8% (IC95%: 63,2-75,8%) fueron hombres. La edad (media ± SD; años) fue de 37,2. Las edades promedio de los pacientes derivados de la internación fue significativamente mayor que la de los pacientes externos (p<0,05). Un 46,5% (39,7%-53,4%) de pacientes con diagnóstico de VIHp ingresó al PN. Entre los pacientes externos ingresó al PN el 50,6% de los pacientes derivados de (1) mientras que los derivados (2) fueron un 33,3% (p=0,08). CONCLUSIONES: Es prioritario continuar con la concientización sobre el diagnóstico precoz y tratamiento de la enfermedad según se observa en la diferencia etaria hallada. Deben profundizarse estos estudios para determinar la falta de adherencia al PN y sus causales. 6

TEST DE AVIDEZ PARA DIFERENCIAR INFECCIÓN RECIENTE DE PASADA EN EMBARAZADAS CON ANTICUERPOS PARA TOXOPLASMOSIS IgG e IgM POSITIVOS Antolina Panizza. Eliana Ayuso. Julieta Schiavo. Marcelo Pugliessi. Martha Solari. Hugo Pugliessi. IBC Instituto de Bioquímica Clínica. E-mail: antolinapanizza@hotmail.com Palabras claves: AVIDEZ, TOXOPLASMOSIS, EMBARAZO Introducción: El Test de Avidez se basa en la detección de la madurez de los anticuerpos de clase IgG. Diferencia infecciones pasadas de recientes cuando se usa junto a IgM e IgG ya que los anticuerpos maduran con el tiempo. Objetivos: 1- Evaluar la prevalencia, en la población estudiada, con Anticuerpos para Toxoplasmosis IgG e IgM positivos, de pacientes con primoinfección. 2- Demostrar que los anticuerpos de clase IgM positivos no son suficientes para determinar que se trata de una infección aguda, en la población estudiada. 3- Evaluar si existe correlación entre la concentración de los anticuerpos IgG, y la avidez de los mismos. Materiales y métodos: Se recolectaron datos de 124 pruebas del Test de avidez realizadas a mujeres embarazadas con Toxo IgM positivas durante 3 meses. La prueba de avidez se realizó con un Inmunoensayo Quimiolumiscente (Abbott). La avidez de los anticuerpos de clase IgG se informa en porcentaje: ≤ 50% Avidez baja; ≥60 % Avidez alta. Un índice de avidez alto de anticuerpos IgG es un indicador fiable que la infección tuvo lugar como mínimo 4 meses antes, mientras que baja avidez sugiere una infección reciente. Resultados: de las 124 muestras positivas, el 90 % (112), tiene anticuerpos de clase IgG de alta avidez, el 10 % restante (12), son de baja avidez. Conclusiones: 1- En la población estudiada con anticuerpos IgG e IgM positivos, sólo el 10% presenta anticuerpos de baja avidez, lo que sugiere primoinfección. 2- Queda demostrado por el alto porcentaje de pruebas con anticuerpos de Toxo IgG de alta avidez, que los anticuerpos de clase IgM, si bien son marcadores de infección aguda, para esta población de pacientes su sola determinación no es suficiente, ya que pueden permanecer elevados por más de una año. 3- El valor de concentración de los anticuerpos de Toxo IgG no se corresponde con el tiempo de evolución de la infección, ya que en los tres rangos de concentración diferenciados se obtienen valores de baja avidez (primoinfección).


Científica REVISION DE NIVELES DE ARSENICO EN MUESTRAS DE AGUA DE LA REGION, DESTINADAS PARA CONSUMO HUMANO. Sabina Bianchi. Marcela Perez. Martha Solari. Hugo Pugliessi. IBC Instituto de Bioquimica Clinica E-mail: ibclab@ibcrosario.com.ar Palabras claves: arsénico, agua, santa fe, rosario Introducción: La contaminación de agua provocada por arsénico (As) es un problema de salud pública de importancia a nivel mundial debido al poder carcinógeno y neurotóxico del elemento. El As está presente en aguas subterráneas y superficiales, y su origen es variable. Las características organolépticas de las aguas arsenicales no suelen ser desagradables. El consumo de aguas contaminadas con As en dosis bajas de manera crónica puede producir efectos graves en la salud y llegar a convertirse en un problema social que afecte a comunidades enteras. Objetivos: Revisión de los resultados de arsénico, procesados en muestras de agua destinadas para consumo humano, durante el período Enero-2014/Agosto-2014 en la sección de Control de aguas y Absorción Atómica, y evaluación de su cumplimiento con la legislación vigente. Materiales y Métodos: Se determinó arsénico en 51 muestras de aguas destinadas para consumo humano. Se recolectaron datos respecto a la procedencia de las mismas. La determinación de As fue realizada con un espectrofotómetro de absorción atómica, modelo Perkin Elmer 3100, equipado con un sistema de generación de hidruros Perkin Elmer MHS10. La atomización térmica fue realizada en una celda de cuarzo calentada mediante una llama de aire/acetileno. Los estándares de trabajo fueron preparados a partir de una solución patrón de 1000 mg/L Merck. Conclusión: del total de aguas procesadas solo el 29% cumple con el Art. 982 del CAA. Esto pone de manifiesto que todavía son necesarios grandes esfuerzos para alcanzar los valores admitidos por el CAA, y que es fundamental concientizar a la población respecto de la situación actual de la región. IMPLEMENTACION DE UNA PCR EN TIEMPO REAL COMO METODO DIAGNOSTICO EN LA

