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Informe examen práctico microbiología 1º ensayo: -a) Análisis enteroccocus fecalis en alimento. (mermelada) Procedimiento: se introduce en el stomacher la muestra en agua de peptona y se filtran 50 mL de muestra. No se realizó el ensayo por falta de medios de cultivo. -b) Análisis coliformes totales en un mosto. Muestra tomada el día miércoles 30-5-2012. Basado en el PNT nº 8 que se ajusta a la norma ISO 8523. *Medios utilizados. Ágar ENDO en placa. *Procedimiento. Se procede a la filtración por membrana de una muestra de 50 mL de mosto y cuidadosamente se pone el filtro en una placa con ágar ENDO. Se deja incubar durante 24 h a 37ºC. *Resultados e interpretación. No hay nada de crecimiento, con lo que se interpreta que el mosto no tiene coliformes totales.

2º ensayo: -c) Aislamiento enterococus fecales en medio general. *Medios utilizados. TSA en placa. *Procedimiento. Se realiza la técnica por agotamiento de estría. Consiste en tomar un inóculo de la cepa y realizar lo siguiente:


Se deja a incubar a 37ºC en este caso (enterococus fecales) durante 24h. De esta forma la carga microbiana se va agotando cada vez más hasta alcanzar el punto de conseguir colonias aisladas.

*Resultados e interpretación de los mismos. En el grupo 1 tenemos mucho crecimiento, en el grupo 2 menos y en el 3 muchísimo menos. En el grupo 4 ya se encuentran colonias aisladas.

-e) Tinción de Gram. *Reactivos y material utilizados. Portaobjetos para frotis bacterianos Solución de cristal violeta al 1% Solución de safranina al 0,5% Solución diluida de yodo (Lugol) Alcohol-acetona (1:1) o bien alcohol al 95% Cubeta de tinciones Microscopio y aceite de inmersión

*Procedimiento. 1. Preparar los frotis bacterianos y fijar a la llama 2. Teñir con cristal violeta 2 min. 3. Quitar el exceso de colorante sin lavar con agua 4.Cubrir con Lugol 1 min. 5. Quitar el exceso de Lugol sin lavar. 6. Decolorar con alcohol de 96º o alcohol-acetona durante 1 minuto 7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente. 8. Teñir con safranina 1min.


9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste. 10. Secar la preparación al aire. 11. Examinar al microscopio poniendo previamente aceite de inmersión.

*Resultados e interpretación. Aparecen figuras circulares de un color azulado. Se determina que son gram positivos.

3º ensayo: -f) Análisis de superficies (uñas y manos) y cultivo de estos hongos y levaduras en placa. Basado en el PNT 005 de acuerdo con la norma ISO 7954. Con los cambios que no se realizó el ensayo por siembra en masa, sino en superficie y no se realizó a 25ºC durante 6 días, sino a 37ºC durante 48h. *Medios y eluyentes utilizados. Se utiliza agua de peptona para mojar el hisopo y ágar CGA para la siembra en placa de la muestra. *Procedimiento. Se moja el hisopo en agua de peptona y se frota en la superficie a muestrear. Acto seguido se hace un césped con el hisopo en la placa que contiene CGA y se incuba a 37ºC durante 48h. *Resultados e interpretación: No se obtuvo ningún crecimiento. De este modo se determina que el resultado es 0 UFC/en manos y uñas.


Informe micro