Reproducción
Efecto de proteínas del plasma seminal en la motilidad y fertilidad de espermatozoides ovinos crioconservados Alejandra Bernardini (1) | Federico Hozbor (1) | Jorgelina Manes (1) Glenda Rios (1) | Eduardo Sánchez (1) | Ricardo Alberio (1) | Andreina Cesari (2)
(1) Investigador. Biotecnología de la Reproducción, EEA INTA Balcarce. (2) Investigador. Instituto de Investigaciones Biológicas, FCEyN UNMdP, Mar del Plata. Contacto: fhozbor@balcarce.inta.gov.ar
INTRODUCCIÓN
MATERIALES Y MÉTODOS
La inseminación artificial es una herramienta de gran valor en la reproducción asistida. Esta técnica exige la conservación del semen mediante congelación. En algunas especies, la “crioconservación” induce cambios en la membrana plasmática que reproducen las características de espermatozoides que han iniciado la capacitación, reduciendo notablemente la capacidad fertilizante de estas células [1]. El plasma seminal (PS) de carnero es capaz de revertir lo efectos nocivos producidos por el congelamiento sobre los espermatozoides mejorando los parámetros seminales post-descongelación, especialmente la motilidad [2,3]. La posibilidad de utilizar fracciones de PS para mejorar el semen crioconservado contribuirá al desarrollo de medios de congelación de composición definida.
Ensayo A. Espermatozoides de carnero mótiles obtenidos mediante un gradiente de Percoll (5 x 106/ ml) se incubaron a 37ºC con 20% v/v de PS ovino (PS) como control positivo, proteínas de PS que se unen a la membrana espermática (FR) con 1.5 mg/ ml de fructosa (FRf), PS sin proteínas de la FR (PS-) o buffer PBS con 1.5 mg/ml de fructosa (PBS) como control negativo. La motilidad espermática se midió a los 30 min de incubación y se expresó como relativa a tiempo cero. Se realizaron 3 experimentos. Ensayo B. Espermatozoides de carnero descongelados fueron incubados con 20% v/v de PS (PS, control positivo), FR con 1,5 mg/ml de fructosa (FRf) o buffer PBS con 1,5 mg/ml de fructosa (PBS, control negativo). La dosis inseminante fue de 120x106 espermatozoides totales. Se sincronizaron 88 ovejas y se inseminaron vía cervical entre 15 y 30 min luego de preparar las incubaciones. La cantidad de ovejas preñadas fue medida mediante ecografías a los 40 días después de la inseminación. Los datos se analizaron mediante el PROC MIXED del SAS. p = 0.05
Hipotetizamos que una fracción de proteínas del PS que interactúan con la membrana espermática (FR) está involucrada en el mejoramiento de la gameta masculina crioconservada [4]. La incubación de espermatozoides con estas proteínas no evitó la pérdida de motilidad espermática postdescongelación [4]. En este trabajo evaluamos la capacidad de la FR con el agregado de una fuente de energía de mejorar la motilidad y la fertilidad in vivo de espermatozoides ovinos crioconservados.
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RESULTADOS Ensayo A. No se obtuvieron diferencias significativas entre tratamientos respecto al parámetro motilidad