PESQUISA NEONATAL DE CHAGAS CONGENITO. Sergio Lejona 1. Elina Gentini 1. Maria Ines Zamboni 1. Silvina Benetti 1. Adriana Acero 1. Bettina Willi 1. Tamara Spalding 1. Debora Sanchez 1. Melisa Rey 1. Gustavo Dip 2. Eduardo Anchart 3. 1 Biología Molecular. Municipalidad de Rosario. 2 Dirección de Bioquímica. Municipalidad de Rosario. 3 Secretaría de Salud. Provincia de Santa Fe. E-mail: slejona@yahoo.com.ar Palabras claves: PCR EN TIEMPO REAL, CHAGAS Introducción: El diagnóstico serológico de la infección neonatal por Trypanosoma cruzi se ve impedido debido a la transferencia pasiva de los anticuerpos IgG de la madre. Por otro lado, si bien en la infección congénita suele haber parasitemia, ésta no es siempre detectada por los métodos parasitológicos tradicionales. La PCR, que detecta y amplifica pequeñas cantidades de ADN parasitario, provee una alternativa complementaria para el diagnóstico de esta infección en el neonato. Objetivos: Evaluar la técnica de PCR en teimpo real para la pesquisa neonatal de Chagas congénito. Métodos: Como marcador de la presencia del parásito se realizó el micrométodo para la búsqueda microscópica de tripomastigotes circulantes. La reacción de PCR fue realizada a partir de 100ul de buffy coat, utilizando cebadores específicos para el ADN kinetoplástico y Satelital de Trypanosoma cruzi. Resultados: En el período de Abril 2015-2016 se realizó el seguimiento por PCR y micrométodo de 480 hijos de madre con serología positiva para Chagas provenientes de las Maternidades y Centros de Salud del Sur de la Provincia de Santa Fe. El algoritmo de diagnóstico consta de 3 controles: al nacimiento, 15 días, 30 días. Se realiza un último control a los 12 meses y es solamente serológico. En este período se detectaron 10 casos positivos (Incidencia 2.1%), tanto por el micrométodo como por PCR. La correlación entre ambos métodos fue de un 100%. En 6 de los 10 casos confirmados (60%) la PCR resultó positiva en controles anteriores al micrométodo. Conclusiones. La técnica de PCR representa una determinación alternativa al micrométodo la cual posee una

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Científica alta sensibilidad demostrada por los casos detectados en forma más temprana. DETERMINACIÓN DE LA EXPRESIÓN DEL GEN TWIST-1 EN SANGRE PERIFÉRICA DE PACIENTES CON CÁNCER DE MAMA. Georgina Florencia Gallucci 1. Estefania Massa 1. Sergio Ghersevich 1. Juan Capitaine Funes 2. Carlos Captaine Funes 3. Roberto Tozzini 1. 1 Área Bioquímica Clínica. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR. 2 Facultad de Ciencias Médicas. UNR. 3 Servicio Patología Mamaria. Hospital Provincial Centenario. E-mail: georgi_gallucci@hotmail.com Palabras claves: cáncer de mama, TWIST1, células circulantes tumorales Las células neoplásicas que pasan a sangre se denominan células tumorales circulantes (CTC) y su detección tiene un papel emergente como biomarcadores para el pronóstico de pacientes con cáncer de mama. Las CTC experimentan una transición epitelial a mesenquimal que facilita la metástasis, relacionada con el aumento de expresión del gen TWIST1. El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de TWIST1 proveniente de CTC en sangre de pacientes con cáncer de mama previo a su tratamiento. Se obtuvieron muestras de sangre periférica de pacientes del Servicio de Patología Mamaria del Hospital Provincial del Centenario. Como control se utilizaron muestras de donantes voluntarios sanas. De las muestras de sangre se aislaron células mononucleadas y se extrajo

