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Analise n~icrobioioxicada agiio. pisina 40

Método de filtro d e membrana (Recuento de Enterococos Fecales)

Fundamento Utilización de lactosa y maltosa como carbohidratos ferrnentables, y azida sódica como agente selectivo. La adición de cloruro de trifenil tetrazolio al 1%(TIC) hace que los enterococos tengan un color rojo oscuro como resultado de la reducción tetrazólica a un azocolorante ácido. Medio: Agar KF Streptococcus Extracto de caseína Extracto de carne Extracto de levadura Clroruro sódico Glicerofosfato sódico Maltosa Lactosa Azida sódica Agar-agar Agua destilada

5.0 g 5.0 g 10.0 g 5.0 g 10.0 g 20.0 g 1.0 g 0.4 g 20 g 1.O litro

Disolver calentando hasta ebullición. Dejar hervir durante 5 minutos enfriar hasta 50 ó 60°C y añadir 10 ml de una solución ésteril de TTC (cloruro de trifenil tetrazolio) al 1%. No esterilizar en autoclave. Procedimiento Se filtra una cantidad adecuada del agua a analizar, previamente homogeneizada, sobre un filtro de membrana estéril. El volumen de agua filtrada no debe ser inferior a 30 ml. Utilizando unas pinzas previamente flamedas se coloca la membrana sobre la placa con el medio de agar KF Streptococcus. Incubar las placas invertidas a

~ T48Choras

Al cabo de este tiempo se realiza un recuento directo de las colonias rojas o rosas. El color puede cubrir totalmente o solo en parte la superficie de la colonia. Las colonias de color naranja, amarillo, blanco u otros colores no se cuentan. Expresión de los resultados: Los resultados se expresan en número de colonias por 100 ml de muestra. Se debe calcular utilizando filtros de membrana que tengan 20-60 colonias de enterococos fecales OBSERVACIONES: Es conveniente completar la identificación de los enterococos fecales, además de con

la obsemación morfológica y tinción Gram, con la prueba de la catalasa. Para ello, resembrar con asa en superficie sobre agar nutritivo en placa. Incubar a 37°C 24h. Realizar el Gram y la prueba de la catalasa de las colonias que se obtengan en la placa.


Enterococos fecales filtracion de membrana