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ARN. Se realizó una retrotranscripción y luego una PCR en tiempo real para detectar la expresión del gen TWIST1 utilizando primers específicos y al gen de la gliceraldehído fosfato deshidrogenasa (GADPH) como control. Se definió Ct al número mínimo de ciclos de PCR en que se detectó producto amplificado. En los controles sanos (n=7) y en los pacientes (n=11) se calculó deltaCt= CtTWIST1- CtGADPH. Se analizaron los niveles de expresión del ARNm de TWIST1 en los pacientes, en relación al promedio de expresión en donantes sanos a través del método de comparación del nivel de expresión=2-(delta delta Ct), considerando 1 a la expresión detectada en los controles normales. En los controles se observó un delta Ct= 4,13 ± 0,61 que se utilizó como referencia. Analizando los deltaCt de cada paciente se encontró que 4 de los 11 pacientes (36%) estudiados presentaron la expresión de TWIST1 aumentada desde 3 hasta 12 veces respecto de los controles sanos. Tres de dichas pacientes no presentaron metástasis en ganglios en tanto que en la cuarta se detectó metástasis hepática. El incremento de la expresión de TWIST1 indicaría la presencia de CTC con características favorables al desarrollo de metástasis en dichas pacientes. DESARROLLO Y COMPARACIÓN DE 3 ENSAYOS PARA LA DETECCIÓN DE LA MUTACIÓN R506Q DEL FACTOR V (FACTOR V LEIDEN). Germán Roberto Perez. Mónica Torruella. Gammalab. Grupo Gamma. Rosario. E-mail: grperez@igamma.com


Científica Palabras claves: ensayos moleculares, Factor V Leiden El Factor V Leiden es responsable de la forma más frecuente de trombofilia hereditaria. El 10% de los individuos afectados pueden desarrollar trombosis venosas profundas y tromboembolismos. Este proceso se debe a una mutación en el gen F5 (sustitución del nucleótido G por el nucleótido A en la posición 1691) que provoca el reemplazo de una Arginina por una Glutamina en la posición 506 de la proteína Factor V. OBJETIVO. Desarrollo, optimización y validación de 3 ensayos moleculares para la detección de la mutación del Factor V Leiden. MATERIALES Y MÉTODOS. Se diseñaron cebadores y/o sondas para la amplificación de segmentos del gen F5 conteniendo la mutación 1691G>A: i) ensayo A: Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) de punto final, corte del producto con la enzima MnlI y análisis de los fragmentos de restricción en gel, ii) ensayo B: PCR en tiempo real y análisis de las curvas de disociación de alta resolución, iii) ensayo C: PCR en tiempo real con sondas de hidrólisis base-específica. Los ensayos se optimizaron con muestras previamente caracterizadas por un método comercial (ATGen). Se purificó ADN genómico de 140 pacientes con sospecha de padecer procesos tromboembólicos y se analizaron con los 3 ensayos. RESULTADOS. Se obtuvo coincidencia de resultados para los tres métodos en el 99,3% (139/140) de las muestras analizadas [Homocigota normal (HN): 88,5% (123/139), Heterocigota (HT): 6,5% (9/139), Homocigota patológico (HP): 5,0% (7/139)]. Una muestra (#37) resultó HP

por el ensayo B y HN por los ensayos A y C. El producto de PCR de la muestra #37 fue secuenciado y reveló una sustitución G>A en homocigosis en la posición 1709, y homocigosis GG (HN) en la posición 1069, lo cual fue identificado como HP por el ensayo B. CONCLUSIÓN: Se observó una concordancia en los resultados del 99,3% para los tres ensayos, la cual se encuentra dentro de los parámetros reportados en ensayos comerciales. COMPARACIÓN DE LOS VALORES DE UN INDICADOR DE GESTIÓN PARA EL ANÁLISIS DE LA COBERTURA EN EL SISTEMA PÚBLICO DE SALUD EN LOS AÑOS 2008 Y 2014. Laura Valenti. Romina Huanca. Liliana Racca. Natalia Lebensohn. Oscar Di Paolo. CTSP. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR. E-mail: valentilaura7@gmail.com Palabras claves: Indicador de gestión-Carga Viral VIHVIH Introducción: El Programa de Dirección de Sida y Enfermedades de Transmisión Sexual (VIH-SIDA y ETS) cubre los análisis para personas con VIH, que se atienden en el sistema público de salud: medición de Carga Viral (CV), recuento de CD4 y test de Resistencia. Se recomienda el estudio de la CV al menos 2 o 3 veces al año para determinar el momento oportuno para comenzar el tratamiento antirretroviral y en las personas que ya están bajo tratamiento, permite evaluar su efectividad. Objetivo:

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Científica comparar el grado de cobertura en el sistema público de salud mediante un indicador de gestión en los años 2008 y 2014. Materiales y Métodos: estudio epidemiológico a partir de la base de datos (Datatech) del Centro de Tecnología en Salud Pública (CTSP) correspondiente a los años 2008 y 2014. Los datos objeto de análisis corresponden al número de determinaciones de CV VIH a personas con VIH, que reciben atención médica en efectores públicos de la la Provincia de Santa Fe realizadas en el CTSP, al número de pacientes y al número promedio de determinaciones. Se compararon los promedios de las variables cuantitativas de ambas poblaciones utilizando el test de Student para muestras independientes y para estudiar la asociación se aplicó el test de Chi-cuadrado. Resultados: en el período 2008 se realizaron 1742 CV VIH, 1,2 en promedio por persona y en el año 2014, 4343 con promedio de 1,5. La efectividad del Programa en los años estudiados resultó del 0,7% y 9,4% respectivamente; siendo significativamente mayor el porcentaje de pacientes que adhirieron al Programa en el año 2014 (p<0,01). Conclusión: Durante el año 2014 se observó una mayor adherencia de pacientes VIH positivos al Programa, lo cual podría asociarse a la implementación de la autorización de tres CV en un único trámite además de la informatización de este sistema, mejorando así la accesibilidad a los servicios, siendo este uno de los principios estratégicos de Programa VIH-SIDA e ITS. 10 AÑOS DE EXPERIENCIA EN LA IMPLEMENTACIÓN DE UN SISTEMA DE GESTIÓN DE CALIDAD EN UN LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS. Luciana Salcedo. Rosina Giacosa. Elisabet Ricardo. Andrés Albrecht. Laboratorio Mega. E-mail: lsalcedo@laboratoriomega.com.ar Palabras claves: Gestión, Calidad Introducción: En 2002 la Dirección de Laboratorio Mega decide implementar un Sistema de Gestión de Calidad (SGC) para satisfacer las necesidades de los clientes, mejorar la calidad del servicio, impulsar la confianza, fortalecer el trabajo en equipo, disminuir costos por menor n° de errores, demoras y repeticiones, mejorar la utilización del tiempo, equipos y reactivos. MATERIALES Y MÉTODOS: El proceso de implementación comprende el desarrollo del SGG, su puesta en práctica y Certificación mediante Auditoría. Distintos mecanismos permiten conocer y satisfacer las necesidades de los colegas y evaluar la eficacia del SGC: Encuestas de Satisfacción, Reuniones de Tratamiento de errores, Reuniones de Comité de Gestión y de Revisión por la Dirección (que incluyen análisis de: No Conformidades, Acciones Correctivas/Preventivas, Indicadores, Objetivos, Capacitación y Eventos de clientes). RESULTADOS: En 2005 se certifica el SGC bajo la Norma ISO 9001, en 2015 dicha certificación cumple 10 años. Las herramientas del SGC permiten adecuar el servicio a las necesidades de los colegas, tomar decisiones 10

para optimizar procesos, como por ejemplo: reestructuración de las áreas de trabajo, incorporación de tecnología y sistemas informáticos, trazabilidad de muestras y resultados, recepción de pacientes online, capacitaciones. La Dirección establece Objetivos de Calidad coherentes con la Política de Calidad, medibles y alcanzables en el tiempo. El Sistema de Eventos de Clientes permite un contacto directo con el colega a fin de solucionar inconvenientes con las muestras enviadas. CONCLUSIONES: La implementación de un Sistema de Gestión de Calidad requiere el compromiso total, serio y responsable de todos los niveles. Los cambios a partir de la implementación del SGC son muy importantes, las actividades se realizan en forma planificada, controlada y apuntando siempre a la satisfacción del cliente. Se han fortalecido vínculos con colegas y entre el personal del Laboratorio. TECNOLOGIAS DE GESTIÓN: HERRAMIENTA APLICADA EN UN LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS PARA EL LOGRO DE MAYOR PRODUCTIVIDAD Y EFICIENCIA. Rosina Giacosa. Luciana Salcedo. Andrés Albrecht. Elisabet Ricardo. Laboratorio Mega. E-mail: rgiacosa@laboratoriomega.com.ar Palabras claves: Productividad, eficiencia Introducción: Nuestro laboratorio implementó un Sistema de Gestión de Calidad (SGC) certificado bajo la Norma ISO 9001:2008 desde 2005. Uno de sus objetivos es la excelencia en los servicios prestados, para esto es primordial que la eficientización de procesos acompañe el crecimiento para la mejora continua. En 2015, se agregó un enfoque productivo, basado en experiencias industriales japonesas que requiere que el personal comprenda conceptos básicos de organización industrial. MATERIALES Y MÉTODOS: Inti nos capacitó en las metodologías a implementar según Programa Kaisen para el mejoramiento de la producción y la calidad. La metodología “5S” que abarca el conjunto de actividades sobre hábitos y comportamiento de las personas se aplicó en Área manual (AM). La metodología 7P “7 pérdidas de la productividad” que implica determinar 7 actividades que no agregan valor y que atentan contra la misma se aplicó en Área Pre-Analítica (PA) y Área Automatizada (AA). RESULTADOS: “5S”AM: se eliminó material innecesario de pasillos, bajo mesadas y se reordenó el material necesario, se organizaron heladeras y se trasladó el área de lavado. PA: foco de improductividad medido: cantidad de muestras defectuosas que no cumplen con los requisitos del laboratorio provocando demoras en el ingreso por interrupción. AA: foco medido: cantidad de muestras defectuosas que no cumplen con los requisitos. Estos problemas implican esfuerzos adicionales (improductividades) que acarrean costos que fueron medidos. CONCLUSIONES: la prueba piloto fue positiva, el personal percibió el procesamiento de muestras como un proceso productivo y valoró las metodologías aplicadas para identificar tareas improductivas, que de ser elimi-


Científica nadas o minimizadas mejorarían la calidad de sus tareas, del producto final que son los resultados emitidos, y la productividad del laboratorio. MÉTRICA SIX SIGMA PARA LA EVALUACIÓN DE LA PERFORMANCE DE PROCEDIMIENTOS DE MEDIDA DE QUÍMICA CLÍNICA. Elisabet Ricardo. Antonela Marozzi. Luciana Salcedo. Rosina Giacosa. Andres Albrecht. Laboratorio Mega. E-mail: aalbrecht@laboratoriomega.com.ar Palabras claves: procedimientos de medida, calidad de métodos analíticos, acciones correctivas Introducción: Six Sigma (σ) es una herramienta empleada para la mejora continua de la calidad de los procesos, disminuir el número de defectos y reducir los costos garantizando la seguridad del paciente. En este trabajo se evalúa el desempeño de los procedimientos de medida del laboratorio; se considera aceptable cuando el Error total es menor al Eta (Requisito de Calidad). (σ) y el Error Sistemático crítico (ESc) son buenos indicadores del desempeño de un método analítico frente al ETa. A mayor ESc o (σ), mejor es el desempeño del procedimiento de medida, y es posible utilizar un esquema de control de calidad más simple. Materiales y métodos: Con los datos de la Planificación del Control de Calidad Interno del laboratorio evaluamos el desempeño de los procedimientos de medida de Glucosa, Albúmina, Creatinina, Fosfatasa alcalina, GPT, Amilasa, GOT, CPK, Hierro, GGT, Calcio, LDH, Magnesio, Colesterol, Ácido úrico y Colinesterasa. La correlación utilizada para la interpretación de los resultados consistió en: INACEPTABLE (σ menor a 2); POBRE (σ entre 2 y 3); MARGINAL (σ entre 3 y 4); BUENO (σ entre 4 y 5); MUY BUENO (σentre 5 y 6); EXCELENTE – GOLD ESTÁNDAR (σ mayor de 6). Resultados: en Junio de 2015 el 62.5% de los analitos evaluados presentaban un σ mayor a 6, el 12.5 %, un σ entre 5 y 6; el 6.25%, σ entre 4 y 5; un 12.5%, σ entre 3 y 4 y el 6.25%, σ menor de 3. Para los analitos con σ menor a 3, se tomaron acciones correctivas para mejorar la Precisión y Exactitud. La regla de control a aplicar en esos casos es una Multirregla (1 3s/2 2s/R4s/4 1s/ 8x), con 2 corridas analíticas y 4 controles. Los analitos con desempeño mayor a 6 presentaron regla simple (1 3s) con 1 corrida analítica y 2 niveles de control. Conclusiones: El cálculo σ nos permitió conocer la calidad de los métodos, detectar necesidades, oportunidades de mejora y evaluar la eficacia de las acciones correctivas, contribuyendo a la mejora continua MONITOREO TERAPÉUTICO DE VANCOMICINA EN PLASMA. DESARROLLO Y OPTIMIZACIÓN MEDIANTE DISEÑO EXPERIMENTAL DE UN MÉTODO ANALÍTICO POR CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO RENDIMIENTO. Ariana Beatriz Alasino. Laboratorio de Control de Calidad de Medicamentos, Facultad de Bioquímica y Ciencias. Biológicas, Universidad

Nacional del Litoral, CC. 242, Ciudad Universitaria, 3000 Santa Fe, Argentina. E-mail: ariana_alasino@hotmail.com Palabras claves: Vancomicina, Monitoreo, CLAR Introducción: La vancomicina, un antibiótico utilizado para tratar infecciones por Staphylococcus aureus resistente a meticilina, produce nefrotoxicidad y ototoxicidad a altas concentraciones. La terapia con niveles subterapéuticos provoca falla en el tratamiento y el riesgo de generar resistencia microbiana. Se recomienda un valor plasmático de vancomicina en el valle de 15 – 20 µg/ mL. El monitoreo terapéutico de drogas (MTD) permite ajustar las dosis para que los pacientes puedan alcanzar estos niveles. En este trabajo se desarrolló y optimizó un método por cromatografía líquida para el MTD de vancomicina. MATERIALES Y MÉTODOS: 200 μL de plasma se desproteinizaron con ácido perclórico, se inyectaron 20 µL de sobrenadante. Se utilizó una columna Poroshell 120 EC-C18 3.0 x 75 mm con un tamaño de partícula de 2.7 µm, en un cromatógrafo líquido Agilent serie 1260 Infinity con detector de arreglo de diodos. El pH, la composición de la fase móvil (FM) (buffer de fosfato: metanol) y la temperatura del horno de columna se optimizaron quimiométricamente. La longitud de onda se fijó en 240 nm y la velocidad de flujo en 0.4 mL/min. El método fue validado siguiendo las pautas de la Agencia Médica Europea (EMEA), utilizando estándar INAME de vancomicina. RESULTADOS: Los valores óptimos para la FM fueron de un pH=2.8 y 15% de metanol, la temperatura del horno fue de 40ºC. Se logró separara la vancomicina de 19 medicamentos en 10 minutos. Los ensayos de validación demostraron que el método es selectivo sin interferencias de componentes endógenos, hemólisis ni medicación concomitante. El límite inferior de cuantificación resultó de 1.0 µg/mL. La calibración demostró linealidad en el rango de 1.0 – 60 µg/mL. Los estudios de exactitud y precisión presentaron recuperaciones y CV que cumplieron los criterios establecidos por la EMEA. CONCLUSIONES: El método presentado es eficiente y rápido permitiendo realizar el MTD de vancomicina en forma confiable con instrumentación sencilla. MONITOREO TERAPÉUTICO DE METOTREXATO EN PACIENTES PEDIÁTRICOS CON LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA AGUDA. ESTUDIO DE CASOS EN CENTROS DE SALUD DE LA CIUDAD DE SANTA FE. Lucía Torregiani. Yamile Soledad Caro. María Mercedes De Zan. Laboratorio de Control de Calidad de Medicamentos. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral. Santa Fe E-mail: ycaro@fbcb.unl.edu.ar Palabras claves: metotrexato, monitoreo terapéutico, leucemia linfoblástica aguda Introducción: el metotrexato (MTX) es un citostático administrado en altas dosis a pacientes pediátricos con leu11


Científica cemia linfoblástica aguda (LLA). Para evitar la toxicidad en células sanas, el tratamiento requiere del monitoreo de las concentraciones plasmáticas y la administración de leucovorina (LCV) como inhibidor de su acción tóxica. Cuando los niveles plasmáticos exceden los límites establecidos según protocolos, se refuerzan los rescates con LCV hasta alcanzar la eliminación total del MTX. Materiales y Métodos: los dosajes se realizaron por HPLC aplicando un procedimiento altamente eficiente, rápido y selectivo, desarrollado en el laboratorio. Se evaluaron los niveles de MTX de 55 pacientes pediátricos con LLA tratados en Centros de Salud de Santa Fe durante 5 años (2011-2015) con dos tipos de tratamientos: infusión de 24 horas (I24) e infusión de 36 horas (I36). En I24 se realizaron dosajes a las 24, 42 y 48 hs de iniciada la infusión y en I36 a las 36 y 48 hs post infusión. En los casos necesarios se continuó el monitoreo hasta alcanzar el nivel de corte < 0.25 µM. Resultados: 46 pacientes (83.6%) recibieron I24 cada 14 días, con un total de hasta 7 infusiones. En 6 pacientes (13%) el valor de MTX estuvo por arriba de los niveles seguros, por lo que recibieron rescates personalizados con LCV. En un caso particular el paciente debió recibir rescates personalizados en las 4 infusiones, y monitorearse 7 días consecutivos hasta alcanzar el valor de corte. De los 9 pacientes que recibieron I36, todos ellos con recaída de LLA, 5 (55.6%) presentaron niveles de MTX superiores a los valores establecidos. Conclusión: los dosajes de MTX realizados en el laboratorio con resultados disponibles dentro de las dos horas de la extracción de la muestra, han sido fundamentales para la toma de decisiones médicas en la individualización del tratamiento, minimizándose la incidencia de efectos adversos graves relacionados con altas concentraciones de MTX. CHAGAS CRONICO: EVALUACION DE IL6 COMO MARCADOR BIOLOGICO DE PATOLOGIA E INFLUENCIA DEL TRATAMIENTO TRIPANOCIDA. Gloria Andrea Gallegos. Edith Guadalupe Felli. Susana Denner. Maria Laura Bizai. Veronica Olivera. Diana Fabbro. Centro de Investigaciones sobre Endemias Nacionales Dr. Ramón Carrillo (CIEN); Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral. E-mail: gloria_gallegos@outlook.com Palabras claves: Chagas; Il6; Tripanocida; Cardiopatia Chagasica En la enfermedad de Chagas (causada por el Trypanosoma cruzi) es clave el papel del proceso inflamatorio tanto en la génesis como en la progresión de las lesiones cardíacas. La relación de la interleuquina 6 (IL6) en el proceso evolutivo es aún desconocido. El objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles séricos de IL6 y analizar su relación con el tratamiento tripanocida y la cardiopatía chagásica crónica (CCC). Se analizaron 53 sueros (con menos de 2 años de antigüedad) provenientes del último control de pacientes chagásicos crónicos con seguimiento clínico 12

mayor a 15 años. Los pacientes se agruparon en: A) 17 Infectados chagásicos crónicos sin patología que recibieron tratamiento tripanocida Benznidazol o Nifurtimox (con serología final negativa); B) 24 Infectados chagásicos crónicos sin patología demostrada que no recibieron tratamiento; y C) 12 Infectados que presentaron CCC. El grupo control lo conformaron 5 personas sanas no infectadas. Los 58 sueros se procesaron por duplicado, en base al kit Human IL6 ELISA Set de BD OptEIATM. En cada una de las mediciones se realizó la curva estándar determinada por el inserto, comprobando la linealidad esperada. Los valores promedios de IL6 obtenidos fueron los siguientes: A: 24,1 ± 29,6 pg/mL; B: 28,6 ± 45,8 pg/mL; C: 33,5 ± 67,3 pg/mL; control: 4,0 ± 3,2 pg/mL; Si bien cada grupo posee una gran dispersión, los pacientes infectados (correspondientes a los grupos A, B y C) presentaron valores medios más elevados que el grupo control. Mediante el método estadístico Man-Whitney, se compararon los niveles de IL6 entre los grupos A y B (p=0,6690), B y C (p=0,7068) y A y C (p=0,7068), encontrándose que no hay diferencia significativa entre ellos. Los niveles de IL6 no fueron modificados por el tratamiento y no se encontró asociación entre las concentraciones de IL6 y la CCC. Para corroborar esto es necesario incrementar el tamaño de la muestra. ESTUDIO DE ESTRÉS OXIDATIVO E INFLAMACION EN MIOCARDIOPATIA CHAGASICA. Mabel D Arrigo 1. Gabriela Gerrard 1. Susana Lioi 1. Romina Diviani 1. Maria Jose Ceruti 1. Maria Belen Marti 1. Juan Beloscar 2. 1 Área Química Analítica Clínica. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario. 2 ACarrera de Cardiologia. Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Rosario. E-mail: darrigomabel@yahoo.com.ar Palabras claves: estres oxidativo, inflamación, chagas Introducción: Los factores fisiopatológicos que controlan la formación y la perpetuación de la inflamación cardíaca en los pacientes chagásicos aún no fueron totalmente aclarados. El estrés oxidativo constante en el corazón contribuiría a la miocardiopatía chagásica (MCC). Reacciones inflamatorias en el corazón se relacionarían con mayor producción de citoquinas que inducirían una mayor generación de especies reactivas de oxígeno y de nitrógeno (ROS/RNS). El factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa) induciría selectivamente a superoxido dismutasa (SOD). OBJETIVO: realizar un estudio descriptivo de biomarcadores de estrés oxidativo como actividad enzimática de superoxido dismutasa (SOD), medición de punto final de la oxidación lipídica es el ensayo SRAT (Sustancias Reactivas al Acido Tiobarbitúrico, tBARS) y de marcador de inflamación el factor de necrosis tumoral alfa (TNFalfa). MATERIAL Y METODOS: Se analizaron individuos controles (CN=55) y chagásicos con miocardiopatia (MCC=45), a los cuales se les realizó examen car-


Científica diovascular, Todos dieron su consentimiento. El tamaño muestral fue calculado estadísticamente para lograr una estimación representativa de la población total, con una confianza del 95%. En muestras de sangre se analizaron las actividades enzimáticas de SOD por método espectrofotométrico (Ransel Labs), tBARS y TNFalfa por inmunométodo ELISA (BD). Para el estudio estadístico se realizó análisis de variancia a un criterio de clasificación, se aplicó Kruskal Wallis. RESULTADOS: actividades de SOD (USOD/gHb): CN 895±214, MCC 3270±233; MDA/TBARS (nmol/ml): CN= 2.30±0.62 y MCC=4.04±1.82 p< 0.001; TNFalfa (pg/ml) CN=7.7±2.4 y MCC= 33.3±7.2. p<0.001. CONCLUSIONES: La determinación de peroxidación lipídica, junto a otros biomarcadores de estrés oxidativo y de inflamación, sería potencialmente útil en el diseño de modelos predictivos para identificar pacientes chagásicos con riesgo de desarrollar complicaciones clínicas. NUEVA ESTRATEGIA DIAGNOSTICA PARA LA DETECCIÓN TEMPRANA Y SENSIBLE DE C. trachomatis. Romina López. INQUISAL, Departamento de Química. Universidad Nacional de San Luis-CONICET E-mail: romilopez19@gmail.com Palabras claves: Diagnostico, C. trachomatis, Electroforesis Capilar Actualmente, la infección genital por C. trachomatis es considerada una de las causas más frecuentes de infecciones transmisibles sexualmente (ITS). Esta patología representa un importante problema de salud pública a nivel mundial, dada su creciente prevalencia en adolescentes y jóvenes adultos. La rápida determinación en laboratorios de análisis clínicos resulta esencial para la pronta aplicación de una terapia exitosa. La detección e identificación de esta bacteria no ha sido fácil de realizar, debido a la necesidad de disponer de instalaciones de bioseguridad para el aislamiento mediante cultivo celular y a los problemas relacionados con las reacciones cruzadas en pruebas serológicas. En el presente trabajo proponemos el desarrollo de un diagnóstico rápido y sensible, mediante la utilización de nano-diamantes (NDs) y electroforesis capilar (EC). El análisis se realiza con muestras de muestras de exudado vaginal. A partir del hisopo se practica una extracción con azida sódica, seguido de sonicado y centrifugado. Luego de retirar y descartar el sobrenadante, se retoma el precipitado con buffer fosfato pH 7,4. Posteriormente realizamos la incubación de la muestra con el bio-conjugado, compuesto de NDs unidos a anticuerpos (Ac) anti MOMP (proteína principal de membrana) a 37 °C durante 15 min. Una vez transcurrido el tiempo de reacción antígeno-anticuerpo se procede a la inyección de la muestra en el equipo de EC (Beckman P/ACE MDQ). La detección se realizó a λ= 200 nm. La presencia de un pico Ag-Ac-NDs delata la positividad en la muestra analizada. Como re-

sultados preliminares hemos podido identificar los picos correspondientes al NDs, al Ac y NDs-Ac. La identificación de picos positivos utilizando anticuerpos anti-MOMP, nos permitirá realizar un diagnóstico sensible y especifico evitando el informe de falsos negativos y falsos positivos, lo que representaría un importante avance en el diagnóstico de C. trachomatis. IMPLEMENTACIÓN DE UN SERVICIO DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR EN CÁNCER HEREDITARIO. Patricia Rocio Saldías 1. Germán Roberto Perez 2. Mónica Torruella 2. 1 Centro Médico Las Vertientes. Grupo Gamma. Rosario. 2 Gammalab. Grupo Gamma. Rosario. E-mail: psaldias@grupogamma.com Palabras claves: Cáncer Hereditario, Asesoramiento Genético, Estudios moleculares El cáncer es una enfermedad heterogénea y multifactorial. El 5–10% de los tumores tienen carácter hereditario y requieren un estudio genético para su diagnóstico. El abordaje del paciente y su familia con sospecha de cáncer hereditario (CH) debe ser dentro de una consulta de asesoramiento genético donde se informa de la probabilidad de presentar una neoplasia y de transmitir a su descendencia la predisposición al cáncer, así como del pronóstico, estrategias de detección precoz y tratamiento más adecuado. OBJETIVO. Implementar el Servicio de Diagnóstico Molecular en Cáncer Hereditario (S-CH) compuesto de la Unidad de Asesoramiento Genético en Oncología (U-AGO) y la Unidad de Medicina Genómica (U-MG). MATERIALES Y MÉTODOS. El proceso de implementación comprendió: i) capacitar a los servicios médicos para identificar a los pacientes con riesgo elevado de presentar un CH, ii) determinar criterios para la derivación del paciente a la U-AGO, iii) desarrollar la U-MG para disponer de ensayos genéticos adecuados, y iv) establecer protocolos de seguimiento. RESULTADOS. La U-AGO permitió valorar los antecedentes personales y familiares del paciente y evaluar el riesgo de padecer la enfermedad según las recomendaciones del Instituto Nacional del Cáncer (INC), seleccionar los estudios genéticos, interpretar los ensayos moleculares en familias con riesgo, asesorar sobre los resultados de los estudios e informar sobre las medidas disponibles para la prevención, el diagnóstico precoz y reducción del riesgo de desarrollar la enfermedad. La U-MG llevó a cabo los estudios genéticos de secuenciación genómica para la identificación de mutaciones por Next Generation Sequencing (Ion Torrens) y los ensayos de MLPA para detección de grandes alteraciones o reordenamientos génicos (Holland-MRC). CONCLUSIÓN. En los 6 meses desde su creación, el S-CH permitió la atención integral del paciente observándose una mayor adherencia del paciente a completar el estudio hereditario de su patología. 13


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Tiempo Bioquímico 72  

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